Siirry sisältöön
16HBE140-
Kudos
Keuhkot, keuhkoputket
Synonyymit
16HBE14o-, 16-HBE14o, 16-HBEo, 16HBEo-, 16-HBE, 16HBE

Asiakirjat

16HBE140-

Cell line · Tuotenumero 305234

€800.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

16HBE140-solulinja on peräisin ihmisen keuhkoputkien epiteelisoluista, jotka ovat olennaisia hengitysteiden epiteelin tutkimisessa. Nämä solut säilyttävät useita primaaristen keuhkoputkien epiteelisolujen keskeisiä ominaisuuksia, kuten kyvyn muodostaa tiukkoja liitoksia, ilmentää tyypillisiä merkkiaineita ja osoittaa tyypillistä epiteelin morfologiaa. Niitä käytetään laajalti hengityselinsairauksiin, lääkkeiden kulkeutumiseen ja toksikologisiin tutkimuksiin keskittyvässä tutkimuksessa, ja ne tarjoavat luotettavan in vitro -mallin keuhkoputkien epiteelisolujen käyttäytymisen ymmärtämiseksi eri olosuhteissa.

Yksi 16HBE140-solujen merkittävistä sovelluksista on kystisen fibroosin (CF), hengityselimiin vaikuttavan geneettisen sairauden, tutkiminen. Nämä solut ilmentävät CFTR-proteiinia (cystic fibrosis transmembrane conductance regulator), mikä tekee niistä arvokkaan välineen CF:n patofysiologian tutkimiseen ja mahdollisten terapeuttisten aineiden seulontaan. Lisäksi 16HBE140-soluja hyödynnetään hengitysteiden tulehdustutkimuksessa, koska ne reagoivat pro-inflammatorisiin sytokiineihin ja epäpuhtauksiin, mikä auttaa ymmärtämään kroonisia hengitystiesairauksia, kuten astmaa ja kroonista obstruktiivista keuhkosairautta (COPD).

Kudos
Keuhkot, keuhkoputket
Synonyymit
  • 16HBE14o-
  • 16-HBE14o
  • 16-HBEo
  • 16HBEo-
  • 16-HBE
  • 16HBE

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
GMO-status
GMO-S1
GMO-statuksen tiedot
GMO-S1: This human bronchial epithelial cell line (16HBE14o-) carries a non-replicating pSVori-based construct expressing the SV40 Large T Antigen from Macaca mulatta polyomavirus 1, enabling extended proliferation through interference with cell-cycle control. The insert is stably present in primary-derived human bronchial epithelial cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Solutyyppi
Keuhkoputken epiteelisolu

04Tunnisteet

Lähdeviite
16HBE140- (Cytion-tuotenumero 305234)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_0112

05Ilmentyminen ja alttius

Virukset
Transformantti: Simian virus 40 (SV40)

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiini, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytionin artikkelinumero 820100a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 % hevosseerumilla ja 1 % NEAA:lla
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Pullon pinnoitus
LHC-perusliuokseen perustuva päällystysliuos: 0,01 mg/ml ihmisen fibronektiiniä, 0,1 mg/ml naudan seerumialbumiinia (BSA)
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
1 vuosi