Ga naar de inhoud
MHCC-97H
Weefsel
Lever
Ziekte
Hepatocellulair carcinoom bij volwassenen
Synoniemen
MHCC 97-H, MHCC97-H, MHCC97H

Documenten

MHCC-97H

Cell line · Productnummer 305442

The MHCC-97H cell line is a human hepatocellular carcinoma (HCC) model with a high metastatic potential. It was established from the MHCC97 parental line,...

€430.00excl. btw en verzendkosten
Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De MHCC-97H-cellijn is een model voor humaan hepatocellulair carcinoom (HCC) met een hoog metastatisch potentieel. Het is afgeleid van de MHCC97-ouderlijn, die afkomstig is van een mannelijke patiënt met HCC in verband met een hepatitis B-virusinfectie (HBV). MHCC-97H is op grote schaal gebruikt in studies gericht op kankeruitzaaiingen, met name omdat het consequent spontane longmetastasen vertoont na orthotope implantatie in muismodellen. Deze eigenschap maakt het een waardevolle bron voor het onderzoeken van de mechanismen van HCC-progressie en metastase.

MHCC-97H-cellen vertonen een epitheliale morfologie en bezitten belangrijke genetische en moleculaire kenmerken die bijdragen aan hun agressieve metastatisch gedrag. De lijn staat bekend om zijn opregulatie van matrixmetalloproteïnasen (MMP-2 en MMP-9), die de afbraak van de extracellulaire matrix vergemakkelijken en invasieve capaciteiten bevorderen. Proteomische analyses hebben verschillende differentieel tot expressie gebrachte eiwitten in MHCC-97H geïdentificeerd in vergelijking met zijn laag-metastatische tegenhanger MHCC-97L, waaronder verhoogde niveaus van pyruvaatkinase M2 en S100 calcium-bindend eiwit A4. Deze bevindingen benadrukken hun nut bij het bestuderen van de moleculaire routes die metastase regelen.

MHCC-97H wordt gebruikt in preklinisch onderzoek voor het testen van therapeutische strategieën gericht op metastase. In vivo modellen met deze cellijn stellen onderzoekers in staat om de werkzaamheid te onderzoeken van behandelingen die gericht zijn op het verminderen van metastatische verspreiding, met name naar de longen. Daarnaast helpt MHCC-97H bij de ontwikkeling van biomarkers voor het voorspellen van de agressiviteit van HCC en bij het bestuderen van de rol van de tumor-micro-omgeving bij metastase. Deze toepassingen onderstrepen het cruciale belang ervan voor het vergroten van ons inzicht in de biologie van hepatocellulair carcinoom.

Weefsel
Lever
Ziekte
Hepatocellulair carcinoom bij volwassenen
Synoniemen
  • MHCC 97-H
  • MHCC97-H
  • MHCC97H

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Man
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
2

03Kenmerken

Tumorverwekkend
Hoog metastatisch potentieel

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
MHCC-97H (Cytion-catalogusnummer 305442)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_4972

05Expressie en vatbaarheid

Mutatieprofiel
Mutatie: BRD7, p.Glu277Glyfs*18 (c.830_831delAG); Mutatie: KEAP1, p.Pro445Glnfs*13 (c.1334delC); Mutatie: TP53, p.Glu51Ter (c.151G>T)
Virussen
Transformant: hepatitis B-virus (HBV)

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamine, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvaat (Cytion artikelnummer 820300a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Zaaidichtheid
1,5 tot 4 x 104 cellen/cm2
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
39 jaar
Etnische afkomst
Chinees