
- Tissue
- Fígado
- Disease
- Carcinoma hepatocelular em adultos
- Synonyms
- MHCC 97-H, MHCC97-H, MHCC97H
Documents
MHCC-97H
Cell line · Product number 305442
The MHCC-97H cell line is a human hepatocellular carcinoma (HCC) model with a high metastatic potential. It was established from the MHCC97 parental line,...
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01General information
- Description
A linhagem celular MHCC-97H é um modelo de carcinoma hepatocelular humano (CHC) com alto potencial metastático. Ela foi estabelecida a partir da linhagem parental MHCC97, derivada de um paciente do sexo masculino com CHC associado à infecção pelo vírus da hepatite B (VHB). A MHCC-97H tem sido amplamente utilizada em estudos focados na metástase do câncer, principalmente porque demonstra consistentemente metástases pulmonares espontâneas após implantação ortotópica em modelos murinos. Essa característica a torna um recurso valioso para a exploração dos mecanismos de progressão e metástase do HCC.
As células MHCC-97H apresentam morfologia epitelial e possuem características genéticas e moleculares essenciais que contribuem para seu comportamento metastático agressivo. A linhagem é conhecida por sua regulação positiva das metaloproteinases da matriz (MMP-2 e MMP-9), que facilitam a degradação da matriz extracelular e promovem a capacidade invasiva. Análises proteômicas identificaram várias proteínas expressas de forma diferencial na MHCC-97H em comparação com sua contraparte de baixa metástase, a MHCC-97L, incluindo níveis elevados de piruvato quinase M2 e da proteína S100 A4 ligadora de cálcio. Essas descobertas destacam sua utilidade no estudo das vias moleculares que regem a metástase.
A MHCC-97H é utilizada em pesquisas pré-clínicas para testar estratégias terapêuticas direcionadas à metástase. Modelos in vivo envolvendo essa linhagem celular permitem que os pesquisadores investiguem a eficácia de tratamentos destinados a mitigar a disseminação metastática, especialmente para os pulmões. Além disso, a MHCC-97H auxilia no desenvolvimento de biomarcadores para prever a agressividade do HCC e no estudo do papel do microambiente tumoral na metástase. Essas aplicações ressaltam sua importância fundamental para o avanço de nossa compreensão da biologia do carcinoma hepatocelular.
- Tissue
- Fígado
- Disease
- Carcinoma hepatocelular em adultos
- Synonyms
- MHCC 97-H
- MHCC97-H
- MHCC97H
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 2
03Characteristics
- Tumourigenic
- Alto potencial metastático
04Identifiers
- Citation
- MHCC-97H (número de catálogo da Cytion 305442)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_4972
05Expression and susceptibility
- Mutational profile
- Mutação: BRD7, p.Glu277Glyfs*18 (c.830_831delAG); Mutação: KEAP1, p.Pro445Glnfs*13 (c.1334delC); Mutação: TP53, p.Glu51Ter (c.151G>T)
- Viruses
- Transformante: vírus da hepatite B (VHB)
06Handling and culture
- Culture medium
- DMEM, p/v: 4,5 g/L de glicose, p/v: 4 mM de L-glutamina, p/v: 3,7 g/L de NaHCO₃, p/v: 1,0 mM de piruvato de sódio (número de artigo da Cytion 820300a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.
- Supplements
- Adicione 10% de FBS ao meio
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- Remova o meio antigo das células aderentes e lave-as com PBS sem cálcio nem magnésio. Para frascos T25, use 3 a 5 ml de PBS; para frascos T75, use 5 a 10 ml. Em seguida, cubra as células completamente com Accutase, utilizando 1 a 2 ml para frascos T25 e 2,5 ml para frascos T75. Deixe as células incubarem à temperatura ambiente por 8 a 10 minutos para que se desprendam. Após a incubação, misture delicadamente as células com 10 ml de meio para ressuspender, depois centrifugue a 300xg por 3 minutos. Descarte o sobrenadante, ressuspenda as células em meio fresco e transfira-as para novos frascos que já contenham meio fresco.
- Seeding density
- 1,5 a 4 × 10⁴ células/cm²
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.
Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.
- Freeze medium
- Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% de DMSO para garantir viabilidade adequada após o descongelamento, ou CM-1 (número de catálogo da Cytion 800100), que inclui osmoprotetores e estabilizadores metabólicos otimizados para melhorar a recuperação e reduzir o estresse induzido pela criopreservação.
- Storage conditions
Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.
- Shipping conditions
As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.
08Donor
- Donor age
- 39 anos
- Ethnicity
- Chinês
09Legal and safety
- Safety precautions
- Ao planejar o armazenamento de um criotubo em nitrogênio líquido para descongelamento futuro, é obrigatório seguir medidas de segurança rigorosas. É essencial o uso de luvas e roupas de proteção adequadas, além do uso obrigatório de máscara facial ou óculos de proteção durante a transferência de amostras congeladas para dentro ou para fora do tanque de nitrogênio líquido. Isso visa mitigar o risco de ferimentos decorrentes de possíveis explosões dos criotubos durante a remoção, o que pode resultar na projeção de fragmentos pontiagudos.
- Warranty
Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.
Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.
- Material Transfer Agreement required
- Yes