MDS-L

MDS-Lは、ヒト骨髄異形成症候群（MDS）由来の細胞株であり、MDS92細胞株から樹立されたものである。MDS92細胞株自体は、del(5q)染色体異常を示すMDS患者の骨髄から由来する。 MDS92細胞株は分化段階の異なる異種骨髄系細胞の混合体であったのに対し、MDS-Lは未熟な骨髄前駆細胞に特徴的なより均一な性質を持つ芽球性サブラインである。 MDS-Lは、in vitroでの増殖にインターロイキン-3（IL-3）依存性を保持しており、これは一次MDS前駆細胞で観察されるサイトカイン感受性を反映している。この細胞株は、ホモ接合性TP53変異やNRASおよびCEBPAにおける追加の獲得変異を含む複数の遺伝的変化を有している。これらの変化は、高リスクMDSに典型的なクローン進化と白血病化ポテンシャルを総合的に反映している。

MDS-Lは、MDSの病態形成、分化阻害、治療抵抗性の分子メカニズムを解明するモデルとして広く利用されてきた。MDS-Lを用いた重要な発見の一つは、レトロウイルス媒介による顆粒球コロニー刺激因子受容体（G-CSFR）の強制発現が、G-CSF刺激下での顆粒球分化を可能にすることを実証した点である。 これは形態学的変化、CD11b発現の増加、および末梢顆粒球成熟を示すニトロブルーテトラゾリウム（NBT）還元活性の増強によって裏付けられた。これらの結果は、適切なシグナル伝達成分が回復すればMDS-Lが分化する固有の能力を有することを明らかにし、MDSにおける分化欠損を標的とする潜在的な遺伝子治療アプローチへの知見を提供した。

遺伝子および機能研究に加え、MDS-Lは疾患進行におけるヒストン修飾の役割を特徴づける上で有用であった。 特に、小児性神経膠腫に多く見られるが血液悪性腫瘍では稀なヒストンH3-K27M変異がMDS-Lで同定され、EZH2を介したヒストンメチル化を阻害することが判明した。このエピジェネティックな変化はH3-K27メチル化の広範な減少を引き起こし、p16などの腫瘍抑制遺伝子の発現変化と関連していた。 この変異の有無にかかわらず、IL-3培養条件の差異によって導出されたMDS-Lサブラインは、MDS内のエピジェネティックな異質性とそのIL-3依存性増殖および治療反応への影響の解明をさらに可能にした。これらの特異的性質により、MDS-LはMDSの分子進化と治療標的化、ならびに急性骨髄性白血病への移行を研究するための強力なin vitroおよびin vivoモデルとなっている。

37℃、5%_CO2、加湿雰囲気。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

長期保存の場合、バイアルを-150～-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

サイシオンは、製品の品質と生存率を保証します。 当社では、培養を開始した時点で、当社施設からの出荷後60日間、細胞が生存可能であることを保証しています。 すべての材料が、分析証明書および／または製品シートに記載された仕様に適合していることを保証します。

詳細については、<a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Warranty Statement をご参照ください。