Przejdź do treści
MHCC-97H
Chusteczka
Wątroba
Choroba
Rak wątrobowokomórkowy u dorosłych
Synonimy
MHCC 97-H, MHCC97-H, MHCC97H

Dokumenty

MHCC-97H

Cell line · Numer produktu 305442

The MHCC-97H cell line is a human hepatocellular carcinoma (HCC) model with a high metastatic potential. It was established from the MHCC97 parental line,...

€430.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Linia komórkowa MHCC-97H jest modelem ludzkiego raka wątrobowokomórkowego (HCC) o wysokim potencjale przerzutowym. Została ona utworzona na podstawie linii macierzystej MHCC97, pochodzącej od mężczyzny cierpiącego na HCC związanego z zakażeniem wirusem zapalenia wątroby typu B (HBV). MHCC-97H jest szeroko wykorzystywana w badaniach dotyczących przerzutów nowotworowych, zwłaszcza że konsekwentnie wykazuje spontaniczne przerzuty do płuc po ortotopowym wszczepieniu w modelach mysich. Ta cecha sprawia, że jest ona cennym źródłem informacji dla badania mechanizmów progresji HCC i przerzutów.

Komórki MHCC-97H wykazują morfologię nabłonkową i posiadają kluczowe cechy genetyczne i molekularne, które przyczyniają się do ich agresywnego zachowania przerzutowego. Linia ta charakteryzuje się zwiększoną ekspresją metaloproteinaz macierzy (MMP-2 i MMP-9), które ułatwiają degradację macierzy zewnątrzkomórkowej i sprzyjają zdolnościom inwazyjnym. Analizy proteomiczne pozwoliły zidentyfikować kilka białek o zróżnicowanej ekspresji w MHCC-97H w porównaniu z jego odpowiednikiem o niskiej zdolności do przerzutów, MHCC-97L, w tym podwyższony poziom kinazy pirogronianowej M2 i białka wiążącego wapń S100 A4. Odkrycia te podkreślają ich przydatność w badaniu szlaków molekularnych regulujących przerzuty.

MHCC-97H jest wykorzystywana w badaniach przedklinicznych do testowania strategii terapeutycznych ukierunkowanych na przerzuty. Modele in vivo z wykorzystaniem tej linii komórkowej pozwalają badaczom badać skuteczność terapii mających na celu ograniczenie rozprzestrzeniania się przerzutów, zwłaszcza do płuc. Ponadto MHCC-97H pomaga w opracowywaniu biomarkerów do przewidywania agresywności HCC oraz w badaniu roli mikrośrodowiska guza w przerzutach. Zastosowania te podkreślają jego kluczowe znaczenie w pogłębianiu naszej wiedzy na temat biologii raka wątrobowokomórkowego.

Chusteczka
Wątroba
Choroba
Rak wątrobowokomórkowy u dorosłych
Synonimy
  • MHCC 97-H
  • MHCC97-H
  • MHCC97H

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Mężczyzna
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
2

03Cechy charakterystyczne

Nowotworotwórczy
Wysoki potencjał przerzutowy

04Identyfikatory

Źródło
MHCC-97H (numer katalogowy Cytion 305442)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_4972

05Ekspresja i podatność

Profil mutacji
Mutacja: BRD7, p.Glu277Glyfs*18 (c.830_831delAG); Mutacja: KEAP1, p.Pro445Glnfs*13 (c.1334delC); Mutacja: TP53, p.Glu51Ter (c.151G>T)
Wirusy
Transformant: wirus zapalenia wątroby typu B (HBV)

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
DMEM, w: 4,5 g/l glukozy, w: 4 mM L-glutaminy, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pirogronianu sodu (numer artykułu Cytion 820300a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Gęstość wysiewu
1,5 do 4 x 104 komórek/cm2
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Wiek dawcy
39 lat
Pochodzenie etniczne
Chiński