Pāriet uz saturu
MOVAS
Audums
Aorta, gludā muskulatūra
Slimība
Parasts
Sinonīmi
Movas-1, MOVAS-1, Movas

Dokumenti

MOVAS

Cell line · Preces numurs 305362

The MOVAS cell line is a murine vascular smooth muscle cell (VSMC) line derived from the aortic smooth muscle cells of C57BL/6 mice. This immortalized cel...

€550.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

MOVAS šūnu līnija ir peles asinsvadu gludo muskuļu šūnu (VSMC) līnija, kas iegūta no C57BL/6 peles aortas gludo muskuļu šūnām. Šī imortalizētā šūnu līnija saglabā galvenās gludo muskuļu īpašības, tādējādi padarot to par vērtīgu rīku VSMC bioloģijas un patofizioloģijas izpētei. MOVAS šūnas ir plaši izmantotas pētījumos par asinsvadu procesiem, piemēram, aterosklerozi, kalcifikāciju un šūnu signālu pārraidi. Tās ekspresē raksturīgus gludo muskuļu marķierus, tostarp alfa-gludo muskuļu aktīnu (α-SMA), un tās var kultivēt dažādos eksperimentālos apstākļos, lai modelētu asinsvadu slimības.

Viens no galvenajiem MOVAS šūnu pielietojumiem ir asinsvadu kalcifikācijas pētījumi. Šī šūnu līnija var kalcificēties in vitro, ja to kultivē kalcifikācijas vidē, kas satur β-glicerofosfātu un askorbīnskābi, imitējot procesus, kas novēroti primārajās VSMC. MOVAS šūnām piemīt paaugstināta sārmainās fosfatāzes aktivitāte un kalcija nogulsnēšanās, kas ir galvenie asinsvadu kalcifikācijas marķieri. Šis modelis ir validēts arī, salīdzinot ar primārajām peles aortas VSMC, parādot līdzīgas reakcijas uz kalcifikācijas apstākļiem un ārstēšanu ar tādiem zināmiem inhibitoriem kā levamizols un etidronāts. Šīs īpašības padara MOVAS par uzticamu un izmaksu ziņā efektīvu alternatīvu primārajām VSMC, samazinot eksperimentālo variabilitāti un ētiskās bažas.

Turklāt MOVAS šūnas ir izmantotas holesterīna metabolisma izpētei — procesam, kas ir izšķirošs aterosklerozes attīstībā. Tās ekspresē būtiskus holesterīna transportētājus, piemēram, ABCA1 un ABCG1, un parāda funkcionalitāti holesterīna izplūdē uz HDL un apoAI. Holesterīna uzkrāšanas eksperimenti ir pierādījuši to spēju transdiferencēties par makrofāgu līdzīgām šūnām — procesu, kas saistīts ar aterosklerotisko plākšņu veidošanos. Šie atklājumi uzsver MOVAS šūnu lietderību holesterīna homeostāzes, fenotipiskās plastiskuma un asinsvadu slimību progresēšanas pētīšanā.

Audums
Aorta, gludā muskulatūra
Slimība
Parasts
Sinonīmi
  • Movas-1
  • MOVAS-1
  • Movas

02Klasifikācija

Organisms
Pele
Sekss
Nav norādīts
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
ĢMO statuss
GMO-S1
Sīkāka informācija par ĢMO statusu
GMO-S1: This murine vascular smooth muscle cell line (MOVAS) contains a retroviral construct encoding SV40 T-Antigen together with a neomycin resistance marker, supporting sustained proliferation and transformation. The insert is stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Fibroblastiem līdzīgs
Šūnu tips
Asinsvadu gludmuskuļu šūnas

04Identifikatori

Atsauce
MOVAS (Cytion kataloga numurs 305362)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
10090
Cellosaurus
CVCL_0F08

05Pazīmes un uzņēmība

Proteīnu ekspresija
Ekspresētie gēni: aktīns, gludo muskuļu alfa-aktīns, kalponīns 1 (bāziskais), desmīns, gludo muskuļu proteīns 22 (SM22 alfa)
Vīrusi
Transformants: Sīmiāna vīruss 40 (SV40)

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM, w: 4,5 g/l glikozes, w: 4 mM L-glutamīna, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM nātrija piruvāta (Cytion izstrādājuma numurs 820300a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildiniet barotni ar 10 % FBS un 0,2 mg/ml G-418
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sēšanas blīvums
1–3 × 10⁴/cm²
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Šķirne / pasuga
C57BL/6
Donora vecums
Pieaugušo