Skip to content
16HBE140-
Tissue
ปอด, หลอดลม
Synonyms
16HBE14o-, 16-HBE14o, 16-HBEo, 16HBEo-, 16-HBE, 16HBE

Documents

16HBE140-

Cell line · Product number 305234

€800.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

เซลล์ไลน์ 16HBE140 มีต้นกำเนิดจากเซลล์เยื่อบุหลอดลมของมนุษย์ ซึ่งมีความสำคัญอย่างยิ่งในการศึกษาเยื่อบุทางเดินหายใจ เซลล์เหล่านี้ยังคงลักษณะสำคัญหลายประการของเซลล์เยื่อบุหลอดลมปฐมภูมิไว้ เช่น ความสามารถในการสร้างรอยต่อที่แน่นหนา การแสดงออกของตัวบ่งชี้เฉพาะ และลักษณะทางสัณฐานวิทยาของเยื่อบุที่เป็นแบบฉบับ เซลล์เหล่านี้ถูกนำมาใช้อย่างแพร่หลายในงานวิจัยที่มุ่งเน้นโรคทางเดินหายใจ การขนส่งยา และการศึกษาพิษวิทยา โดยเป็นแบบจำลองในหลอดทดลองที่เชื่อถือได้สำหรับการทำความเข้าใจพฤติกรรมของเซลล์เยื่อบุหลอดลมภายใต้สภาวะต่างๆ

หนึ่งในแอปพลิเคชันที่สำคัญของเซลล์ 16HBE140 คือการวิจัยเกี่ยวกับโรคซิสติกไฟโบรซิส (CF) ซึ่งเป็นโรคทางพันธุกรรมที่ส่งผลกระทบต่อระบบทางเดินหายใจ เซลล์เหล่านี้แสดงโปรตีน cystic fibrosis transmembrane conductance regulator (CFTR) ทำให้เป็นเครื่องมือที่มีค่าสำหรับการศึกษาพยาธิสรีรวิทยาของ CF และการคัดกรองสารบำบัดที่มีศักยภาพนอกจากนี้ เซลล์ 16HBE140 ยังถูกนำมาใช้ในการวิจัยการอักเสบของทางเดินหายใจ เนื่องจากเซลล์เหล่านี้ตอบสนองต่อไซโตไคน์ที่กระตุ้นการอักเสบและมลพิษต่าง ๆ ซึ่งช่วยในการทำความเข้าใจเกี่ยวกับโรคทางเดินหายใจเรื้อรัง เช่น โรคหืดและโรคปอดอุดกั้นเรื้อรัง (COPD)

Tissue
ปอด, หลอดลม
Synonyms
  • 16HBE14o-
  • 16-HBE14o
  • 16-HBEo
  • 16HBEo-
  • 16-HBE
  • 16HBE

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This human bronchial epithelial cell line (16HBE14o-) carries a non-replicating pSVori-based construct expressing the SV40 Large T Antigen from Macaca mulatta polyomavirus 1, enabling extended proliferation through interference with cell-cycle control. The insert is stably present in primary-derived human bronchial epithelial cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Cell type
เซลล์เยื่อบุผิวของหลอดลม

04Identifiers

Citation
16HBE140- (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 305234)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0112

05Expression and susceptibility

Viruses
ทรานส์ฟอร์แมนท์: ไวรัสซิเมียน 40 (SV40)

06Handling and culture

Culture medium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2.2 g/L NaHCO3, w: EBSS (หมายเลขบทความ Cytion 820100a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมสารอาหารเสริมลงในอาหารเลี้ยงเชื้อด้วยเซรั่มม้า 10% และ NEAA 1%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Flask coating
สารเคลือบที่มีพื้นฐานจากอาหารเลี้ยงเชื้อ LHC: 0.01 มก./มล. ไฟโบรเนกตินจากมนุษย์, 0.1 มก./มล. อัลบูมินจากเซรั่มวัว (BSA)
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Donor age
1 ปี