MDS-L

MDS-L adalah garis sel yang berasal dari sindrom mielodisplastik manusia (MDS), yang awalnya didirikan dari garis sel MDS92, yang sendiri berasal dari sumsum tulang pasien dengan MDS yang menunjukkan kelainan kromosom del(5q). Meskipun MDS92 mengandung campuran heterogen sel mieloid pada berbagai tahap diferensiasi, MDS-L mewakili subgaris sel blastik dengan fitur yang lebih seragam, khas sel progenitor mieloid yang belum matang. MDS-L mempertahankan ketergantungan pada interleukin-3 (IL-3) untuk proliferasi in vitro, mencerminkan sensitivitas sitokin yang terlihat pada sel progenitor MDS primer. Garis sel ini mengandung multiple perubahan genetik, termasuk mutasi homozigot TP53 dan mutasi tambahan yang diperoleh pada NRAS dan CEBPA. Perubahan-perubahan ini secara kolektif mencerminkan evolusi klonal dan potensi transformasi leukemik yang khas pada MDS berisiko tinggi.

MDS-L telah digunakan secara luas sebagai model untuk menyelidiki mekanisme molekuler yang mendasari patogenesis MDS, hambatan diferensiasi, dan resistensi terapeutik. Salah satu temuan signifikan menggunakan MDS-L adalah demonstrasi bahwa ekspresi paksa reseptor faktor stimulasi koloni granulosit (G-CSFR) melalui transduksi retroviral memungkinkan diferensiasi granulosit setelah stimulasi G-CSF. Hal ini dibuktikan dengan perubahan morfologis, peningkatan ekspresi CD11b, dan aktivitas reduksi nitroblue tetrazolium (NBT) yang meningkat—indikator maturasi granulosit terminal. Hasil ini mengungkapkan kapasitas intrinsik MDS-L untuk berdiferensiasi jika komponen sinyal yang sesuai dipulihkan, memberikan wawasan tentang pendekatan terapi gen yang menargetkan defek diferensiasi pada MDS.

Selain studi genetik dan fungsional, MDS-L berperan penting dalam mengkarakterisasi peran modifikasi histon dalam progresivitas penyakit. Secara mencolok, mutasi histon H3-K27M, yang umumnya terkait dengan glioma pediatrik tetapi jarang ditemukan pada neoplasma hematologi, teridentifikasi pada MDS-L dan ditemukan menghambat metilasi histon yang dimediasi oleh EZH2. Perubahan epigenetik ini menyebabkan penurunan luas metilasi H3-K27 dan dikaitkan dengan perubahan ekspresi gen penekan tumor seperti p16. Subgaris MDS-L dengan atau tanpa mutasi ini—yang dihasilkan melalui kondisi kultur IL-3 yang berbeda—telah memungkinkan penyelidikan lebih lanjut tentang heterogenitas epigenetik dalam MDS dan implikasinya terhadap pertumbuhan yang bergantung pada IL-3 serta respons terapeutik. Sifat unik ini menjadikan MDS-L sebagai model in vitro dan in vivo yang kuat untuk mempelajari evolusi molekuler dan penargetan terapeutik MDS serta transformasinya menjadi leukemia mieloid akut.

37°C, 5%_CO2, atmosfer yang dilembabkan.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

Di Cytion, kami mendukung kualitas dan kelangsungan hidup produk kami. Kami menjamin bahwa sel kami akan dapat bertahan hidup pada awal kultur selama 60 hari setelah pengiriman dari fasilitas kami. Kami menjamin bahwa semua bahan sesuai dengan spesifikasi yang dijelaskan dalam Sertifikat Analisis dan / atau Lembar Produk

Untuk detail lengkap, silakan merujuk ke <a href=""/Siapa-kami-Garansi/Garansi/"" hreflang=""x-default"">Pernyataan Jaminan kami