Siirry sisältöön
MOVAS
Kudos
Aortta, sileä lihas
Sairaus
Normaali
Synonyymit
Movas-1, MOVAS-1, Movas

Asiakirjat

MOVAS

Cell line · Tuotenumero 305362

The MOVAS cell line is a murine vascular smooth muscle cell (VSMC) line derived from the aortic smooth muscle cells of C57BL/6 mice. This immortalized cel...

€550.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

MOVAS-solulinja on hiiren verisuonten sileälihassolulinja (VSMC), joka on peräisin C57BL/6-hiirten aortan sileälihassoluista. Tämä ikuistettu solulinja säilyttää sileän lihaksen keskeiset ominaisuudet, minkä ansiosta se on arvokas työkalu VSMC-solujen biologian ja patofysiologian tutkimuksessa. MOVAS-soluja on käytetty laajasti verisuoniprosesseja, kuten ateroskleroosia, kalkkeutumista ja solujen signaalinsiirtoa, koskevassa tutkimuksessa. Ne ilmentävät sileän lihaksen tyypillisiä merkkiaineita, kuten alfa-sileän lihaksen aktiinia (α-SMA), ja niitä voidaan viljellä erilaisissa kokeellisissa olosuhteissa verisuonisairauksien mallintamiseksi.

Yksi MOVAS-solujen tärkeimmistä sovelluksista on verisuonten kalkkeutumisen tutkimus. Tämä solulinja voi kalkkeutua in vitro, kun sitä viljellään β-glyserofosfaattia ja askorbiinihappoa sisältävässä kalkkeutuvassa elatusaineessa, mikä jäljittelee primaarisissa VSMC-soluissa havaittuja prosesseja. MOVAS-soluilla on kohonnut alkalisen fosfataasin aktiivisuus ja kalsiumin kertyminen, jotka ovat verisuonten kalkkeutumisen keskeisiä merkkiaineita. Tämä malli on myös validoitu primaaristen hiiren aortan VSMC-solujen kanssa, ja se on osoittanut vertailukelpoisia vasteita kalkkeutumisolosuhteisiin sekä hoitoihin tunnetuilla estäjillä, kuten levamisolilla ja etidronaatilla. Nämä ominaisuudet tekevät MOVAS-soluista luotettavan ja kustannustehokkaan vaihtoehdon primaarisille VSMC-soluille, mikä vähentää kokeellista vaihtelua ja eettisiä huolenaiheita.

Lisäksi MOVAS-soluja on käytetty kolesterolin aineenvaihdunnan tutkimiseen, joka on ateroskleroosin kehittymisen kannalta kriittinen prosessi. Ne ilmentävät keskeisiä kolesterolinsiirtäjiä, kuten ABCA1 ja ABCG1, ja osoittavat toiminnallisuutta kolesterolin siirtymisessä HDL:ään ja apoAI:hin. Kolesterolin lisäämiskokeet ovat osoittaneet niiden kyvyn erilaistua makrofagien kaltaisiksi soluiksi, mikä on prosessi, joka liittyy ateroskleroottisten plakkien muodostumiseen. Nämä havainnot korostavat MOVAS-solujen hyödyllisyyttä kolesterolin homeostaasin, fenotyyppisen plastisuuden ja verisuonisairauksien etenemisen tutkimuksessa.

Kudos
Aortta, sileä lihas
Sairaus
Normaali
Synonyymit
  • Movas-1
  • MOVAS-1
  • Movas

02Luokittelu

Organismi
Hiiri
Sukupuoli
Määrittelemätön
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
GMO-status
GMO-S1
GMO-statuksen tiedot
GMO-S1: This murine vascular smooth muscle cell line (MOVAS) contains a retroviral construct encoding SV40 T-Antigen together with a neomycin resistance marker, supporting sustained proliferation and transformation. The insert is stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Fibroblastien kaltaiset
Solutyyppi
Verisuoniin liittyvä sileälihassolu

04Tunnisteet

Lähdeviite
MOVAS (Cytion-tuotenumero 305362)
NCBI-verotunnus
10090
Cellosaurus
CVCL_0F08

05Ilmentyminen ja alttius

Proteiinin ilmentyminen
Ilmentyneet geenit: aktiini, sileän lihaksen alfa-aktiini, kalponiini 1 (perusmuoto), desmiini, sileän lihaksen proteiini 22 (SM22-alfa)
Virukset
Transformantti: Simian virus 40 (SV40)

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM, w: 4,5 g/l glukoosia, w: 4 mM L-glutamiinia, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvaattia (Cytionin artikkelinumero 820300a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Lisää elatusaineeseen 10 % FBS:ää ja 0,2 mg/ml G-418:aa
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Kylvötiheys
1–3 × 10⁴/cm²
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Rotua / alalajia
C57BL/6
Luovuttajan ikä
Aikuiset