Pāriet uz saturu
16HBE140-
Audums
Plaušas, bronhi
Sinonīmi
16HBE14o-, 16-HBE14o, 16-HBEo, 16HBEo-, 16-HBE, 16HBE

Dokumenti

16HBE140-

Cell line · Preces numurs 305234

€800.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

16HBE140 šūnu līnija ir iegūta no cilvēka bronhu epitēlija šūnām, kas ir būtiskas elpceļu epitēlija izpētei. Šīs šūnas saglabā vairākas bronhu epitēlija primāro šūnu galvenās īpašības, tostarp spēju veidot ciešus savienojumus, ekspresēt raksturīgos marķierus un uzrādīt tipisku epitēlija morfoloģiju. Tās plaši izmanto pētījumos, kas vērsti uz elpošanas ceļu slimībām, zāļu transportu un toksikoloģijas pētījumiem, nodrošinot uzticamu in vitro modeli, lai izprastu bronhu epitēlija šūnu uzvedību dažādos apstākļos.

Viens no nozīmīgākajiem 16HBE140 šūnu lietojumiem ir cistiskās fibrozes (CF) - ģenētiskas slimības, kas ietekmē elpošanas sistēmu, - izpēte. Šīs šūnas ekspresē cistiskās fibrozes transmembrānas vadītspējas regulatora (CFTR) proteīnu, padarot tās par vērtīgu līdzekli CF patofizioloģijas izpētei un iespējamo terapeitisko līdzekļu skrīningam. Turklāt 16HBE140 šūnas tiek izmantotas elpceļu iekaisuma pētījumos, ņemot vērā to reakciju uz proiekaisuma citokīniem un piesārņotājiem, palīdzot izprast hroniskas elpošanas sistēmas slimības, piemēram, astmu un hronisku obstruktīvu plaušu slimību (HOPS).

Audums
Plaušas, bronhi
Sinonīmi
  • 16HBE14o-
  • 16-HBE14o
  • 16-HBEo
  • 16HBEo-
  • 16-HBE
  • 16HBE

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
ĢMO statuss
GMO-S1
Sīkāka informācija par ĢMO statusu
GMO-S1: This human bronchial epithelial cell line (16HBE14o-) carries a non-replicating pSVori-based construct expressing the SV40 Large T Antigen from Macaca mulatta polyomavirus 1, enabling extended proliferation through interference with cell-cycle control. The insert is stably present in primary-derived human bronchial epithelial cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Šūnu tips
Bronhu epitēlija šūna

04Identifikatori

Atsauce
16HBE140- (Cytion kataloga numurs 305234)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_0112

05Pazīmes un uzņēmība

Vīrusi
Transformants: Sīmiāna vīruss 40 (SV40)

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-glutamīns, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion izstrādājuma numurs 820100a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildiniet barotni ar 10% zirgu serumu un 1% NEAA
Disociācijas reaģents
Accutase
Kolbas pārklājums
LHC pamatvides pārklājuma šķīdums: 0,01 mg/ml cilvēka fibronektīna, 0,1 mg/ml liellopu seruma albumīna (BSA)
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
1 gads