- Audinys
- Endocervix
- Liga
- Adenokarcinoma
- Metastazių vieta
- Pirminės naviko lokalizacijos vieta (gimdos kaklelio vidinė dalis)
- Sinonimai
- HK-CRISPR-CAP-H-mEGFP #86, HK CRISPR CAP-H-mEGFP
Dokumentai
HK-CRISPR-CAP-H-mEGFP
Cell line · Prekės numeris 301568
Ląstelių linija „HK-CRISPR-CAP-H-mEGFP“ yra iš žmogaus ląstelių išgautas modelis, sukurtas pažangiems genų redagavimo ir fluorescencijos taikymams. Ši ląstelių linija pagrįsta...
Pritaikymas / Rekomendacijos
- HK-CRISPR-CAP-H-mEGFPCell line€800.00
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
01Bendra informacija
- Aprašymas
HK-CRISPR-CAP-H-mEGFP ląstelių linija - tai žmogaus kilmės modelis, sukurtas pažangiam genų redagavimui ir fluorescencijai. Ši ląstelių linija pagrįsta tėvine žmogaus ląstelių linija ir modifikuota naudojant CRISPR-Cas9 technologiją, kad būtų išreikštas CAP-H (Chromosome-Associated Protein H) genas, pažymėtas monomeriniu sustiprintu žaliuoju fluorescenciniu baltymu (mEGFP). Ši modifikacija leidžia tiksliai vizualizuoti ir sekti CAP-H - kondensino komplekso komponentą, kuris yra labai svarbus chromosomų kondensacijai ir stabilizavimui dalijantis ląstelėms. MEGFP žymė užtikrina stiprų ir stabilų fluorescencijos signalą, todėl ši ląstelių linija idealiai tinka gyvų ląstelių vaizdavimui ir fluorescenciniams tyrimams.
HK-CRISPR-CAP-H-mEGFP ląstelių linija ypač vertinga atliekant ląstelių ciklo reguliavimo, mitozės ir chromosomų dinamikos tyrimus. Mokslininkai gali naudoti šį modelį, norėdami ištirti kondensino kompleksų vaidmenį palaikant chromosomų vientisumą, ypač tokiose kritinėse fazėse kaip metafazė ir anafazė. Stabilus mEGFP žymos integravimas užtikrina nuoseklią išraišką ir patikimus eksperimentų rezultatus, taip padidinant skirtingų tyrimų atkuriamumą.
- Audinys
- Endocervix
- Liga
- Adenokarcinoma
- Metastazių vieta
- Pirminės naviko lokalizacijos vieta (gimdos kaklelio vidinė dalis)
- Paraiškos
- „Condensin I“ komplekso biologija; CAP-H vaizdinimas; chromosomų kondensacija; mitozinių chromatidų struktūra; gyvų ląstelių vaizdinimas; ląstelių ciklo tyrimai; CRISPR „knock-in“ metodo patvirtinimas; chromosomų vientisumo tyrimai
- Sinonimai
- HK-CRISPR-CAP-H-mEGFP #86
- HK CRISPR CAP-H-mEGFP
02Klasifikacija
- Organizmas
- Žmogus
- Seksas
- Moteris
- Augimo savybės
- Prisijungęs
- GMO statusas
- GMO-S1
- Išsami informacija apie GMO statusą
- GMO-S1: This HeLa Kyoto line contains a CRISPR-mediated mEGFP knock-in at the CAP-H locus enabling live imaging of mitotic chromatin. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biologinio saugumo lygis
- 1
03Charakteristikos
- Morfologija
- Į epitelį panašios ląstelės su mozaikos formos akmenukais
- Ląstelių tipas
- Epitelio ląstelės
04Identifikatoriai
- Nuoroda
- HK-CRISPR-CAP-H-mEGFP (Cytion katalogo numeris 301568)
- NCBI mokesčių identifikavimo kodas
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_UR43
- Indėlininkas
- Ellenbergo laboratorija (EMBL)
05Išraiška ir jautrumas
- Produktai
- EGFP (sustiprintas žaliasis fluorescuojantis baltymas)
06Laikymas ir auginimas
- Maitinamoji terpė
- DMEM, š: 4,5 g/l gliukozės, š: 4 mM L-glutamino, š: 3,7 g/l NaHCO3, š: 1,0 mM natrio piruvato (Cytion gaminio numeris 820300a)
- Inkubacijos aplinka
37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.
- Maisto papildai
- Papildykite terpę 10 % FBS
- Disociacijos reagentas
- Accutase
- Subkultūrinis auginimas
- Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
- Skysčių atnaujinimas
- 2-3 kartus per savaitę
- Atšildymas ir auginimas
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas
- Sterilumas
Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.
Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.
- Šaldymo terpė
- Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
- Laikymo sąlygos
Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.
- Pristatymo sąlygos
Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.
08Donoras
- Donoro amžius
- 30 metų
- Etninė priklausomybė
- Afroamerikietis
09Teisiniai ir saugos klausimai
- Saugos priemonės
- Planuojant saugoti kriovaistinę skystame azote, kad ateityje ją būtų galima atšildyti, būtina laikytis griežtų saugos priemonių. Būtina mūvėti tinkamas apsaugines pirštines ir drabužius, o perkeliant užšaldytus mėginius į skystojo azoto talpyklą arba iš jos būtina naudoti veido kaukę arba apsauginius akinius. Taip siekiama sumažinti sužeidimų riziką dėl galimo kriokomponentų sprogimo išėmimo metu, kai gali išsiveržti aštrūs fragmentai.
- Garantija
" Cytion" garantuoja savo produktų kokybę ir gyvybingumą. Garantuojame, kad mūsų ląstelės bus gyvybingos kultūrų auginimo pradžioje 60 dienų po išsiuntimo iš mūsų gamyklos. Užtikriname, kad visos medžiagos atitinka analizės sertifikate ir (arba) gaminio lape aprašytas specifikacijas
Išsamią informaciją rasite mūsų <a href=""/Kas mes esame/garantijos/" hreflang=""x-default"">Garantijos pareiškime
- Taikomos susitarimai su trečiosiomis šalimis
- Taip