Siirry sisältöön
MHCC-97H
Kudos
Maksa
Sairaus
Aikuisten hepatosellulaarinen karsinooma
Synonyymit
MHCC 97-H, MHCC97-H, MHCC97H

Asiakirjat

MHCC-97H

Cell line · Tuotenumero 305442

The MHCC-97H cell line is a human hepatocellular carcinoma (HCC) model with a high metastatic potential. It was established from the MHCC97 parental line,...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

MHCC-97H-solulinja on ihmisen maksasyövän (HCC) malli, jolla on suuri metastaattinen potentiaali. Se on perustettu MHCC97-emolinjasta, joka on peräisin B-hepatiittiviruksen (HBV) infektioon liittyvästä HCC-potilaasta. MHCC-97H:ta on käytetty laajasti syövän metastaasien tutkimuksessa, erityisesti koska se osoittaa johdonmukaisesti spontaaneja keuhkometastaaseja ortotopisen implantoinnin jälkeen hiirimalleissa. Tämä ominaisuus tekee siitä arvokkaan resurssin HCC:n etenemisen ja metastaasien mekanismien tutkimisessa.

MHCC-97H-solut ovat epiteelimorfologisia ja niillä on keskeisiä geneettisiä ja molekyylisiä ominaisuuksia, jotka edistävät niiden aggressiivista metastaattista käyttäytymistä. Linja tunnetaan matriisimetalloproteinaasien (MMP-2 ja MMP-9) yliekspressiosta, mikä helpottaa solunulkoisen matriisin hajoamista ja edistää invasiivisia ominaisuuksia. Proteomianalyysit ovat tunnistaneet useita eri tavalla ilmentyviä proteiineja MHCC-97H:ssa verrattuna sen matalan metastaasipotentiaalin omaavaan vastineeseen MHCC-97L:ään, mukaan lukien kohonneet pitoisuudet pyruvaattikinaasi M2:ta ja S100-kalsiumia sitovaa proteiinia A4:ää. Nämä havainnot korostavat niiden hyödyllisyyttä metastaasien molekyylireittejä tutkittaessa.

MHCC-97H:ta käytetään prekliinisessä tutkimuksessa metastaaseja kohdentavien hoitostrategioiden testaamiseen. Tätä solulinjaa käyttävät in vivo -mallit antavat tutkijoille mahdollisuuden tutkia hoitojen tehoa metastaattisen leviämisen, erityisesti keuhkoihin, hillitsemisessä. Lisäksi MHCC-97H auttaa kehittämään biomarkkereita HCC:n aggressiivisuuden ennustamiseksi ja tutkimaan kasvaimen mikroympäristön roolia metastaasien muodostumisessa. Nämä sovellukset korostavat sen kriittistä merkitystä hepatosellulaarisen karsinooman biologian ymmärtämisen edistämisessä.

Kudos
Maksa
Sairaus
Aikuisten hepatosellulaarinen karsinooma
Synonyymit
  • MHCC 97-H
  • MHCC97-H
  • MHCC97H

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
2

03Ominaisuudet

Kasvaimia aiheuttava
Korkea metastaasipotentiaali

04Tunnisteet

Lähdeviite
MHCC-97H (Cytion-tuotenumero 305442)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_4972

05Ilmentyminen ja alttius

Mutaatioprofiili
Mutaatio: BRD7, p.Glu277Glyfs*18 (c.830_831delAG); Mutaatio: KEAP1, p.Pro445Glnfs*13 (c.1334delC); Mutaatio: TP53, p.Glu51Ter (c.151G>T)
Virukset
Transformantti: hepatiitti B -virus (HBV)

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM, w: 4,5 g/l glukoosia, w: 4 mM L-glutamiinia, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvaattia (Cytionin artikkelinumero 820300a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Kylvötiheys
1,5–4 x 104 solua/cm2
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
39 vuotta
Etnisyys
Kiinalainen