MDS-L

MDS-L הוא קו תאים שמקורו בתסמונת מיאלודיספלסטית (MDS) אנושית, שנוצר במקור מקו התאים MDS92, אשר נגזר ממח העצם של חולה עם MDS שהציג חריגה כרומוזומלית del(5q). בעוד ש-MDS92 הכיל תערובת הטרוגנית של תאי מיאלואידים בשלבים שונים של התמיינות, MDS-L מייצג תת-קו תאים בלאסטיים עם מאפיינים אחידים יותר, האופייניים לתאי אב מיאלואידים לא בשלים. MDS-L שומר על תלות באינטרלוקין-3 (IL-3) לצורך התרבות במבחנה, מה שמשקף את הרגישות לציטוקינים הנצפית בתאי אב מיאלואידיים ראשוניים. הקו מכיל שינויים גנטיים מרובים, כולל מוטציות TP53 הומוזיגוטיות ומוטציות נוספות שנרכשו ב-NRAS ו-CEBPA. שינויים אלה משקפים יחד את האבולוציה הקלונלית ואת פוטנציאל ההמרה לוקמיה האופייניים ל-MDS בסיכון גבוה.

MDS-L שימש באופן נרחב כמודל לחקר המנגנונים המולקולריים העומדים בבסיס הפתוגנזה של MDS, חסימת ההבחנה והתנגדות לטיפול. ממצא משמעותי אחד בשימוש ב-MDS-L היה ההוכחה כי ביטוי מאולץ של קולטן גורם גדילה של גרנולוציטים (G-CSFR) באמצעות העברה רטרו-ויראלית איפשר הבחנה גרנולוציטית בעקבות גירוי G-CSF. דבר זה הוכח על ידי שינויים מורפולוגיים, עלייה בביטוי CD11b ופעילות מופחתת של ניטרובלו טטרזוליום (NBT) – המעידה על התבגרות סופית של גרנולוציטים. תוצאות אלה חשפו את היכולת הפנימית של MDS-L להתמיין אם מרכיבי האיתות המתאימים משוחזרים, ומספקות תובנות לגבי גישות פוטנציאליות לטיפול גנטי המכוונות לפגמים בהבחנה ב-MDS.

בנוסף למחקרים גנטיים ותפקודיים, MDS-L היה מכריע באפיון תפקידם של שינויים בהיסטונים בהתקדמות המחלה. בפרט, המוטציה בהיסטון H3-K27M, הנפוצה בגידולים מוחיים בילדים אך נדירה בממאירויות המטולוגיות, זוהתה ב-MDS-L ונמצא כי היא מעכבת מתילציה של היסטונים בתיווך EZH2. שינוי אפיגנטי זה הוביל לירידה נרחבת במתילציה של H3-K27 ונקשר לשינוי בביטוי של גנים מדכאי גידולים כגון p16. תת-קווי MDS-L עם או בלי מוטציה זו, שנגזרו מתנאי תרבית IL-3 דיפרנציאליים, אפשרו לחקור עוד יותר את ההטרוגניות האפיגנטית בתוך MDS והשלכותיה על צמיחה תלוית IL-3 ותגובה טיפולית. תכונות ייחודיות אלה הופכות את MDS-L למודל רב עוצמה in vitro ו-in vivo לחקר האבולוציה המולקולרית והמיקוד הטיפולי של MDS והפיכתו ללוקמיה מיאלואידית חריפה.

37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.

לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו