MDS-L

MDS-L เป็นสายเซลล์ที่พัฒนามาจากกลุ่มอาการไมอีลอยด์ดิสพลาสติก (MDS) ในมนุษย์ ซึ่งถูกสร้างขึ้นครั้งแรกจากสายเซลล์ MDS92 โดยสายเซลล์ MDS92 นั้นถูกแยกมาจากไขกระดูกของผู้ป่วย MDS ที่มีความผิดปกติของโครโมโซมแบบขาดหายไป (del(5q)) ในขณะที่ MDS92 ประกอบด้วยเซลล์ไมอีลอยด์ที่หลากหลายและอยู่ในระยะต่างๆ ของการแยกตัว MDS-L แสดงถึงสายย่อยแบบบลาสติกที่มีลักษณะสม่ำเสมอมากกว่า ซึ่งเป็นลักษณะเฉพาะของเซลล์ต้นกำเนิดไมอีลอยด์ที่ยังไม่เจริญเต็มที่ MDS-L ยังคงพึ่งพา interleukin-3 (IL-3) สำหรับการเพิ่มจำนวนในหลอดทดลอง ซึ่งสะท้อนถึงความไวต่อไซโตไคน์ที่พบในเซลล์ต้นกำเนิด MDS ชนิดปฐมภูมิ สายพันธุ์นี้มีการเปลี่ยนแปลงทางพันธุกรรมหลายประการ รวมถึงการกลายพันธุ์ TP53 แบบโฮโมไซโกัสและการกลายพันธุ์เพิ่มเติมใน NRAS และ CEBPA การเปลี่ยนแปลงเหล่านี้สะท้อนถึงวิวัฒนาการของโคลนและศักยภาพในการเปลี่ยนแปลงเป็นมะเร็งเม็ดเลือดขาว ซึ่งเป็นลักษณะทั่วไปของ MDS ความเสี่ยงสูง

MDS-L ถูกนำมาใช้กันอย่างแพร่หลายเป็นแบบจำลองเพื่อศึกษาเชิงลึกกลไกระดับโมเลกุลที่อยู่เบื้องหลังการเกิดโรค MDS การหยุดชะงักของการเปลี่ยนแปลงเซลล์ และการดื้อต่อการรักษา หนึ่งในผลการค้นพบที่สำคัญจากการใช้ MDS-L คือการแสดงให้เห็นว่าการบังคับแสดงออกของตัวรับปัจจัยกระตุ้นโคโลนีของเม็ดเลือดขาวชนิดแกรนูโลไซต์ (G-CSFR) ผ่านการถ่ายทอดเชื้อไวรัสย้อนกลับ (retroviral transduction) สามารถกระตุ้นการเปลี่ยนแปลงเซลล์ไปเป็นแกรนูโลไซต์ได้เมื่อได้รับสิ่งกระตุ้นจาก G-CSF สิ่งนี้ได้รับการยืนยันโดยการเปลี่ยนแปลงทางสัณฐานวิทยา การเพิ่มขึ้นของการแสดงออกของ CD11b และกิจกรรมการลดไนโตรบลูเตตราโซเลียม (NBT) ที่เพิ่มขึ้น ซึ่งบ่งชี้ถึงการเจริญเติบโตของแกรนูโลไซต์ขั้นสุดท้าย ผลลัพธ์เหล่านี้เผยให้เห็นถึงความสามารถภายในของ MDS-L ในการเปลี่ยนแปลงหากส่วนประกอบสัญญาณที่เหมาะสมได้รับการฟื้นฟู ซึ่งให้ข้อมูลเชิงลึกเกี่ยวกับแนวทางการบำบัดด้วยยีนที่อาจมุ่งเป้าไปที่ข้อบกพร่องในการเปลี่ยนแปลงใน MDS

นอกเหนือจากการศึกษาทางพันธุกรรมและการทำงานแล้ว MDS-L ยังมีบทบาทสำคัญในการกำหนดลักษณะของบทบาทของการดัดแปลงฮิสโตนในความก้าวหน้าของโรค ที่น่าสังเกตคือ การกลายพันธุ์ของฮิสโตน H3-K27M ซึ่งมักเกี่ยวข้องกับเนื้องอกในสมองของเด็กแต่พบได้น้อยในมะเร็งทางโลหิตวิทยา ถูกพบใน MDS-L และพบว่ายับยั้งการเมทิลเลชันของฮิสโตนที่เกิดจาก EZH2 การเปลี่ยนแปลงทางอีพีเจเนติกนี้ทำให้เกิดการลดลงอย่างกว้างขวางของการเมทิลเลชันที่ H3-K27 และเชื่อมโยงกับการเปลี่ยนแปลงการแสดงออกของยีนกดการเจริญเติบโตของเนื้องอก เช่น p16 สายย่อยของ MDS-L ที่มีหรือไม่มีกลายพันธุ์นี้ ซึ่งได้มาผ่านสภาวะการเพาะเลี้ยง IL-3 ที่แตกต่างกัน ได้เปิดโอกาสให้ศึกษาความหลากหลายทางอีพิเจเนติกภายใน MDS และผลกระทบต่อการเจริญเติบโตที่ขึ้นกับ IL-3 และการตอบสนองต่อการรักษา คุณสมบัติเฉพาะเหล่านี้ทำให้ MDS-L เป็นแบบจำลองที่มีประสิทธิภาพทั้งในหลอดทดลองและในร่างกายสำหรับการศึกษาวิวัฒนาการระดับโมเลกุลและการกำหนดเป้าหมายการรักษาของ MDS และการเปลี่ยนแปลงเป็นมะเร็งเม็ดเลือดขาวเฉียบพลันชนิดไมอีลอยด์

37°C, 5%_CO2, บรรยากาศชื้น

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์

สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.