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Novikoff Hepatoma
Tessuto
Fegato
Malattia
Carcinoma epatocellulare
Sinonimi
Novikoff-Hepatoma, NK

Documenti

Novikoff Hepatoma

Cell line · Codice prodotto 500373

Novikoff-Hepatoma, also known as Novikoff Hepatoma or NK, is a rat hepatocellular carcinoma cell line derived from a male Sprague Dawley rat (Rattus norve...

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1

01Informazioni generali

Descrizione

Novikoff-Hepatoma, noto anche come Novikoff Hepatoma o NK, è una linea cellulare di carcinoma epatocellulare di ratto derivata da un ratto maschio della varietà Sprague Dawley (Rattus norvegicus). Il tumore ha avuto origine come epatoma indotto sperimentalmente ed è stato ampiamente utilizzato come modello trapiantabile e in vitro di cancro al fegato del ratto. Rappresenta un carcinoma epatocellulare scarsamente differenziato ed è caratterizzato da una rapida proliferazione e da un'elevata capacità tumorigenica in ospiti singeneici. La linea cellulare N1-S1 ha origine dallo stesso tumore individuale, il che indica un background genetico condiviso tra questi derivati correlati.

Le cellule Novikoff-Hepatoma presentano caratteristiche morfologiche e biochimiche compatibili con quelle degli epatociti maligni, tra cui un’attività metabolica alterata, un controllo del ciclo cellulare disregolato e una biogenesi nucleolare e ribosomiale potenziata, tipica dei tumori epatici a crescita rapida. Storicamente, questo modello è stato ampiamente utilizzato negli studi sulla carcinogenesi epatica, sul metabolismo tumorale, sulla sintesi di RNA e proteine e sulla risposta chemioterapica nei sistemi dei roditori. Grazie alle sue caratteristiche di crescita robusta e alla sua riproducibilità, questa linea è stata utilizzata come modello classico nell’oncologia sperimentale, in particolare per lo studio della biologia del carcinoma epatocellulare in modelli di ratti immunocompetenti.

In quanto linea tumorale derivata dallo Sprague Dawley, il Novikoff-Hepatoma è compatibile con studi di trapianto singeneico nel corrispondente ceppo di ratto, consentendo lo studio delle interazioni tumore-ospite, degli interventi terapeutici e delle strategie di trattamento loco-regionale quali la somministrazione intra-arteriosa di farmaci. La sua storia sperimentale ben documentata e il fenotipo maligno stabile ne fanno un prezioso modello preclinico per studi meccanicistici sulla progressione del carcinoma epatocellulare e sulla risposta al trattamento in vivo e in vitro.

Tessuto
Fegato
Malattia
Carcinoma epatocellulare
Applicazioni
Induzione dell'epatoma
Sinonimi
  • Novikoff-Hepatoma
  • NK

02Classificazione

Organismo
Ratto
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Aderente e in sospensione
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Tumorigenico
Sì, nel ratto Sprague-Dawley

04Identificatori

Riferimento bibliografico
Epatoma Novikoff (numero di catalogo Cytion 500373)
Codice fiscale NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_1D01

05Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
RPMI 1640, w: 2,0 mM di glutammina stabile, w: 2,0 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820700a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Subcoltura
Omogeneizzare delicatamente la sospensione cellulare nel pallone pipettando verso l'alto e verso il basso, quindi prelevare un campione rappresentativo per determinare la densità cellulare per ml. Diluire la sospensione per ottenere una concentrazione cellulare di 1 x 105 cellule/ml con terreno di coltura fresco e aliquotare la sospensione regolata in nuovi palloni per l'ulteriore coltivazione.
Densità di semina
1 x 105 cellule/ml
Recupero post-scongelamento
Bene. Lasciare che le cellule si riprendano dal processo di congelamento per almeno 24-48 ore.
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

07Donatore

Razza / sottospecie
Sprague-Dawley