Pereiti prie turinio
BRL
Audinys
Kepenys
Sinonimai
Buffalo Rat Liver

Dokumentai

BRL

Cell line · Prekės numeris 305193

The Buffalo Rat Liver (BRL) cell line, a spontaneously immortalized lineage from Buffalo rat liver tissue, holds significant value due to its retention of...

€430.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų
Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

Buffalo žiurkių kepenų (BRL) ląstelių linija, spontaniškai imortalizuota linija iš Buffalo žiurkių kepenų audinio, yra labai vertinga, nes išlaiko pluripotentiškumą ir kariotipinį normalumą, panašų į embrioninių kamieninių (ES) ląstelių. BRL ląstelės gamina sąlyginę terpę (BRL-CM), kuri turi unikalią paskirtį kamieninių ląstelių biologijoje; ji slopina nustatytų embrioninės karcinomos (EB) ir ES ląstelių linijų diferenciaciją. Ši savybė leidžia palaikyti šias kamienines ląsteles nediferencijuotoje būsenoje, nenaudojant maitinamųjų ląstelių, nors toks palaikymas yra gyvybingas tik ribotą laiką, o tai rodo BRL-CM naudingumo apribojimą ilgalaikiam kamieninių ląstelių auginimui.

Be to, BRL ląstelių linija yra įdomus modelis genetinių modifikacijų įtakai ląstelių elgsenai tirti - tai iliustruoja skirtinga normalių ir Ha-ras-1 transformuotų BRL ląstelių reakcija į citoskeleto inhibitorius. Transformavimas Ha-ras-1 onkogenu ne tik modifikuoja ląstelių atsaką, bet ir padidina mikrofilamentų ir mikrotubulių stabilumą, todėl pakinta ląstelės struktūrinis vientisumas. Šie rezultatai pabrėžia galimą citoskeleto vaidmenį palaikant ląstelių formą ir pliripotentiškumą, kuris yra esminis tiek normalioje fiziologijoje, tiek ligų būsenose, susijusiose su ląstelių transformacija ir diferenciacija.

Audinys
Kepenys
Sinonimai
  • Buffalo Rat Liver

02Klasifikacija

Organizmas
Žiurkė
Augimo savybės
Prisijungęs
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Epitelis

04Identifikatoriai

Nuoroda
BRL (Cytion katalogo numeris 305193)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
10116
Cellosaurus
CVCL_4565

05Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutaminas, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion gaminio numeris 820100a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS ir 1 % NEAA
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Skysčių atnaujinimas
2-3 kartus per savaitę
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

07Donoras

Veislė / porūšis
Buffalo