Ga naar de inhoud
16HBE140-
Weefsel
Long, bronchus
Synoniemen
16HBE14o-, 16-HBE14o, 16-HBEo, 16HBEo-, 16-HBE, 16HBE

Documenten

16HBE140-

Cell line · Productnummer 305234

€800.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De 16HBE140 cellijn is afgeleid van menselijke bronchiale epitheelcellen, die essentieel zijn voor het bestuderen van het respiratoire epitheel. Deze cellen hebben verschillende belangrijke kenmerken van primaire bronchiale epitheelcellen, waaronder het vermogen om nauwe juncties te vormen, karakteristieke markers tot expressie te brengen en een typische epitheliale morfologie te vertonen. Ze worden veel gebruikt in onderzoek dat zich richt op aandoeningen van de luchtwegen, geneesmiddelentransport en toxicologiestudies, en bieden een betrouwbaar in vitro model om het gedrag van bronchiale epitheelcellen onder verschillende omstandigheden te begrijpen.

Een van de belangrijke toepassingen van 16HBE140 cellen is in het onderzoek naar cystische fibrose (CF), een genetische aandoening van de luchtwegen. Deze cellen brengen het cystic fibrosis transmembrane conductance regulator (CFTR) eiwit tot expressie, waardoor ze een waardevol hulpmiddel zijn voor het bestuderen van de pathofysiologie van CF en voor het screenen van potentiële therapeutische middelen. Daarnaast worden 16HBE140 cellen gebruikt in onderzoek naar luchtwegontsteking, gezien hun reactie op ontstekingsbevorderende cytokinen en vervuilende stoffen, wat bijdraagt aan het begrip van chronische ademhalingsaandoeningen zoals astma en chronische obstructieve longziekte (COPD).

Weefsel
Long, bronchus
Synoniemen
  • 16HBE14o-
  • 16-HBE14o
  • 16-HBEo
  • 16HBEo-
  • 16-HBE
  • 16HBE

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Man
Groei-eigenschappen
Aanhanger
GGO-status
GMO-S1
Details over de GGO-status
GMO-S1: This human bronchial epithelial cell line (16HBE14o-) carries a non-replicating pSVori-based construct expressing the SV40 Large T Antigen from Macaca mulatta polyomavirus 1, enabling extended proliferation through interference with cell-cycle control. The insert is stably present in primary-derived human bronchial epithelial cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Celtype
Epitheelcel van bronchus

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
16HBE140- (Cytion-catalogusnummer 305234)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0112

05Expressie en vatbaarheid

Virussen
Transformant: Simian virus 40 (SV40)

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion artikelnummer 820100a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% paardenserum en 1% NEAA
Dissociatiereagens
Accutase
Coating van de kolven
Coatingoplossing op basis van LHC-basismedium: 0,01 mg/ml humaan fibronectine, 0,1 mg/ml runderserumalbumine (BSA)
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
1 jaar