Gå direkt till innehållet
BRL
Vävnad
Lever
Synonymer
Buffalo Rat Liver

BRL

Cell line · Produktnummer 305193

The Buffalo Rat Liver (BRL) cell line, a spontaneously immortalized lineage from Buffalo rat liver tissue, holds significant value due to its retention of...

€430.00exkl. moms och frakt
Finns i lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
  • CoA
1

01Allmän information

Beskrivning

Cellinjen Buffalo Rat Liver (BRL), en spontant odödliggjord cellinje från levervävnad från råttor i Buffalo, har ett betydande värde eftersom den behåller pluripotens och karyotypisk normalitet i likhet med embryonala stamceller (ES). BRL-celler producerar ett konditionerat medium (BRL-CM) som har en unik tillämpning inom stamcellsbiologi; det hämmar differentieringen av etablerade embryonala karcinom- (EC) och ES-cellinjer. Denna egenskap gör det möjligt att bibehålla dessa stamceller i ett odifferentierat tillstånd utan behov av matarceller, även om detta stöd endast är livskraftigt under en begränsad period, vilket belyser en begränsning i användbarheten av BRL-CM i långsiktig stamcellsodling.

Dessutom utgör BRL-cellinjen en intressant modell för att studera hur genetiska modifieringar påverkar cellbeteendet, vilket illustreras av att normala BRL-celler svarar olika på cytoskeletala hämmare jämfört med Ha-ras-1-transformerade BRL-celler. Transformation med onkogenen Ha-ras-1 modifierar inte bara cellens respons utan ökar också stabiliteten hos mikrofilament och mikrotubuli, vilket i sin tur förändrar cellens strukturella integritet. Dessa resultat understryker cytoskelettets potentiella roll för att bibehålla cellens form och pluripotens, vilket är centralt i både normal fysiologi och sjukdomstillstånd som involverar cellulär transformation och differentiering.

Vävnad
Lever
Synonymer
  • Buffalo Rat Liver

02Klassificering

Organism
Råtta
Tillväxtegenskaper
Följsam
Biosäkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitelial

04Identifierare

Källa
BRL (Cytion katalognummer 305193)
NCBI-skattenummer
10116
Cellosaurus
CVCL_4565

05Hantering och odling

Odlingsmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion artikelnummer 820100a)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera mediet med 10% FBS och 1% NEAA
Dissociationsmedel
Accutase
Vidareodling
Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
Vätskeförnyelse
2 till 3 gånger per vecka
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

07Donator

Ras / underart
Buffalo