İçeriğe atla
16HBE140-
Doku
Akciğer, bronş
Eş anlamlılar
16HBE14o-, 16-HBE14o, 16-HBEo, 16HBEo-, 16-HBE, 16HBE

16HBE140-

Cell line · Ürün numarası 305234

€800.00vergi ve kargo hariç
Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

16HBE140 hücre hattı, solunum epitelini incelemek için gerekli olan insan bronş epitel hücrelerinden türetilmiştir. Bu hücreler, sıkı bağlantılar oluşturma, karakteristik belirteçleri ifade etme ve tipik epitel morfolojisi sergileme yeteneği de dahil olmak üzere birincil bronş epitel hücrelerinin birkaç temel özelliğini korur. Solunum hastalıkları, ilaç taşınması ve toksikoloji çalışmalarına odaklanan araştırmalarda yaygın olarak kullanılırlar ve çeşitli koşullar altında bronşiyal epitel hücre davranışını anlamak için güvenilir bir in vitro model sağlarlar.

16HBE140 hücrelerinin önemli uygulamalarından biri, solunum sistemini etkileyen genetik bir bozukluk olan kistik fibrozisin (KF) araştırılmasıdır. Bu hücreler kistik fibroz transmembran iletkenlik regülatörü (CFTR) proteinini eksprese ederek onları KF patofizyolojisini incelemek ve potansiyel terapötik ajanları taramak için değerli bir araç haline getirmektedir. Ayrıca, 16HBE140 hücreleri, pro-enflamatuar sitokinlere ve kirleticilere verdikleri yanıt göz önüne alındığında, astım ve kronik obstrüktif akciğer hastalığı (KOAH) gibi kronik solunum rahatsızlıklarının anlaşılmasına yardımcı olarak hava yolu enflamasyonu araştırmalarında kullanılmaktadır.

Doku
Akciğer, bronş
Eş anlamlılar
  • 16HBE14o-
  • 16-HBE14o
  • 16-HBEo
  • 16HBEo-
  • 16-HBE
  • 16HBE

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Erkek
Büyüme özellikleri
Bağlı
GDO durumu
GMO-S1
GDO durumuna ilişkin ayrıntılar
GMO-S1: This human bronchial epithelial cell line (16HBE14o-) carries a non-replicating pSVori-based construct expressing the SV40 Large T Antigen from Macaca mulatta polyomavirus 1, enabling extended proliferation through interference with cell-cycle control. The insert is stably present in primary-derived human bronchial epithelial cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Hücre türü
Bronş epitel hücresi

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
16HBE140- (Cytion katalog numarası 305234)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_0112

05İfade ve duyarlılık

Virüsler
Transformant: Simian virüs 40 (SV40)

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion makale numarası 820100a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 At Serumu ve %1 NEAA ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Şişe kaplaması
LHC bazlı kaplama çözeltisi: 0,01 mg/mL insan fibronektini, 0,1 mg/mL sığır serum albümini (BSA)
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Bağışçının yaşı
1 yıl