BRL

La linea cellulare Buffalo Rat Liver (BRL), una linea immortalizzata spontaneamente dal tessuto epatico del ratto di Buffalo, ha un valore significativo per il suo mantenimento della pluripotenza e della normalità cariotipica simile alle cellule staminali embrionali (ES). Le cellule BRL producono un mezzo condizionato (BRL-CM) che ha un'applicazione unica nella biologia delle cellule staminali: inibisce la differenziazione di linee cellulari di carcinoma embrionale (EC) e di cellule ES. Questa proprietà consente di mantenere queste cellule staminali in uno stato indifferenziato senza bisogno di cellule di alimentazione, anche se questo supporto è valido solo per un periodo limitato, evidenziando una limitazione nell'utilità del BRL-CM nella coltura di cellule staminali a lungo termine.

Inoltre, la linea cellulare BRL fornisce un modello interessante per studiare l'impatto delle modifiche genetiche sul comportamento cellulare, illustrato dalla risposta differenziale delle cellule BRL normali rispetto a quelle trasformate con Ha-ras-1 agli inibitori del citoscheletro. La trasformazione con l'oncogene Ha-ras-1 non solo modifica le risposte cellulari, ma aumenta anche la stabilità dei microfilamenti e dei microtubuli, alterando di conseguenza l'integrità strutturale della cellula. Questi risultati sottolineano il ruolo potenziale del citoscheletro nel mantenimento della forma e della pluripotenza cellulare, che è fondamentale sia nella fisiologia normale sia negli stati patologici che comportano la trasformazione e la differenziazione cellulare.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia