Siirry sisältöön
BRL
Kudos
Maksa
Synonyymit
Buffalo Rat Liver

Asiakirjat

BRL

Cell line · Tuotenumero 305193

The Buffalo Rat Liver (BRL) cell line, a spontaneously immortalized lineage from Buffalo rat liver tissue, holds significant value due to its retention of...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

Buffalon rotan maksan (BRL) solulinjalla, joka on Buffalon rotan maksakudoksesta spontaanisti immortalisoitunut linja, on merkittävä arvo, koska se säilyttää pluripotenssin ja karyotyyppisen normaaliuden, joka muistuttaa alkion kantasoluja (ES). BRL-solut tuottavat ehdollistettua elatusainetta (BRL-CM), jolla on ainutlaatuinen sovellus kantasolubiologiassa; se estää vakiintuneiden alkiokarsinooma- (EC) ja ES-solulinjojen erilaistumisen. Tämä ominaisuus mahdollistaa näiden kantasolujen ylläpitämisen erilaistumattomassa tilassa ilman syöttösoluja, mutta tämä tuki on elinkelpoinen vain rajallisen ajan, mikä korostaa BRL-CM:n käyttökelpoisuuden rajoitusta pitkäaikaisessa kantasoluviljelyssä.

Lisäksi BRL-solulinja tarjoaa mielenkiintoisen mallin geneettisten muutosten vaikutuksen tutkimiseksi solujen käyttäytymiseen, mistä on osoituksena normaalien ja Ha-ras-1-muunnettujen BRL-solujen erilainen vaste sytoskeletaalisten inhibiittoreiden vaikutuksesta. Transformaatio Ha-ras-1-onkogeenilla ei ainoastaan muuta soluvasteet vaan myös lisää mikrofilamenttien ja mikrotubulusten vakautta, mikä muuttaa solun rakenteellista eheyttä. Nämä havainnot korostavat sytoskeletin potentiaalista roolia solun muodon ja pluripotenssin ylläpitämisessä, mikä on keskeistä sekä normaalissa fysiologiassa että sairaustiloissa, joihin liittyy solujen muuntumista ja erilaistumista.

Kudos
Maksa
Synonyymit
  • Buffalo Rat Liver

02Luokittelu

Organismi
Rotta
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteeli

04Tunnisteet

Lähdeviite
BRL (Cytionin tuotenumero 305193)
NCBI-verotunnus
10116
Cellosaurus
CVCL_4565

05Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiini, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytionin artikkelinumero 820100a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 % FBS:llä ja 1 % NEAA:lla
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

07Lahjoittaja

Rotua / alalajia
Buffalo