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MHCC-97H
Tessuto
Fegato
Malattia
Carcinoma epatocellulare adulto
Sinonimi
MHCC 97-H, MHCC97-H, MHCC97H

Documenti

MHCC-97H

Cell line · Codice prodotto 305442

The MHCC-97H cell line is a human hepatocellular carcinoma (HCC) model with a high metastatic potential. It was established from the MHCC97 parental line,...

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare MHCC-97H è un modello di carcinoma epatocellulare umano (HCC) con un elevato potenziale metastatico. È stata creata dalla linea parentale MHCC97, derivata da un paziente maschio affetto da HCC correlato all'infezione da virus dell'epatite B (HBV). MHCC-97H è stata ampiamente utilizzata in studi incentrati sulle metastasi tumorali, in particolare perché dimostra costantemente metastasi polmonari spontanee dopo l'impianto ortotopico in modelli murini. Questa caratteristica la rende una risorsa preziosa per esplorare i meccanismi di progressione e metastasi dell'HCC.

Le cellule MHCC-97H presentano una morfologia epiteliale e possiedono caratteristiche genetiche e molecolari chiave che contribuiscono al loro comportamento metastatico aggressivo. La linea è nota per la sua sovraregolazione delle metalloproteinasi della matrice (MMP-2 e MMP-9), che facilitano la degradazione della matrice extracellulare e promuovono le capacità invasive. Le analisi proteomiche hanno identificato diverse proteine espresse in modo differenziale in MHCC-97H rispetto alla sua controparte a bassa metastasi MHCC-97L, tra cui livelli elevati di piruvato chinasi M2 e proteina A4 legante il calcio S100. Questi risultati evidenziano la loro utilità nello studio dei percorsi molecolari che regolano le metastasi.

MHCC-97H è utilizzata nella ricerca preclinica per testare strategie terapeutiche mirate alle metastasi. I modelli in vivo che coinvolgono questa linea cellulare consentono ai ricercatori di studiare l'efficacia dei trattamenti volti a mitigare la diffusione metastatica, in particolare ai polmoni. Inoltre, MHCC-97H aiuta nello sviluppo di biomarcatori per prevedere l'aggressività dell'HCC e nello studio del ruolo del microambiente tumorale nelle metastasi. Queste applicazioni sottolineano la sua importanza fondamentale nel far progredire la nostra comprensione della biologia del carcinoma epatocellulare.

Tessuto
Fegato
Malattia
Carcinoma epatocellulare adulto
Sinonimi
  • MHCC 97-H
  • MHCC97-H
  • MHCC97H

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
2

03Caratteristiche

Tumorigenico
Elevato potenziale metastatico

04Identificatori

Riferimento bibliografico
MHCC-97H (numero di catalogo Cytion 305442)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_4972

05Espressione e suscettibilità

Profilo mutazionale
Mutazione: BRD7, p.Glu277Glyfs*18 (c.830_831delAG); Mutazione: KEAP1, p.Pro445Glnfs*13 (c.1334delC); Mutazione: TP53, p.Glu51Ter (c.151G>T)
Virus
Trasformante: virus dell'epatite B (HBV)

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
DMEM, w: 4,5 g/L di glucosio, w: 4 mM di L-Glutammina, w: 3,7 g/L di NaHCO3, w: 1,0 mM di piruvato di sodio (articolo Cytion numero 820300a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Densità di semina
Da 1,5 a 4 x 104 cellule/cm2
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
39 anni
Etnia
Cinese