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16HBE140-
Gewebe
Lunge, Bronchien
Synonyme
16HBE14o-, 16-HBE14o, 16-HBEo, 16HBEo-, 16-HBE, 16HBE

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16HBE140-

Cell line · Artikelnummer 305234

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die Zelllinie 16HBE140 ist von menschlichen Bronchialepithelzellen abgeleitet, die für die Untersuchung des Atmungsepithels unerlässlich sind. Diese Zellen weisen mehrere Schlüsseleigenschaften von primären Bronchialepithelzellen auf, darunter die Fähigkeit, enge Verbindungen zu bilden, charakteristische Marker zu exprimieren und eine typische Epithelmorphologie zu zeigen. Sie werden häufig in der Forschung eingesetzt, die sich mit Atemwegserkrankungen, Medikamententransport und toxikologischen Studien befasst, und stellen ein zuverlässiges In-vitro-Modell dar, um das Verhalten von Bronchialepithelzellen unter verschiedenen Bedingungen zu verstehen.

Eine der wichtigsten Anwendungen von 16HBE140-Zellen ist die Untersuchung von Mukoviszidose (CF), einer genetisch bedingten Störung des Atmungssystems. Diese Zellen exprimieren das CFTR-Protein (Cystic Fibrosis Transmembrane Conductance Regulator), was sie zu einem wertvollen Instrument für die Untersuchung der Pathophysiologie der Mukoviszidose und für das Screening potenzieller Therapeutika macht. Darüber hinaus werden 16HBE140-Zellen aufgrund ihrer Reaktion auf entzündungsfördernde Zytokine und Schadstoffe in der Forschung zur Entzündung der Atemwege eingesetzt, was zum Verständnis von chronischen Atemwegserkrankungen wie Asthma und chronisch obstruktiver Lungenerkrankung (COPD) beiträgt.

Gewebe
Lunge, Bronchien
Synonyme
  • 16HBE14o-
  • 16-HBE14o
  • 16-HBEo
  • 16HBEo-
  • 16-HBE
  • 16HBE

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Männlich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
GVO-Status
GMO-S1
Angaben zum GVO-Status
GMO-S1: This human bronchial epithelial cell line (16HBE14o-) carries a non-replicating pSVori-based construct expressing the SV40 Large T Antigen from Macaca mulatta polyomavirus 1, enabling extended proliferation through interference with cell-cycle control. The insert is stably present in primary-derived human bronchial epithelial cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Zelltyp
Epithelzelle der Bronchien

04Bezeichner

Quellenangabe
16HBE140- (Cytion-Katalognummer 305234)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_0112

05Expression und Anfälligkeit

Viren
Transformant: Simian-Virus 40 (SV40)

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion-Artikelnummer 820100a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10 % Pferdeserum und 1 % NEAA
Dissoziationsreagenz
Accutase
Flaschenbeschichtung
Beschichtungslösung auf Basis des LHC-Basalmediums: 0,01 mg/ml Humanes Fibronektin, 0,1 mg/ml Rinderserumalbumin (BSA)
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Alter des Spenders
1 Jahr