MDS-L

MDS-L yra žmogaus mielodisplastinio sindromo (MDS) kilusi ląstelių linija, iš pradžių sukurta iš MDS92 ląstelių linijos, kuri pati buvo gauta iš MDS sergančio paciento, turinčio del(5q) chromosomų anomaliją, kaulų čiulpų. Nors MDS92 sudarė heterogeninis mieloidinių ląstelių, esančių įvairiuose diferenciacijos etapuose, mišinys, MDS-L yra blastinė sublinija, turinti vienodesnes savybes, būdingas nesubrendusioms mieloidinėms progenitorinėms ląstelėms. MDS-L išlaiko interleukino-3 (IL-3) priklausomybę proliferacijai in vitro, atspindėdama citokinų jautrumą, pastebimą pirminėse MDS progenitorinėse ląstelėse. Linija turi daug genetinių pokyčių, įskaitant homozigotines TP53 mutacijas ir papildomas įgytas mutacijas NRAS ir CEBPA. Šie pokyčiai kartu atspindi kloninę evoliuciją ir leukeminės transformacijos potencialą, būdingą didelės rizikos MDS.

MDS-L buvo plačiai naudojamas kaip modelis MDS patogenezės, diferenciacijos blokavimo ir terapinio atsparumo molekulinėms mechanizmams tirti. Vienas reikšmingas atradimas, naudojant MDS-L, buvo įrodymas, kad priverstinis granulocitų kolonijas stimuliuojančio faktoriaus receptoriaus (G-CSFR) ekspresija per retrovirusinę transdukciją leido granulocitų diferenciaciją po G-CSF stimuliacijos. Tai patvirtino morfologiniai pokyčiai, padidėjusi CD11b ekspresija ir sustiprėjusi nitroblue tetrazolium (NBT) redukcijos aktyvumas, rodantis galutinį granulocitų brendimą. Šie rezultatai atskleidė MDS-L vidinį gebėjimą diferencijuotis, jei atkuriami atitinkami signaliniai komponentai, ir suteikė įžvalgų apie galimus genų terapijos metodus, nukreiptus į MDS diferenciacijos defektus.

Be genetinių ir funkcinių tyrimų, MDS-L buvo labai svarbus charakterizuojant histonų modifikacijų vaidmenį ligos progresavime. Pažymėtina, kad histono H3-K27M mutacija, paprastai siejama su vaikų gliomomis, bet reta hematologinėse piktybinėse ligose, buvo identifikuota MDS-L ir nustatyta, kad ji slopina EZH2 mediatorių histono metilinimą. Šis epigenetinis pokytis lėmė plačiai paplitusį H3-K27 metilinimo sumažėjimą ir buvo susijęs su pakitusiais naviko slopinančių genų, pvz., p16, ekspresija. MDS-L sublinijos su šia mutacija arba be jos, gautos skirtingomis IL-3 kultivavimo sąlygomis, leido toliau tirti epigenetinę heterogeniškumą MDS ir jo reikšmę IL-3 priklausomam augimui ir terapiniam atsakui. Šios unikalios savybės daro MDS-L galingu in vitro ir in vivo modeliu, skirtam tirti MDS molekulinę evoliuciją ir terapinį taikymą bei jo transformaciją į ūminę mieloidinę leukemiją.

37 °C, 5 %_CO2, drėkintoje atmosferoje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

" Cytion" garantuoja savo produktų kokybę ir gyvybingumą. Garantuojame, kad mūsų ląstelės bus gyvybingos kultūrų auginimo pradžioje 60 dienų po išsiuntimo iš mūsų gamyklos. Užtikriname, kad visos medžiagos atitinka analizės sertifikate ir (arba) gaminio lape aprašytas specifikacijas

Išsamią informaciją rasite mūsų <a href=""/Kas mes esame/garantijos/" hreflang=""x-default"">Garantijos pareiškime