HK-CRISPR-CAP-H-mEGFP

Die HK-CRISPR-CAP-H-mEGFP-Zelllinie ist ein vom Menschen abstammendes Modell, das für fortgeschrittenes Gene Editing und Fluoreszenzanwendungen entwickelt wurde. Diese Zelllinie basiert auf einer elterlichen menschlichen Zelllinie und wurde mithilfe der CRISPR-Cas9-Technologie modifiziert, um ein CAP-H-Gen (Chromosomen-assoziiertes Protein H) zu exprimieren, das mit monomerem Enhanced Green Fluorescent Protein (mEGFP) markiert ist. Diese Modifikation ermöglicht eine präzise Visualisierung und Verfolgung von CAP-H, einer Komponente des Kondensin-Komplexes, die für die Chromosomenkondensation und -stabilisierung während der Zellteilung entscheidend ist. Der mEGFP-Tag liefert ein starkes und stabiles Fluoreszenzsignal, wodurch sich diese Zelllinie ideal für die Bildgebung in lebenden Zellen und fluoreszenzbasierte Assays eignet.

Die HK-CRISPR-CAP-H-mEGFP-Zelllinie ist besonders wertvoll für Studien zur Regulierung des Zellzyklus, der Mitose und der chromosomalen Dynamik. Forscher können dieses Modell nutzen, um die Rolle der Kondensinkomplexe bei der Aufrechterhaltung der chromosomalen Integrität zu untersuchen, insbesondere während kritischer Phasen wie der Metaphase und Anaphase. Die stabile Integration des mEGFP-Tags gewährleistet eine konsistente Expression und zuverlässige experimentelle Ergebnisse, wodurch die Reproduzierbarkeit in verschiedenen Studien verbessert wird.

37°C, 5%_CO2, befeuchtete Atmosphäre.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

Bei Cytion stehen wir hinter der Qualität und Lebensfähigkeit unserer Produkte. Wir garantieren, dass unsere Zellen zu Beginn der Kultur für 60 Tage nach dem Versand aus unseren Einrichtungen lebensfähig sind. Wir versichern, dass alle Materialien mit den im Analysezertifikat und/oder Produktblatt beschriebenen Spezifikationen übereinstimmen

Ausführliche Informationen finden Sie in unserer <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantieerklärung