Pereiti prie turinio
MOVAS
Audinys
Aorta, lygiųjų raumenų audinys
Liga
Normalus
Sinonimai
Movas-1, MOVAS-1, Movas

Dokumentai

MOVAS

Cell line · Prekės numeris 305362

The MOVAS cell line is a murine vascular smooth muscle cell (VSMC) line derived from the aortic smooth muscle cells of C57BL/6 mice. This immortalized cel...

€550.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų
Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

MOVAS ląstelių linija – tai pelių kraujagyslių lygiųjų raumenų ląstelių (VSMC) linija, gauta iš C57BL/6 pelių aortos lygiųjų raumenų ląstelių. Ši nemirtinga ląstelių linija išlaiko pagrindines lygiųjų raumenų savybes, todėl yra vertinga priemonė VSMC biologijai ir patofiziologijai tirti. MOVAS ląstelės plačiai naudojamos kraujagyslių procesų, tokių kaip aterosklerozė, kalcifikacija ir ląstelių signalų perdavimas, tyrimuose. Jos ekspresuoja būdingus lygiųjų raumenų žymenis, įskaitant alfa-lygiųjų raumenų aktiną (α-SMA), ir gali būti auginamos įvairiomis eksperimentinėmis sąlygomis kraujagyslių ligų modeliavimui.

Viena iš pagrindinių MOVAS ląstelių taikymo sričių yra kraujagyslių kalcifikacijos tyrimai. Ši ląstelių linija gali patirti kalcifikaciją in vitro, kai auginama kalcifikuojančioje terpėje, kurioje yra β-glicerofosfato ir askorbo rūgšties, imituojant procesus, stebimus pirminėse VSMC. MOVAS ląstelės pasižymi padidėjusiu šarminės fosfatazės aktyvumu ir kalcio nusėdimu, kurie yra pagrindiniai kraujagyslių kalcifikacijos žymenys. Šis modelis taip pat buvo patvirtintas lyginant su pirminėmis pelių aortos VSMC, parodant panašias reakcijas į kalcifikacines sąlygas ir gydymą žinomais inhibitoriais, tokiais kaip levamizolis ir etidronatas. Šios savybės leidžia laikyti MOVAS patikima ir ekonomiška alternatyva pirminėms VSMC, sumažinant eksperimentinį kintamumą ir etines problemas.

Be to, MOVAS ląstelės buvo naudojamos cholesterolio metabolizmui tirti – procesui, kuris yra kritiškai svarbus aterosklerozės vystymuisi. Jos ekspresuoja esminius cholesterolio pernašėjus, tokius kaip ABCA1 ir ABCG1, ir rodo funkcionalumą cholesterolio išsiurbime į HDL ir apoAI. Cholesterolio įkrovimo eksperimentai parodė jų gebėjimą transdiferencijuotis į makrofagams panašias ląsteles – procesą, susijusį su aterosklerozinių plokštelių susidarymu. Šie atradimai pabrėžia MOVAS ląstelių naudą tiriant cholesterolio homeostazę, fenotipinį plastiškumą ir kraujagyslių ligų progresavimą.

Audinys
Aorta, lygiųjų raumenų audinys
Liga
Normalus
Sinonimai
  • Movas-1
  • MOVAS-1
  • Movas

02Klasifikacija

Organizmas
Pele
Seksas
Nenurodyta
Augimo savybės
Prisijungęs
GMO statusas
GMO-S1
Išsami informacija apie GMO statusą
GMO-S1: This murine vascular smooth muscle cell line (MOVAS) contains a retroviral construct encoding SV40 T-Antigen together with a neomycin resistance marker, supporting sustained proliferation and transformation. The insert is stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Į fibroblastus panašus
Ląstelių tipas
Su kraujagyslėmis susijusios lygiųjų raumenų ląstelės

04Identifikatoriai

Nuoroda
MOVAS (Cytion katalogo numeris 305362)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
10090
Cellosaurus
CVCL_0F08

05Išraiška ir jautrumas

Baltojų baltymų ekspresija
Išreikšti genai: aktinas, lygiųjų raumenų alfa-aktinas, kalponinas 1 (bazinis), desminas, lygiųjų raumenų baltymas 22 (SM22 alfa)
Virusai
Transformantas: Simiano virusas 40 (SV40)

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
DMEM, š: 4,5 g/l gliukozės, š: 4 mM L-glutamino, š: 3,7 g/l NaHCO3, š: 1,0 mM natrio piruvato (Cytion gaminio numeris 820300a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Į terpę įpilkite 10 % FBS ir 0,2 mg/ml G-418
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Sėjos tankis
1–3 × 10⁴/cm²
Skysčių atnaujinimas
2-3 kartus per savaitę
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Veislė / porūšis
C57BL/6
Donoro amžius
Suaugusiųjų