Pāriet uz saturu
Mahlavu
Audums
Aknas
Slimība
Hepatocelulārā karcinoma
Sinonīmi
MAHLAVU

Dokumenti

Mahlavu

Cell line · Preces numurs 300473

The Mahlavu cell line is a human hepatocellular carcinoma (HCC) cell line derived from an adult patient with liver cancer. Hepatocellular carcinoma is the...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

Mahlavu šūnu līnija ir cilvēka hepatocelulārās karcinomas (HCC) šūnu līnija, kas iegūta no pieauguša pacienta ar aknu vēzi. Hepatocelulārā karcinoma ir visbiežāk sastopamais primārā aknu vēža veids, kas bieži vien ir saistīts ar hroniskām aknu slimībām, tostarp B vai C hepatīta infekciju un cirozi. Mahlavu šūnām piemīt agresīvam aknu vēzim raksturīgas īpašības, piemēram, augsta proliferācijas spēja, invazīva uzvedība un rezistence pret apoptozi, tāpēc tās ir vērtīgs modelis HCC progresēšanas molekulāro mehānismu izpētei un potenciālo pretvēža terapiju testēšanai.

Mahlavu šūnas ir pazīstamas ar savu epitēlija morfoloģiju, un tās parasti kultivē apstākļos, kas veicina aknu šūnu augšanu. Šīm šūnām ir mutācijas galvenajos onkogēnos un audzēju nomācošajos gēnos, kas veicina to audzēja īpašības. Pētnieki bieži izmanto Mahlavu šūnas, lai pētītu ar HCC saistītos signālu ceļus, piemēram, Wnt/β-katinīna ceļu, kas bieži tiek disregulēts aknu vēža gadījumos. Turklāt šī šūnu līnija ir noderīga zāļu rezistences pētījumos, jo tā var sniegt ieskatu mehānismos, ar kuru palīdzību HCC šūnas izvairās no standarta ķīmijterapijas terapijas.

Mahlavu šūnu līnija ir agresīva, tāpēc to izmanto arī metastāžu pētījumos. Pētījumi ar šīm šūnām var palīdzēt noskaidrot procesus, ar kuru palīdzību aknu vēzis izplatās uz citiem orgāniem, īpaši plaušām un limfmezgliem.

Audums
Aknas
Slimība
Hepatocelulārā karcinoma
Sinonīmi
  • MAHLAVU

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atbalstītājs

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlija

04Identifikatori

Atsauce
Mahlavu (Cytion kataloga numurs 300473)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_0405

05Apstrāde un audzēšana

Barotne
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-glutamīns, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion izstrādājuma numurs 820100a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS un 1% NEAA
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

07Ziedotājs

Donora vecums
Nav norādīts
Etniskā piederība
Āfrikas