Gå til innholdet
BRL
Vev
Lever
Synonymer
Buffalo Rat Liver

Dokumenter

BRL

Cell line · Produktnummer 305193

The Buffalo Rat Liver (BRL) cell line, a spontaneously immortalized lineage from Buffalo rat liver tissue, holds significant value due to its retention of...

€430.00ekskl. mva. og frakt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

Cellelinjen Buffalo Rat Liver (BRL), en spontant udødeliggjort cellelinje fra levervev fra rotter fra Buffalo, har stor verdi fordi den beholder sin pluripotens og karyotypiske normalitet i likhet med embryonale stamceller (ES-celler). BRL-celler produserer et kondisjonert medium (BRL-CM) som har en unik anvendelse innen stamcellebiologi; det hemmer differensieringen av etablerte embryonale karsinom- (EC) og ES-cellelinjer. Denne egenskapen gjør det mulig å opprettholde disse stamcellene i en udifferensiert tilstand uten behov for feederceller, selv om denne støtten bare er levedyktig i en begrenset periode, noe som understreker en begrensning i bruken av BRL-CM i langvarig stamcellekultur.

BRL-cellelinjen er dessuten en interessant modell for å studere virkningen av genetiske modifikasjoner på cellenes oppførsel, noe som illustreres av den ulike responsen normale BRL-celler og Ha-ras-1-transformerte BRL-celler har på cytoskjeletthemmere. Transformasjon med Ha-ras-1-onkogenet endrer ikke bare cellens respons, men øker også stabiliteten til mikrofilamenter og mikrotubuli, og endrer dermed cellens strukturelle integritet. Disse funnene understreker cytoskjelettets potensielle rolle i opprettholdelsen av celleform og pluripotens, noe som er avgjørende både i normal fysiologi og sykdomstilstander som involverer celletransformasjon og -differensiering.

Vev
Lever
Synonymer
  • Buffalo Rat Liver

02Klassifisering

Organisme
Rotte
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitelial

04Identifikatorer

Kildehenvisning
BRL (Cytion-katalognummer 305193)
NCBI-skattenummer
10116
Cellosaurus
CVCL_4565

05Håndtering og kultur

Næringsmedium
EMEM (MEM Eagle), m: 2 mM L-Glutamin, m: 2,2 g/L NaHCO3, m: EBSS (Cytion artikkelnummer 820100a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS og 1 % NEAA
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

07Donor

Rase / underart
Buffalo