İçeriğe atla
MOVAS
Doku
Aort, düz kas
Hastalık
Normal
Eş anlamlılar
Movas-1, MOVAS-1, Movas

MOVAS

Cell line · Ürün numarası 305362

The MOVAS cell line is a murine vascular smooth muscle cell (VSMC) line derived from the aortic smooth muscle cells of C57BL/6 mice. This immortalized cel...

€550.00vergi ve kargo hariç
Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

MOVAS hücre hattı, C57BL/6 farelerinin aort düz kas hücrelerinden türetilmiş bir fare vasküler düz kas hücresi (VSMC) hattıdır. Bu ölümsüzleştirilmiş hücre hattı, düz kasın temel özelliklerini koruduğu için VSMC biyolojisi ve patofizyolojisinin incelenmesinde değerli bir araçtır. MOVAS hücreleri, ateroskleroz, kalsifikasyon ve hücresel sinyal iletimi gibi vasküler süreçlere ilişkin araştırmalarda yaygın olarak kullanılmaktadır. Bu hücreler, alfa-düz kas aktini (α-SMA) dahil olmak üzere karakteristik düz kas belirteçlerini eksprese ederler ve vasküler hastalıkları modellemek amacıyla çeşitli deneysel koşullar altında kültürlenebilirler.

MOVAS hücrelerinin başlıca uygulama alanlarından biri, vasküler kalsifikasyon araştırmalarıdır. Bu hücre hattı, β-gliserofosfat ve askorbik asit içeren kalsifikasyon ortamında kültürlendiğinde in vitro olarak kalsifikasyona uğrayabilir ve bu da birincil VSMC'lerde gözlemlenen süreçleri taklit eder. MOVAS hücreleri, vasküler kalsifikasyonun temel belirteçleri olan yüksek alkalin fosfataz aktivitesi ve kalsiyum birikimi sergiler. Bu model, birincil fare aort VSMC'leri ile karşılaştırılarak da doğrulanmış olup, kalsifikasyon koşullarına ve levamisol ile etidronat gibi bilinen inhibitörlerle yapılan tedavilere benzer tepkiler sergilemiştir. Bu özellikler, MOVAS'ı birincil VSMC'lere güvenilir ve maliyet etkin bir alternatif haline getirerek, deneysel değişkenliği ve etik kaygıları azaltmaktadır.

Ek olarak, MOVAS hücreleri, ateroskleroz gelişimi için kritik öneme sahip bir süreç olan kolesterol metabolizmasını araştırmak amacıyla kullanılmıştır. Bu hücreler, ABCA1 ve ABCG1 gibi temel kolesterol taşıyıcılarını eksprese eder ve HDL ile apoAI’ye kolesterol çıkışında işlevsellik gösterir. Kolesterol yükleme deneyleri, bu hücrelerin aterosklerotik plak oluşumuyla bağlantılı bir süreç olan makrofaj benzeri hücrelere transdiferansiyasyon yeteneğini ortaya koymuştur. Bu bulgular, kolesterol homeostazını, fenotipik plastisiteyi ve vasküler hastalık ilerlemesini incelemede MOVAS hücrelerinin yararını vurgulamaktadır.

Doku
Aort, düz kas
Hastalık
Normal
Eş anlamlılar
  • Movas-1
  • MOVAS-1
  • Movas

02Sınıflandırma

Canlı
Fare
Cinsiyet
Belirtilmemiş
Büyüme özellikleri
Bağlı
GDO durumu
GMO-S1
GDO durumuna ilişkin ayrıntılar
GMO-S1: This murine vascular smooth muscle cell line (MOVAS) contains a retroviral construct encoding SV40 T-Antigen together with a neomycin resistance marker, supporting sustained proliferation and transformation. The insert is stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Fibroblast benzeri
Hücre türü
Vasküler kaynaklı düz kas hücresi

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
MOVAS (Cytion katalog numarası 305362)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
10090
Cellosaurus
CVCL_0F08

05İfade ve duyarlılık

Protein ekspresyonu
Eksprese edilen genler: aktin, düz kas alfa aktini, kalponin 1 (bazik), desmin, düz kas proteini 22 (SM22 alfa)
Virüsler
Transformant: Simian virüs 40 (SV40)

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
DMEM, w: 4,5 g/L Glukoz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Sodyum piruvat (Cytion ürün numarası 820300a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Besiyerine %10 FBS ve 0,2 mg/mL G-418 ekleyin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Ekim yoğunluğu
1–3 × 10⁴/cm²
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Tür / alt tür
C57BL/6
Bağışçının yaşı
Yetişkin