MDS-L

MDS-L هو خط خلايا مشتق من متلازمة خلل التنسج النقوي البشري (MDS) تم إنشاؤه في الأصل من خط الخلايا MDS92، الذي تم اشتقاقه بدوره من نخاع العظم لمريض مصاب بـ MDS يعاني من شذوذ كروموسومي del(5q). بينما يحتوي MDS92 على مزيج غير متجانس من الخلايا النخاعية في مراحل مختلفة من التمايز، يمثل MDS-L سلالة فرعية بلاستية ذات خصائص أكثر اتساقًا تتميز بها الخلايا النخاعية السلفية غير الناضجة. يحتفظ MDS-L بالاعتماد على الإنترلوكين-3 (IL-3) للتكاثر في المختبر، مما يعكس حساسية السيتوكين الملحوظة في الخلايا السلفية الأولية لمتلازمة MDS. يحتوي الخط على العديد من التغيرات الجينية، بما في ذلك طفرات TP53 متماثلة وطفرات إضافية مكتسبة في NRAS و CEBPA. تعكس هذه التغيرات مجتمعة التطور النسيلي وإمكانية التحول اللوكيمي النموذجي لمتلازمة MDS عالية الخطورة.

تم استخدام MDS-L على نطاق واسع كنموذج لدراسة الآليات الجزيئية الكامنة وراء التسبب في MDS، وحاجز التمايز، ومقاومة العلاج. كان أحد الاكتشافات المهمة باستخدام MDS-L هو إثبات أن التعبير القسري لمستقبل عامل تحفيز مستعمرات الخلايا المحببة (G-CSFR) عبر التحويل الفيروسي الرجعي مكّن من تمايز الخلايا المحببة عند تحفيز G-CSF. وقد تم إثبات ذلك من خلال التغيرات المورفولوجية وزيادة تعبير CD11b وتعزيز نشاط اختزال النيتروبلو تيترازوليوم (NBT) - وهو مؤشر على نضج الخلايا المحببة النهائي. كشفت هذه النتائج عن القدرة الذاتية لـ MDS-L على التمايز إذا تمت استعادة مكونات الإشارة المناسبة، مما يوفر رؤى حول نهج العلاج الجيني المحتملة التي تستهدف عيوب التمايز في MDS.

بالإضافة إلى الدراسات الجينية والوظيفية، كان MDS-L أداة فعالة في توصيف دور تعديلات الهستون في تطور المرض. والجدير بالذكر أن طفرة هيستون H3-K27M، التي ترتبط عادةً بالأورام الدبقية لدى الأطفال ولكنها نادرة في الأورام الخبيثة الدموية، تم تحديدها في MDS-L ووجد أنها تثبط مثيلة هيستون بوساطة EZH2. أدى هذا التغيير اللاجيني إلى انخفاض واسع النطاق في مثيلة H3-K27 وارتبط بتغير تعبير الجينات المثبطة للأورام مثل p16. وقد سمحت سلالات MDS-L الفرعية التي تحمل أو لا تحمل هذه الطفرة - المستمدة من ظروف زراعة IL-3 التفاضلية - بمزيد من استكشاف التباين اللاجيني داخل MDS وتأثيراته على النمو المعتمد على IL-3 والاستجابة العلاجية. هذه الخصائص الفريدة تجعل MDS-L نموذجًا قويًا في المختبر وفي الجسم الحي لدراسة التطور الجزيئي والاستهداف العلاجي لـ MDS وتحويله إلى سرطان الدم النخاعي الحاد.

37 درجة مئوية، و5% من _ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

في Cytion، نلتزم في Cytion بجودة منتجاتنا وحيويتها. نحن نضمن أن تكون خلايانا قابلة للحياة في بداية الاستزراع لمدة 60 يومًا بعد الشحن من منشآتنا. نؤكد أن جميع المواد مطابقة للمواصفات الموضحة في شهادة التحليل و/أو ورقة المنتج

للحصول على التفاصيل الكاملة، يُرجى الرجوع إلى <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">بيان الضمان