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16HBE140-
Tecido
Pulmão, brônquios
Sinónimos
16HBE14o-, 16-HBE14o, 16-HBEo, 16HBEo-, 16-HBE, 16HBE

Documentos

16HBE140-

Cell line · Número do produto 305234

€800.00sem impostos nem portes de envio

Personalização / Recomendações

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Recomendado (lote mais recente)
  • CoA
1

01Informações gerais

Descrição

A linha celular 16HBE140 é derivada de células epiteliais brônquicas humanas, que são essenciais para o estudo do epitélio respiratório. Estas células mantêm várias caraterísticas-chave das células epiteliais brônquicas primárias, incluindo a capacidade de formar junções estreitas, expressar marcadores caraterísticos e exibir uma morfologia epitelial típica. São amplamente utilizadas em investigação centrada em doenças respiratórias, transporte de fármacos e estudos toxicológicos, proporcionando um modelo in vitro fiável para compreender o comportamento das células epiteliais brônquicas em várias condições.

Uma das aplicações significativas das células 16HBE140 é a investigação da fibrose quística (FC), uma doença genética que afecta o sistema respiratório. Estas células expressam a proteína reguladora da condutância transmembranar da fibrose cística (CFTR), o que as torna uma ferramenta valiosa para o estudo da fisiopatologia da FC e para o rastreio de potenciais agentes terapêuticos. Além disso, as células 16HBE140 são utilizadas na investigação da inflamação das vias respiratórias, dada a sua resposta a citocinas pró-inflamatórias e poluentes, ajudando a compreender as doenças respiratórias crónicas, como a asma e a doença pulmonar obstrutiva crónica (DPOC).

Tecido
Pulmão, brônquios
Sinónimos
  • 16HBE14o-
  • 16-HBE14o
  • 16-HBEo
  • 16HBEo-
  • 16-HBE
  • 16HBE

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Masculino
Propriedades de crescimento
Aderente
Estatuto em matéria de OGM
GMO-S1
Detalhes sobre o estatuto dos OGM
GMO-S1: This human bronchial epithelial cell line (16HBE14o-) carries a non-replicating pSVori-based construct expressing the SV40 Large T Antigen from Macaca mulatta polyomavirus 1, enabling extended proliferation through interference with cell-cycle control. The insert is stably present in primary-derived human bronchial epithelial cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Nível de biossegurança
1

03Características

Tipo de célula
Célula epitelial dos brônquios

04Identificadores

Referência
16HBE140- (número de catálogo Cytion 305234)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0112

05Expressão e suscetibilidade

Vírus
Transformante: Vírus símio 40 (SV40)

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
EMEM (MEM Eagle), com: 2 mM L-Glutamina, com: 2,2 g/L NaHCO3, com: EBSS (número de artigo Cytion 820100a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de soro de cavalo e 1% de NEAA
Reagente de dissociação
Accutase
Revestimento do frasco
Solução de revestimento à base de meio basal LHC: 0,01 mg/mL de fibronectina humana, 0,1 mg/mL de albumina sérica bovina (BSA)
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
1 ano