HK-CRISPR-CAP-H-mEGFP

Garis sel HK-CRISPR-CAP-H-mEGFP adalah model turunan manusia yang direkayasa untuk pengeditan gen tingkat lanjut dan aplikasi fluoresensi. Garis sel ini didasarkan pada garis sel manusia orang tua dan telah dimodifikasi menggunakan teknologi CRISPR-Cas9 untuk mengekspresikan gen CAP-H (Chromosome-Associated Protein H) yang ditandai dengan monomer Enhanced Green Fluorescent Protein (mEGFP). Modifikasi ini memungkinkan visualisasi dan pelacakan CAP-H yang tepat, komponen kompleks kondensin yang penting untuk kondensasi kromosom dan stabilisasi selama pembelahan sel. Tag mEGFP memberikan sinyal fluoresensi yang kuat dan stabil, menjadikan garis sel ini ideal untuk pencitraan sel hidup dan pengujian berbasis fluoresensi.

Garis sel HK-CRISPR-CAP-H-mEGFP sangat berharga untuk studi dalam regulasi siklus sel, mitosis, dan dinamika kromosom. Para peneliti dapat menggunakan model ini untuk menyelidiki peran kompleks kondensin dalam menjaga integritas kromosom, terutama selama fase kritis seperti metafase dan anafase. Integrasi yang stabil dari tag mEGFP memastikan ekspresi yang konsisten dan hasil eksperimental yang dapat diandalkan, meningkatkan reproduktifitas di berbagai penelitian.

37°C, 5%_CO2, atmosfer yang dilembabkan.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

Di Cytion, kami mendukung kualitas dan kelangsungan hidup produk kami. Kami menjamin bahwa sel kami akan dapat bertahan hidup pada awal kultur selama 60 hari setelah pengiriman dari fasilitas kami. Kami menjamin bahwa semua bahan sesuai dengan spesifikasi yang dijelaskan dalam Sertifikat Analisis dan / atau Lembar Produk

Untuk detail lengkap, silakan merujuk ke <a href=""/Siapa-kami-Garansi/Garansi/"" hreflang=""x-default"">Pernyataan Jaminan kami