Pāriet uz saturu
MHCC-97H
Audums
Aknas
Slimība
Pieaugušo hepatocelulārā karcinoma
Sinonīmi
MHCC 97-H, MHCC97-H, MHCC97H

Dokumenti

MHCC-97H

Cell line · Preces numurs 305442

The MHCC-97H cell line is a human hepatocellular carcinoma (HCC) model with a high metastatic potential. It was established from the MHCC97 parental line,...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

MHCC-97H šūnu līnija ir cilvēka aknu šūnu karcinoma (HCC) modelis ar augstu metastāzes potenciālu. Tā tika izveidota no MHCC97 vecāku līnijas, kas iegūta no vīrieša pacienta ar HCC, kas saistīts ar B hepatīta vīrusa (HBV) infekciju. MHCC-97H ir plaši izmantota pētījumos, kas vērsti uz vēža metastāzēm, jo īpaši tāpēc, ka tā konsekventi demonstrē spontānas plaušu metastāzes pēc ortotopiskas implantācijas peles modeļos. Šī īpašība padara to par vērtīgu resursu HCC progresēšanas un metastāžu mehānismu izpētē.

MHCC-97H šūnas uzrāda epitēlija morfoloģiju un piemīt galvenās ģenētiskās un molekulārās īpašības, kas veicina to agresīvo metastāzes uzvedību. Līnija ir pazīstama ar matriksa metaloproteāžu (MMP-2 un MMP-9) regulācijas paaugstināšanos, kas veicina ekstracelulārā matriksa degradāciju un invazīvās spējas. Proteomikas analīzes ir identificējušas vairākas diferencēti ekspresētas proteīnas MHCC-97H salīdzinājumā ar tā mazmetastātisko analogu MHCC-97L, tostarp paaugstinātu piruvāta kināzes M2 un S100 kalcija saistošā proteīna A4 līmeni. Šie atklājumi uzsver to lietderību metastāzes molekulāro ceļu pētīšanā.

MHCC-97H tiek izmantota pirmsklīniskajos pētījumos, lai testētu terapeitiskās stratēģijas, kas vērstas uz metastāzēm. In vivo modeļi, kuros izmanto šo šūnu līniju, ļauj pētniekiem izpētīt ārstēšanas metožu efektivitāti, kas vērstas uz metastāžu izplatības mazināšanu, īpaši plaušās. Turklāt MHCC-97H palīdz attīstīt biomarķierus, lai prognozētu HCC agresivitāti, un pētīt audzēja mikroapvidus lomu metastāzēs. Šīs lietojumprogrammas uzsver tā kritisko nozīmi, lai padziļinātu mūsu izpratni par hepatocelulārā karcinoma bioloģiju.

Audums
Aknas
Slimība
Pieaugušo hepatocelulārā karcinoma
Sinonīmi
  • MHCC 97-H
  • MHCC97-H
  • MHCC97H

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
2

03Raksturlielumi

Tumorogēns
Augsts metastāzes potenciāls

04Identifikatori

Atsauce
MHCC-97H (Cytion kataloga numurs 305442)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_4972

05Pazīmes un uzņēmība

Mutāciju profils
Mutācija: BRD7, p.Glu277Glyfs*18 (c.830_831delAG); Mutācija: KEAP1, p.Pro445Glnfs*13 (c.1334delC); Mutācija: TP53, p.Glu51Ter (c.151G>T)
Vīrusi
Transformants: B hepatīta vīruss (HBV)

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM, w: 4,5 g/l glikozes, w: 4 mM L-glutamīna, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM nātrija piruvāta (Cytion izstrādājuma numurs 820300a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sēšanas blīvums
1,5 līdz 4 x 104 šūnas/cm2
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
39 gadi
Etniskā piederība
Ķīniešu