Przejdź do treści
MOVAS
Chusteczka
Aorta, mięśnie gładkie
Choroba
Normalny
Synonimy
Movas-1, MOVAS-1, Movas

Dokumenty

MOVAS

Cell line · Numer produktu 305362

The MOVAS cell line is a murine vascular smooth muscle cell (VSMC) line derived from the aortic smooth muscle cells of C57BL/6 mice. This immortalized cel...

€550.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Linia komórkowa MOVAS to mysia linia komórek mięśnia gładkiego naczyń krwionośnych (VSMC) wyhodowana z komórek mięśnia gładkiego aorty myszy C57BL/6. Ta nieśmiertelna linia komórkowa zachowuje kluczowe cechy mięśnia gładkiego, co czyni ją cennym narzędziem do badania biologii i patofizjologii komórek VSMC. Komórki MOVAS są szeroko wykorzystywane w badaniach nad procesami naczyniowymi, takimi jak miażdżyca, zwapnienie i transdukcja sygnałów komórkowych. Wykazują one ekspresję charakterystycznych markerów mięśni gładkich, w tym alfa-aktyny mięśni gładkich (α-SMA), i mogą być hodowane w różnych warunkach eksperymentalnych w celu modelowania chorób naczyniowych.

Jednym z głównych zastosowań komórek MOVAS są badania nad zwapnieniem naczyń. Linia ta może ulegać zwapnieniu in vitro, gdy jest hodowana w pożywkach sprzyjających zwapnieniu, zawierających β-glicerofosforan i kwas askorbinowy, co naśladuje procesy obserwowane w pierwotnych komórkach VSMC. Komórki MOVAS wykazują podwyższoną aktywność fosfatazy alkalicznej oraz odkładanie się wapnia, co stanowi kluczowe markery zwapnienia naczyń. Model ten został również zweryfikowany w porównaniu z pierwotnymi mysim komórkami VSMC aorty, wykazując porównywalne reakcje na warunki sprzyjające zwapnieniu oraz na leczenie znanymi inhibitorami, takimi jak lewamizol i etidronian. Cechy te sprawiają, że komórki MOVAS stanowią niezawodną i ekonomiczną alternatywę dla pierwotnych komórek VSMC, zmniejszając zmienność eksperymentalną i obawy natury etycznej.

Ponadto komórki MOVAS zostały wykorzystane do badania metabolizmu cholesterolu, procesu kluczowego dla rozwoju miażdżycy. Ekspresjonują one niezbędne transportery cholesterolu, takie jak ABCA1 i ABCG1, oraz wykazują funkcjonalność w zakresie wypływu cholesterolu do HDL i apoAI. Eksperymenty z obciążeniem cholesterolem wykazały ich zdolność do transdyferencjacji w komórki podobne do makrofagów, co jest procesem powiązanym z tworzeniem się blaszek miażdżycowych. Odkrycia te podkreślają przydatność komórek MOVAS w badaniu homeostazy cholesterolu, plastyczności fenotypowej oraz postępu chorób naczyniowych.

Chusteczka
Aorta, mięśnie gładkie
Choroba
Normalny
Synonimy
  • Movas-1
  • MOVAS-1
  • Movas

02Klasyfikacja

Organizm
Mysz
Seks
Nieokreślone
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Status GMO
GMO-S1
Szczegółowe informacje dotyczące statusu GMO
GMO-S1: This murine vascular smooth muscle cell line (MOVAS) contains a retroviral construct encoding SV40 T-Antigen together with a neomycin resistance marker, supporting sustained proliferation and transformation. The insert is stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Podobny do fibroblastów
Typ komórki
Komórka mięśnia gładkiego związana z naczyniami krwionośnymi

04Identyfikatory

Źródło
MOVAS (numer katalogowy Cytion 305362)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_0F08

05Ekspresja i podatność

Ekspresja białek
Ekspresja genów: aktyna, alfa-aktyna mięśni gładkich, kalponina 1 (zasadowa), desmina, białko mięśni gładkich 22 (SM22 alfa)
Wirusy
Transformant: Simian virus 40 (SV40)

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
DMEM, w: 4,5 g/l glukozy, w: 4 mM L-glutaminy, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pirogronianu sodu (numer artykułu Cytion 820300a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Do pożywki dodać 10% FBS oraz 0,2 mg/ml G-418
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Gęstość wysiewu
1–3 × 10⁴/cm²
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Rasa / podgatunek
C57BL/6
Wiek dawcy
Dorosły