Przejdź do treści
Ogniwa Colo-320DM
Chusteczka
Okrężnica, typ C wg Dukesa
Choroba
Gruczolakorak jelita grubego
Synonimy
COLO_320DM, COLO-320-DM, COLO #320DM, COLO320/DM, COLO320-DM, COLO320DM, Colo320DM, COLO320 DM, COLO 320 DM, COLO 320 (DM), Colorado 320 Double Minutes

Dokumenty

Ogniwa Colo-320DM

Cell line · Numer produktu 300153

Linia komórkowa COLO-320DM to ludzka linia komórkowa gruczolakoraka jelita grubego, wyizolowana z ogniska przerzutowego u 55-letniej kobiety rasy kaukaskiej. Komórki te...

€430.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Linia komórkowa COLO-320DM jest ludzką linią komórkową gruczolakoraka jelita grubego utworzoną z przerzutów 55-letniej kobiety rasy kaukaskiej. Ta linia komórkowa wykazuje unikalne cechy, które są istotne dla badania przerzutów raka jelita grubego i działania środków chemioterapeutycznych. Na uwagę zasługuje wysoka ekspresja antygenu rakowo-płodowego (CEA), cennego biomarkera stosowanego w monitorowaniu i diagnostyce raka jelita grubego.

Komórki COLO-320DM są przylegające i mają morfologię podobną do nabłonka. Są one często wykorzystywane w badaniach koncentrujących się na mechanizmach komórkowych i molekularnych leżących u podstaw progresji raka jelita grubego i przerzutów. Ponadto, ze względu na ich spójne wzorce wzrostu i stabilność genetyczną w kolejnych pasażach, służą one jako wiarygodny model do eksperymentów in vitro badających biologię komórek nowotworowych, odpowiedź na leki i ekspresję genów związanych z rakiem jelita grubego.

Komórki te są również szczególnie interesujące dla badań genetycznych, zwłaszcza tych związanych ze szlakami zaangażowanymi w przerzuty i odpowiedź na chemioterapię. Naukowcy wykorzystują COLO-320DM do badania szlaków sygnałowych, odpowiedzi komórkowej na niedotlenienie oraz interakcji między komórkami nowotworowymi a mikrośrodowiskiem guza. Linia komórkowa odegrała kluczową rolę w rozwoju strategii terapeutycznych ukierunkowanych na mechanizmy przerzutowe specyficzne dla raka jelita grubego.

Chusteczka
Okrężnica, typ C wg Dukesa
Choroba
Gruczolakorak jelita grubego
Synonimy
  • COLO_320DM
  • COLO-320-DM
  • COLO #320DM
  • COLO320/DM
  • COLO320-DM
  • COLO320DM
  • Colo320DM
  • COLO320 DM
  • COLO 320 DM
  • COLO 320 (DM)
  • Colorado 320 Double Minutes

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Kobieta
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Zaokrąglone i załamujące światło
Nowotworotwórczy
Tak, u nagich myszy

04Identyfikatory

Źródło
COLO-320DM (numer katalogowy Cytion 300153)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0219

05Ekspresja i podatność

Izoenzymy
PGM1,1, PGM3, 2, G6PD, B, PEP-D, 1, 6PGD, A, ES-D, 1
Produkty
Serotonina, noradrenalina, epinefryna, hormon adrenokortykotropowy (ACTH), hormon przytarczyc

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
Ham's F12, w: 1,0 mM stabilnej glutaminy, w: 1,0 mM pirogronianu sodu, w: 1,1 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820600a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Gęstość wysiewu
1 x 104 komórek/cm2
Odnawianie płynów
Co 3 do 5 dni
Powrót do stanu sprzed rozmrożenia
Po rozmrożeniu umieść komórki na płytce w ilości 5 x 104 komórek/cm2 i pozostaw je na co najmniej 24 godziny, aby mogły się zregenerować po procesie zamrażania i przylgnąć do podłoża.
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Wiek dawcy
55 lat
Pochodzenie etniczne
Kaukaski