Ir diretamente para o conteúdo
MHCC-97H
Tecido
Fígado
Doença
Carcinoma hepatocelular do adulto
Sinónimos
MHCC 97-H, MHCC97-H, MHCC97H

Documentos

MHCC-97H

Cell line · Número do produto 305442

The MHCC-97H cell line is a human hepatocellular carcinoma (HCC) model with a high metastatic potential. It was established from the MHCC97 parental line,...

€430.00sem impostos nem portes de envio
Em stock
Lote
Recomendado (lote mais recente)
  • CoA
1

01Informações gerais

Descrição

A linha celular MHCC-97H é um modelo de carcinoma hepatocelular humano (CHC) com elevado potencial metastático. Foi estabelecida a partir da linha parental MHCC97, derivada de um paciente do sexo masculino com CHC associado à infecção pelo vírus da hepatite B (VHB). A MHCC-97H tem sido amplamente utilizada em estudos com foco na metástase do cancro, particularmente porque demonstra consistentemente metástases pulmonares espontâneas após implante ortotópico em modelos murinos. Esta característica torna-a um recurso valioso para explorar os mecanismos de progressão e metástase do HCC.

As células MHCC-97H exibem uma morfologia epitelial e possuem características genéticas e moleculares essenciais que contribuem para o seu comportamento metastático agressivo. A linha é conhecida pela sua regulação positiva das metaloproteinases da matriz (MMP-2 e MMP-9), que facilitam a degradação da matriz extracelular e promovem capacidades invasivas. Análises proteómicas identificaram várias proteínas expressas de forma diferenciada em MHCC-97H em comparação com a sua contraparte de baixa metástase MHCC-97L, incluindo níveis elevados de piruvato quinase M2 e proteína A4 de ligação ao cálcio S100. Essas descobertas destacam a sua utilidade no estudo das vias moleculares que regem a metástase.

A MHCC-97H é utilizada em investigação pré-clínica para testar estratégias terapêuticas direcionadas para a metástase. Modelos in vivo envolvendo esta linha celular permitem aos investigadores investigar a eficácia de tratamentos destinados a mitigar a disseminação metastática, especialmente para os pulmões. Além disso, o MHCC-97H auxilia no desenvolvimento de biomarcadores para prever a agressividade do CHC e no estudo do papel do microambiente tumoral na metástase. Estas aplicações sublinham a sua importância crítica no avanço da nossa compreensão da biologia do carcinoma hepatocelular.

Tecido
Fígado
Doença
Carcinoma hepatocelular do adulto
Sinónimos
  • MHCC 97-H
  • MHCC97-H
  • MHCC97H

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Masculino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
2

03Características

Tumorigénico
Elevado potencial metastático

04Identificadores

Referência
MHCC-97H (número de catálogo Cytion 305442)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_4972

05Expressão e suscetibilidade

Perfil mutacional
Mutação: BRD7, p.Glu277Glyfs*18 (c.830_831delAG); Mutação: KEAP1, p.Pro445Glnfs*13 (c.1334delC); Mutação: TP53, p.Glu51Ter (c.151G>T)
Vírus
Transformante: vírus da hepatite B (VHB)

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
DMEM, com: 4,5 g/L de glucose, com: 4 mM de L-Glutamina, com: 3,7 g/L de NaHCO3, com: 1,0 mM de piruvato de sódio (número de artigo Cytion 820300a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Densidade de sementeira
1,5 a 4 x 104 células/cm2
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
39 anos
Etnia
Chinês