Prejsť na obsah
MHCC-97H
Tkanivo
Pečeň
Choroba
Hepatocelulárny karcinóm u dospelých
Synonymá
MHCC 97-H, MHCC97-H, MHCC97H

Dokumenty

MHCC-97H

Cell line · Číslo výrobku 305442

The MHCC-97H cell line is a human hepatocellular carcinoma (HCC) model with a high metastatic potential. It was established from the MHCC97 parental line,...

€430.00bez DPH a poštovného
Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunka MHCC-97H je model ľudského hepatocelulárneho karcinómu (HCC) s vysokým metastatickým potenciálom. Bola vytvorená z rodičovskej línie MHCC97, ktorá pochádza od mužského pacienta s HCC spojeným s infekciou vírusom hepatitídy B (HBV). MHCC-97H sa vo veľkej miere využíva v štúdiách zameraných na metastázy rakoviny, najmä preto, že konzistentne vykazuje spontánne metastázy v pľúcach po ortotopickej implantácii v myšacích modeloch. Táto vlastnosť z neho robí cenný zdroj pre skúmanie mechanizmov progresie a metastáz HCC.

Bunky MHCC-97H vykazujú epiteliálnu morfológiu a majú kľúčové genetické a molekulárne charakteristiky, ktoré prispievajú k ich agresívnemu metastatickému správaniu. Táto línia je známa svojou upreguláciou matrixových metaloproteináz (MMP-2 a MMP-9), ktoré uľahčujú degradáciu extracelulárneho matrixu a podporujú invazívne schopnosti. Proteomické analýzy identifikovali niekoľko diferencovane exprimovaných proteínov v MHCC-97H v porovnaní s jeho nízko metastatickým náprotivkom MHCC-97L, vrátane zvýšených hladín pyruvátkinázy M2 a S100 vápnik-viažuceho proteínu A4. Tieto zistenia zdôrazňujú ich užitočnosť pri štúdiu molekulárnych dráh riadiacich metastázy.

MHCC-97H sa používa v predklinickom výskume na testovanie terapeutických stratégií zameraných na metastázy. In vivo modely zahŕňajúce túto bunkovú líniu umožňujú výskumníkom skúmať účinnosť liečby zameranej na zmiernenie metastázovania, najmä do pľúc. Okrem toho MHCC-97H pomáha pri vývoji biomarkerov na predpovedanie agresivity HCC a pri štúdiu úlohy mikroprostredia nádoru v metastázovaní. Tieto aplikácie podčiarkujú jeho kritický význam pre pokrok v našom chápaní biológie hepatocelulárneho karcinómu.

Tkanivo
Pečeň
Choroba
Hepatocelulárny karcinóm u dospelých
Synonymá
  • MHCC 97-H
  • MHCC97-H
  • MHCC97H

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Muž
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
2

03Charakteristiky

Tumorigenický
Vysoký metastatický potenciál

04Identifikátory

Citácia
MHCC-97H (číslo katalógu Cytion 305442)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_4972

05Prejav a náchylnosť

Mutčný profil
Mutácia: BRD7, p.Glu277Glyfs*18 (c.830_831delAG); Mutácia: KEAP1, p.Pro445Glnfs*13 (c.1334delC); Mutácia: TP53, p.Glu51Ter (c.151G>T)
Vírusy
Transformant: vírus hepatitídy B (HBV)

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutamínu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Hustota výsevu
1,5 až 4 x 104 buniek/cm2
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Vek darcu
39 rokov
Etnická príslušnosť
Čínsky