Přejít na obsah
MHCC-97H
Tkáň
Játra
Nemoc
Hepatocelulární karcinom u dospělých
Synonyma
MHCC 97-H, MHCC97-H, MHCC97H

Dokumenty

MHCC-97H

Cell line · Číslo výrobku 305442

The MHCC-97H cell line is a human hepatocellular carcinoma (HCC) model with a high metastatic potential. It was established from the MHCC97 parental line,...

€430.00bez DPH a poštovného
Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie MHCC-97H je model lidského hepatocelulárního karcinomu (HCC) s vysokým metastatickým potenciálem. Byla vytvořena z rodičovské linie MHCC97, která pochází od mužského pacienta s HCC spojeným s infekcí virem hepatitidy B (HBV). MHCC-97H byla hojně využívána ve studiích zaměřených na metastázy rakoviny, zejména proto, že po ortotopické implantaci do myších modelů konzistentně vykazuje spontánní metastázy do plic. Tato vlastnost z ní činí cenný zdroj pro zkoumání mechanismů progrese a metastáz HCC.

Buňky MHCC-97H vykazují epiteliální morfologii a mají klíčové genetické a molekulární vlastnosti, které přispívají k jejich agresivnímu metastatickému chování. Tato linie je známá svou upregulací matrixových metaloproteináz (MMP-2 a MMP-9), které usnadňují degradaci extracelulární matrice a podporují invazivní schopnosti. Proteomické analýzy identifikovaly několik diferencovaně exprimovaných proteinů v MHCC-97H ve srovnání s jeho nízkometastatickým protějškem MHCC-97L, včetně zvýšených hladin pyruvátkinázy M2 a vápník-vázajícího proteinu A4 S100. Tyto nálezy zdůrazňují jejich užitečnost při studiu molekulárních drah řídících metastázy.

MHCC-97H se používá v preklinickém výzkumu k testování terapeutických strategií zaměřených na metastázy. In vivo modely zahrnující tuto buněčnou linii umožňují výzkumníkům zkoumat účinnost léčby zaměřené na zmírnění metastatického šíření, zejména do plic. MHCC-97H navíc pomáhá při vývoji biomarkerů pro predikci agresivity HCC a při studiu role mikroprostředí nádoru v metastázování. Tyto aplikace podtrhují jeho zásadní význam pro pokrok v našem porozumění biologii hepatocelulárního karcinomu.

Tkáň
Játra
Nemoc
Hepatocelulární karcinom u dospělých
Synonyma
  • MHCC 97-H
  • MHCC97-H
  • MHCC97H

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
2

03Charakteristika

Tumorogenní
Vysoký metastatický potenciál

04Identifikátory

Citace
MHCC-97H (katalogové číslo Cytion 305442)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_4972

05Exprese a náchylnost

Mutační profil
Mutace: BRD7, p.Glu277Glyfs*18 (c.830_831delAG); Mutace: KEAP1, p.Pro445Glnfs*13 (c.1334delC); Mutace: TP53, p.Glu51Ter (c.151G>T)
Viry
Transformant: virus hepatitidy B (HBV)

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutaminu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Hustota výsevu
1,5 až 4 x 104 buněk/cm2
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
39 let
Etnická příslušnost
Čínský