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Mahlavu
Tessuto
Fegato
Malattia
Carcinoma epatocellulare
Sinonimi
MAHLAVU

Documenti

Mahlavu

Cell line · Codice prodotto 300473

The Mahlavu cell line is a human hepatocellular carcinoma (HCC) cell line derived from an adult patient with liver cancer. Hepatocellular carcinoma is the...

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare Mahlavu è una linea cellulare di carcinoma epatocellulare umano (HCC) derivata da un paziente adulto con cancro al fegato. Il carcinoma epatocellulare è il tipo più comune di cancro primario del fegato, spesso associato a malattie croniche del fegato, tra cui l'infezione da epatite B o C e la cirrosi. Le cellule di Mahlavu presentano caratteristiche tipiche del carcinoma epatico aggressivo, come l'elevata capacità proliferativa, il comportamento invasivo e la resistenza all'apoptosi, che le rendono un modello prezioso per studiare i meccanismi molecolari alla base della progressione del carcinoma epatico e per testare potenziali terapie antitumorali.

Le cellule Mahlavu sono note per la loro morfologia epiteliale e sono tipicamente coltivate in condizioni che supportano la crescita delle cellule epatiche. Queste cellule presentano mutazioni in oncogeni e geni soppressori tumorali chiave, che contribuiscono alle loro proprietà tumorigeniche. I ricercatori utilizzano spesso le cellule di Mahlavu per studiare le vie di segnalazione coinvolte nel carcinoma epatico, come la via Wnt/β-catenina, che è spesso disregolata nei tumori del fegato. Inoltre, questa linea cellulare è utile negli studi sulla resistenza ai farmaci, in quanto può fornire approfondimenti sui meccanismi con cui le cellule di HCC eludono i trattamenti chemioterapici standard.

Per la sua natura aggressiva, la linea cellulare Mahlavu viene impiegata anche nella ricerca sulle metastasi. Gli studi condotti su queste cellule possono aiutare a chiarire i processi di diffusione del tumore al fegato ad altri organi, in particolare ai polmoni e ai linfonodi.

Tessuto
Fegato
Malattia
Carcinoma epatocellulare
Sinonimi
  • MAHLAVU

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Donna
Proprietà di crescita
Aderente

03Caratteristiche

Morfologia
Epiteliale

04Identificatori

Riferimento bibliografico
Mahlavu (numero di catalogo Cytion 300473)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0405

05Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamina, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (articolo Cytion numero 820100a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS e l'1% di NEAA
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

07Donatore

Età dei donatori
Non specificato
Etnia
Africano