Ga naar de inhoud
MOVAS
Weefsel
Aorta, gladde spier
Ziekte
Normaal
Synoniemen
Movas-1, MOVAS-1, Movas

Documenten

MOVAS

Cell line · Productnummer 305362

The MOVAS cell line is a murine vascular smooth muscle cell (VSMC) line derived from the aortic smooth muscle cells of C57BL/6 mice. This immortalized cel...

€550.00excl. btw en verzendkosten
Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De MOVAS-cellijn is een muizenlijn van vasculaire gladde spiercellen (VSMC’s) die is afgeleid van de gladde spiercellen van de aorta van C57BL/6-muizen. Deze onsterfelijke cellijn behoudt de belangrijkste kenmerken van gladde spiercellen, waardoor deze een waardevol hulpmiddel vormt voor het bestuderen van de biologie en pathofysiologie van VSMC’s. MOVAS-cellen worden op grote schaal gebruikt in onderzoek naar vasculaire processen zoals atherosclerose, verkalking en cellulaire signaaltransductie. Ze brengen kenmerkende markers van gladde spiercellen tot expressie, waaronder alfa-gladde-spieractine (α-SMA), en kunnen onder diverse experimentele omstandigheden worden gekweekt om vasculaire aandoeningen te modelleren.

Een van de belangrijkste toepassingen van MOVAS-cellen is het onderzoek naar vasculaire verkalking. Deze cellijn kan in vitro verkalking ondergaan wanneer deze wordt gekweekt in verkalkingsmedia die β-glycerofosfaat en ascorbinezuur bevatten, waarmee processen worden nagebootst die worden waargenomen in primaire VSMC’s. MOVAS-cellen vertonen een verhoogde alkalische fosfatase-activiteit en calciumafzetting, wat belangrijke markers zijn voor vasculaire calcificatie. Dit model is ook gevalideerd ten opzichte van primaire VSMC’s uit de aorta van muizen, waarbij vergelijkbare reacties werden waargenomen op calcificerende omstandigheden en behandelingen met bekende remmers zoals levamisol en etidronaat. Deze eigenschappen maken MOVAS tot een betrouwbaar en kosteneffectief alternatief voor primaire VSMC’s, waardoor experimentele variabiliteit en ethische bezwaren worden verminderd.

Daarnaast zijn MOVAS-cellen gebruikt om het cholesterolmetabolisme te onderzoeken, een proces dat cruciaal is voor de ontwikkeling van atherosclerose. Ze brengen essentiële cholesteroltransporters tot expressie, zoals ABCA1 en ABCG1, en vertonen functionaliteit bij de afvoer van cholesterol naar HDL en apoAI. Experimenten met cholesterolbelasting hebben aangetoond dat ze kunnen transdifferentiëren tot macrofaagachtige cellen, een proces dat verband houdt met de vorming van atherosclerotische plaque. Deze bevindingen onderstrepen het nut van MOVAS-cellen bij het bestuderen van de cholesterolhomeostase, fenotypische plasticiteit en de progressie van vaatziekten.

Weefsel
Aorta, gladde spier
Ziekte
Normaal
Synoniemen
  • Movas-1
  • MOVAS-1
  • Movas

02Classificatie

Organisme
Muis
Seks
Niet gespecificeerd
Groei-eigenschappen
Aanhanger
GGO-status
GMO-S1
Details over de GGO-status
GMO-S1: This murine vascular smooth muscle cell line (MOVAS) contains a retroviral construct encoding SV40 T-Antigen together with a neomycin resistance marker, supporting sustained proliferation and transformation. The insert is stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Fibroblast-achtige
Celtype
Vasculair geassocieerde gladde spiercel

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
MOVAS (Cytion-catalogusnummer 305362)
NCBI-belastingnummer
10090
Cellosaurus
CVCL_0F08

05Expressie en vatbaarheid

Eiwit-expressie
Tot expressie gebrachte genen: actine, alfa-actine van gladde spieren, calponine 1 (basisch), desmine, eiwit 22 van gladde spieren (SM22-alfa)
Virussen
Transformant: Simian virus 40 (SV40)

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamine, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvaat (Cytion artikelnummer 820300a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Voeg aan het medium 10% FBS en 0,2 mg/ml G-418 toe
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Zaaidichtheid
1-3*10⁴/cm²
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Soort / ondersoort
C57BL/6
Leeftijd van de donor
Volwassen