Zum Inhalt springen
BRL
Gewebe
Leber
Synonyme
Buffalo Rat Liver

Dokumente

BRL

Cell line · Artikelnummer 305193

The Buffalo Rat Liver (BRL) cell line, a spontaneously immortalized lineage from Buffalo rat liver tissue, holds significant value due to its retention of...

€430.00zzgl. MwSt. und Versandkosten

Anpassung / Empfehlungen

Auf Lager
Charge
Empfohlen (frischeste Charge)
  • CoA
1

01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die Zelllinie Buffalo Rat Liver (BRL), eine spontan immortalisierte Linie aus dem Lebergewebe der Buffalo-Ratte, ist von großem Wert, da sie Pluripotenz und karyotypische Normalität ähnlich wie embryonale Stammzellen (ES) beibehält. BRL-Zellen produzieren ein konditioniertes Medium (BRL-CM), das in der Stammzellbiologie eine einzigartige Anwendung findet: Es hemmt die Differenzierung etablierter embryonaler Karzinom- (EC) und ES-Zelllinien. Diese Eigenschaft ermöglicht die Aufrechterhaltung dieser Stammzellen in einem undifferenzierten Zustand ohne die Notwendigkeit von Feeder-Zellen, obwohl diese Unterstützung nur für einen begrenzten Zeitraum lebensfähig ist, was eine Einschränkung des Nutzens von BRL-CM in der Langzeit-Stammzellkultur aufzeigt.

Darüber hinaus bietet die BRL-Zelllinie ein interessantes Modell für die Untersuchung der Auswirkungen genetischer Veränderungen auf das Zellverhalten, wie die unterschiedliche Reaktion normaler und Ha-ras-1-transformierter BRL-Zellen auf Zytoskelett-Inhibitoren zeigt. Die Transformation mit dem Ha-ras-1-Onkogen verändert nicht nur die zellulären Reaktionen, sondern erhöht auch die Stabilität von Mikrofilamenten und Mikrotubuli, was zu einer Veränderung der strukturellen Integrität der Zelle führt. Diese Ergebnisse unterstreichen die potenzielle Rolle des Zytoskeletts bei der Aufrechterhaltung der Zellform und Pluripotenz, die sowohl in der normalen Physiologie als auch bei Krankheiten, die mit Zelltransformation und -differenzierung einhergehen, von zentraler Bedeutung ist.

Gewebe
Leber
Synonyme
  • Buffalo Rat Liver

02Klassifizierung

Organismus
Ratte
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Epithelial

04Bezeichner

Quellenangabe
BRL (Cytion Katalognummer 305193)
NCBI-Steuer-ID
10116
Cellosaurus
CVCL_4565

05Handhabung und Kultur

Nährmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion-Artikelnummer 820100a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS und 1% NEAA
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

07Spender

Rasse / Unterart
Büffel