Preskoči na vsebino
MOVAS
Tkivo
Aorta, gladka mišica
Bolezen
Normalno
Sinonimi
Movas-1, MOVAS-1, Movas

Dokumenti

MOVAS

Cell line · Številka izdelka 305362

The MOVAS cell line is a murine vascular smooth muscle cell (VSMC) line derived from the aortic smooth muscle cells of C57BL/6 mice. This immortalized cel...

€550.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celična linija MOVAS je linija mišjih celic gladke mišice žil (VSMC), pridobljena iz celic gladke mišice aorte miši C57BL/6. Ta imortalizirana celična linija ohranja ključne značilnosti gladke mišice, zaradi česar je dragoceno orodje za preučevanje biologije in patofiziologije VSMC. Celice MOVAS se obsežno uporabljajo v raziskavah žilnih procesov, kot so ateroskleroza, kalcifikacija in celična signalna transdukcija. Izražajo značilne markerje gladkih mišic, vključno z alfa-aktinom gladkih mišic (α-SMA), in jih je mogoče gojiti v različnih eksperimentalnih pogojih za modeliranje žilnih bolezni.

Ena od glavnih uporab celic MOVAS je v raziskovanju vaskularne kalcifikacije. Ta celična linija lahko in vitro preide kalcifikacijo, če se goji v kalcifikacijskih gojiščih, ki vsebujejo β-glicerofosfat in askorbinsko kislino, kar posnema procese, opazovane v primarnih VSMC. Celice MOVAS kažejo povečano aktivnost alkalne fosfataze in odlaganje kalcija, kar sta ključna markerja vaskularne kalcifikacije. Ta model je bil validiran tudi v primerjavi s primarnimi VSMC-ji iz mišje aorte, pri čemer je pokazal primerljive odzive na kalcifikacijske pogoje in zdravljenja z znanimi zaviralci, kot sta levamisol in etidronat. Te lastnosti uveljavljajo MOVAS kot zanesljivo in stroškovno učinkovito alternativo primarnim VSMC-jem, saj zmanjšujejo eksperimentalno spremenljivost in etične pomisleke.

Poleg tega so bile celice MOVAS uporabljene za raziskovanje metabolizma holesterola, procesa, ki je ključen za razvoj ateroskleroze. Izražajo bistvene transporterje holesterola, kot sta ABCA1 in ABCG1, ter kažejo funkcionalnost pri iztoku holesterola v HDL in apoAI. Poskusi z obremenitvijo s holesterolom so pokazali njihovo sposobnost transdiferenciacije v celice, podobne makrofagom, kar je proces, povezan z nastajanjem aterosklerotičnih oblog. Ti izsledki poudarjajo uporabnost celic MOVAS pri preučevanju homeostaze holesterola, fenotipske plastičnosti in napredovanja žilnih bolezni.

Tkivo
Aorta, gladka mišica
Bolezen
Normalno
Sinonimi
  • Movas-1
  • MOVAS-1
  • Movas

02Razvrstitev

Organizem
Miška
Seks
Ni navedeno
Lastnosti rasti
Pripadnik
Status GSO
GMO-S1
Podrobnosti o statusu GSO
GMO-S1: This murine vascular smooth muscle cell line (MOVAS) contains a retroviral construct encoding SV40 T-Antigen together with a neomycin resistance marker, supporting sustained proliferation and transformation. The insert is stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Fibroblastom podobni
Vrsta celice
Celica gladke mišice, povezana z žilami

04Identifikatorji

Navajanje vira
MOVAS (kataloška številka Cytion 305362)
Davčna identifikacijska številka NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_0F08

05Izražanje in dovzetnost

Ekspresija beljakovin
Izraženi geni: aktin, alfa-aktin gladkih mišic, kalponin 1, bazični, desmin, protein gladkih mišic 22 (SM22 alfa)
Virusi
Transformant: Simijanski virus 40 (SV40)

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
DMEM, w: 4,5 g/L glukoze, w: 4 mM L-glutamina, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natrijevega piruvata (številka izdelka Cytion 820300a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojilnemu mediju dodajte 10 % FBS in 0,2 mg/mL G-418
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Gostota setve
1–3 × 10⁴/cm²
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Pasma / podvrsta
C57BL/6
Starost darovalca
Odrasli