MDS-L

MDS-L, MDS92 hücre hattından türetilen bir insan miyelodisplastik sendrom (MDS) kaynaklı hücre hattıdır ve MDS92 hücre hattı, del(5q) kromozom anomalisine sahip bir MDS hastasının kemik iliğinden türetilmiştir. MDS92, farklı farklılaşma aşamalarında bulunan heterojen bir miyeloid hücre karışımı içerirken, MDS-L, olgunlaşmamış miyeloid progenitör hücrelerin karakteristik özelliği olan daha homojen özelliklere sahip bir blastik alt hattı temsil eder. MDS-L, birincil MDS progenitör hücrelerinde görülen sitokin duyarlılığını yansıtarak, in vitro proliferasyon için interlökin-3 (IL-3) bağımlılığını korur. Bu hata, homozigot TP53 mutasyonları ve NRAS ve CEBPA'da ek olarak edinilen mutasyonlar dahil olmak üzere çok sayıda genetik değişiklik barındırır. Bu değişiklikler, yüksek riskli MDS için tipik olan klonal evrim ve lösemik transformasyon potansiyelini toplu olarak yansıtır.

MDS-L, MDS patogenezi, farklılaşma bloğu ve terapötik direncin altında yatan moleküler mekanizmaları araştırmak için yaygın olarak kullanılan bir modeldir. MDS-L kullanılarak elde edilen önemli bir bulgu, retroviral transdüksiyon yoluyla granülosit koloni uyarıcı faktör reseptörünün (G-CSFR) zorla ekspresyonunun, G-CSF stimülasyonu üzerine granülositik farklılaşmayı mümkün kıldığıdır. Bu, morfolojik değişiklikler, artan CD11b ekspresyonu ve terminal granülosit olgunlaşmasını gösteren nitroblue tetrazolium (NBT) indirgeme aktivitesinin artmasıyla kanıtlanmıştır. Bu sonuçlar, uygun sinyal bileşenleri geri yüklendiğinde MDS-L'nin farklılaşma kapasitesini ortaya koymuş ve MDS'deki farklılaşma kusurlarını hedefleyen potansiyel gen terapisi yaklaşımları hakkında fikir vermiştir.

Genetik ve fonksiyonel çalışmalara ek olarak, MDS-L, hastalık ilerlemesinde histon modifikasyonlarının rolünü karakterize etmede önemli bir rol oynamıştır. Özellikle, pediatrik gliomlarla sık ilişkili ancak hematolojik malignitelerde nadir görülen histon H3-K27M mutasyonu, MDS-L'de tanımlanmış ve EZH2 aracılı histon metilasyonunu inhibe ettiği bulunmuştur. Bu epigenetik değişiklik, H3-K27 metilasyonunda yaygın bir azalmaya yol açmış ve p16 gibi tümör supresör genlerinin ekspresyonundaki değişikliklerle bağlantılı bulunmuştur. Farklı IL-3 kültür koşulları yoluyla elde edilen bu mutasyona sahip veya sahip olmayan MDS-L alt hatları, MDS içindeki epigenetik heterojenliğin ve bunun IL-3'e bağlı büyüme ve terapötik yanıt üzerindeki etkilerinin daha fazla araştırılmasına olanak sağlamıştır. Bu benzersiz özellikler, MDS-L'yi MDS'nin moleküler evrimi ve terapötik hedeflemesi ile akut miyeloid lösemiye dönüşümünü incelemek için güçlü bir in vitro ve in vivo model haline getirmektedir.

37°C, %5_CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

Cytion olarak ürünlerimizin kalitesinin ve canlılığının arkasındayız. Hücrelerimizin, tesislerimizden sevkiyattan sonra 60 gün boyunca kültürün başlangıcında canlı olacağını garanti ediyoruz. Tüm malzemelerin Analiz Sertifikası ve/veya Ürün Sayfasında açıklanan özelliklere uygun olduğunu garanti ediyoruz

Tüm ayrıntılar için lütfen <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garanti Beyanımıza bakın