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16HBE140-
Tessuto
Polmone, bronco
Sinonimi
16HBE14o-, 16-HBE14o, 16-HBEo, 16HBEo-, 16-HBE, 16HBE

Documenti

16HBE140-

Cell line · Codice prodotto 305234

€800.00IVA e spese di spedizione escluse
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1

01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare 16HBE140 deriva da cellule epiteliali bronchiali umane, essenziali per lo studio dell'epitelio respiratorio. Queste cellule conservano diverse caratteristiche chiave delle cellule epiteliali bronchiali primarie, tra cui la capacità di formare giunzioni strette, esprimere marcatori caratteristici e mostrare la tipica morfologia epiteliale. Sono ampiamente utilizzate nella ricerca sulle malattie respiratorie, sul trasporto dei farmaci e sugli studi di tossicologia, fornendo un modello in vitro affidabile per comprendere il comportamento delle cellule epiteliali bronchiali in varie condizioni.

Una delle applicazioni significative delle cellule 16HBE140 è lo studio della fibrosi cistica (FC), una malattia genetica che colpisce il sistema respiratorio. Queste cellule esprimono la proteina CFTR (cystic fibrosis transmembrane conductance regulator), che le rende uno strumento prezioso per lo studio della fisiopatologia della FC e per lo screening di potenziali agenti terapeutici. Inoltre, le cellule 16HBE140 sono utilizzate nella ricerca sull'infiammazione delle vie aeree, data la loro risposta alle citochine pro-infiammatorie e agli inquinanti, contribuendo alla comprensione delle condizioni respiratorie croniche come l'asma e la broncopneumopatia cronica ostruttiva (BPCO).

Tessuto
Polmone, bronco
Sinonimi
  • 16HBE14o-
  • 16-HBE14o
  • 16-HBEo
  • 16HBEo-
  • 16-HBE
  • 16HBE

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Aderente
Presenza di OGM
GMO-S1
Dettagli sullo stato degli OGM
GMO-S1: This human bronchial epithelial cell line (16HBE14o-) carries a non-replicating pSVori-based construct expressing the SV40 Large T Antigen from Macaca mulatta polyomavirus 1, enabling extended proliferation through interference with cell-cycle control. The insert is stably present in primary-derived human bronchial epithelial cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Tipo di cellula
Cellula epiteliale del bronco

04Identificatori

Riferimento bibliografico
16HBE140- (codice Cition 305234)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0112

05Espressione e suscettibilità

Virus
Trasformante: Simian virus 40 (SV40)

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamina, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (articolo Cytion numero 820100a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di siero di cavallo e l'1% di NEAA
Reagente di dissociazione
Accutase
Rivestimento del pallone
Soluzione di rivestimento a base di terreno di coltura LHC: 0,01 mg/mL di fibronectina umana, 0,1 mg/mL di albumina sierica bovina (BSA)
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
1 anno