Preskoči na vsebino
BRL
Tkivo
Jetra
Sinonimi
Buffalo Rat Liver

Dokumenti

BRL

Cell line · Številka izdelka 305193

The Buffalo Rat Liver (BRL) cell line, a spontaneously immortalized lineage from Buffalo rat liver tissue, holds significant value due to its retention of...

€430.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celična linija Buffalo Rat Liver (BRL), spontano imortalizirana linija iz jetrnega tkiva podgane Buffalo, ima pomembno vrednost zaradi ohranjanja pluripotentnosti in kariotipske normalnosti, ki je podobna embrionalnim matičnim celicam (ES). Celice BRL proizvajajo pogojni medij (BRL-CM), ki ima edinstveno uporabo v biologiji matičnih celic; zavira diferenciacijo uveljavljenih linij embrionalnega karcinoma (EC) in celic ES. Ta lastnost omogoča vzdrževanje teh matičnih celic v nediferenciranem stanju brez potrebe po napajalnih celicah, čeprav je ta podpora izvedljiva le za določen čas, kar poudarja omejitev uporabnosti BRL-CM pri dolgoročnem gojenju matičnih celic.

Poleg tega je celična linija BRL zanimiv model za preučevanje vpliva genskih sprememb na obnašanje celic, kar ponazarja različen odziv normalnih in s Ha-ras-1 transformiranih celic BRL na zaviralce citoskeleta. Transformacija z onkogenom Ha-ras-1 ne spreminja le celičnih odzivov, temveč tudi povečuje stabilnost mikrofilamentov in mikrotubulov, kar posledično spreminja strukturno celovitost celice. Te ugotovitve poudarjajo potencialno vlogo citoskeleta pri ohranjanju celične oblike in pluripotentnosti, ki je ključnega pomena tako v normalni fiziologiji kot v bolezenskih stanjih, ki vključujejo celično transformacijo in diferenciacijo.

Tkivo
Jetra
Sinonimi
  • Buffalo Rat Liver

02Razvrstitev

Organizem
Podgana
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijski

04Identifikatorji

Navajanje vira
BRL (kataloška številka Cytion 305193)
Davčna identifikacijska številka NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_4565

05Ravnanje in gojenje

Gojišče
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (številka izdelka Cytion 820100a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS in 1 % NEAA
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

07Donator

Pasma / podvrsta
Buffalo