Pāriet uz saturu
BRL
Audums
Aknas
Sinonīmi
Buffalo Rat Liver

Dokumenti

BRL

Cell line · Preces numurs 305193

The Buffalo Rat Liver (BRL) cell line, a spontaneously immortalized lineage from Buffalo rat liver tissue, holds significant value due to its retention of...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

Bufalo žurku aknu (BRL) šūnu līnija, kas ir spontāni imortalizēta līnija no Bufalo žurku aknu audiem, ir ļoti vērtīga, jo saglabā pluripotenci un kariotipisko normalitāti, kas līdzinās embrionālajām cilmes (ES) šūnām. BRL šūnas ražo kondicionētu barotni (BRL-CM), kurai ir unikāls pielietojums cilmes šūnu bioloģijā; tā kavē izveidoto embrionālās karcinomas (EK) un ES šūnu līniju diferenciāciju. Šī īpašība ļauj uzturēt šīs cilmes šūnas nediferencētā stāvoklī bez barojošām šūnām, lai gan šis atbalsts ir dzīvotspējīgs tikai ierobežotu laiku, tādējādi uzsverot BRL-CM izmantošanas ierobežojumus ilgtermiņa cilmes šūnu kultūrā.

Turklāt BRL šūnu līnija ir interesants modelis ģenētisko modifikāciju ietekmes uz šūnu uzvedību izpētei, ko ilustrē normālu un Ha-ras-1 transformētu BRL šūnu atšķirīgā reakcija uz citoskeleta inhibitoriem. Transformācija ar Ha-ras-1 onkogēnu ne tikai maina šūnu reakcijas, bet arī palielina mikrofilamentu un mikrotubulu stabilitāti, tādējādi mainot šūnas strukturālo integritāti. Šie atklājumi uzsver citoskeleta potenciālo lomu šūnu formas un pluripotences uzturēšanā, kas ir izšķiroša gan normālā fizioloģijā, gan slimību stāvokļos, kas saistīti ar šūnu transformāciju un diferenciāciju.

Audums
Aknas
Sinonīmi
  • Buffalo Rat Liver

02Klasifikācija

Organisms
Žurka
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlija

04Identifikatori

Atsauce
BRL (Cytion kataloga numurs 305193)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
10116
Cellosaurus
CVCL_4565

05Apstrāde un audzēšana

Barotne
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-glutamīns, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion izstrādājuma numurs 820100a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS un 1% NEAA
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

07Ziedotājs

Šķirne / pasuga
Buffalo