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Colo-320DM-Zellen
Gewebe
Dickdarm, Dukes' Typ C
Krankheit
Kolorektales Adenokarzinom
Synonyme
COLO_320DM, COLO-320-DM, COLO #320DM, COLO320/DM, COLO320-DM, COLO320DM, Colo320DM, COLO320 DM, COLO 320 DM, COLO 320 (DM), Colorado 320 Double Minutes

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Colo-320DM-Zellen

Cell line · Artikelnummer 300153

Die Zelllinie COLO-320DM ist eine menschliche Kolorektaladenokarzinom-Zelllinie, die aus der Metastasenstelle einer 55-jährigen kaukasischen Frau gewonnen wurde. Diese Zelle …

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die COLO-320DM-Zelllinie ist eine humane kolorektale Adenokarzinom-Zelllinie, die aus dem Metastasenherd einer 55-jährigen kaukasischen Frau stammt. Diese Zelllinie weist einzigartige Merkmale auf, die für die Untersuchung der Metastasierung von Darmkrebs und der Wirkung von Chemotherapeutika von Bedeutung sind. Sie zeichnet sich durch eine hohe Expression von karzinoembryonalem Antigen (CEA) aus, einem wertvollen Biomarker für die Überwachung und Diagnose von Darmkrebs.

COLO-320DM-Zellen sind adhärent und weisen eine epithelähnliche Morphologie auf. Sie werden häufig in der Forschung eingesetzt, die sich mit den zellulären und molekularen Mechanismen beschäftigt, die dem Fortschreiten und der Metastasierung von Darmkrebs zugrunde liegen. Darüber hinaus dienen sie aufgrund ihrer konstanten Wachstumsmuster und ihrer genetischen Stabilität über mehrere Passagen hinweg als zuverlässiges Modell für In-vitro-Experimente zur Erforschung der Biologie von Krebszellen, der Reaktion auf Medikamente und der Genexpression im Zusammenhang mit Dickdarmkrebs.

Diese Zellen sind auch für genetische Studien von besonderem Interesse, insbesondere für solche, die sich mit den an der Metastasierung und dem Ansprechen auf eine Chemotherapie beteiligten Stoffwechselwegen befassen. Forscher nutzen COLO-320DM zur Erforschung von Signalwegen, der zellulären Reaktion auf Hypoxie und der Wechselwirkungen zwischen Krebszellen und der Mikroumgebung des Tumors. Die Zelllinie war maßgeblich an der Entwicklung von therapeutischen Strategien beteiligt, die auf die metastatischen Mechanismen des kolorektalen Karzinoms abzielen.

Gewebe
Dickdarm, Dukes' Typ C
Krankheit
Kolorektales Adenokarzinom
Synonyme
  • COLO_320DM
  • COLO-320-DM
  • COLO #320DM
  • COLO320/DM
  • COLO320-DM
  • COLO320DM
  • Colo320DM
  • COLO320 DM
  • COLO 320 DM
  • COLO 320 (DM)
  • Colorado 320 Double Minutes

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Weiblich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Abgerundet und refraktär
Tumorauslösend
Ja, in Nacktmäusen

04Bezeichner

Quellenangabe
COLO-320DM (Cytion Katalognummer 300153)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_0219

05Expression und Anfälligkeit

Isoenzyme
PGM1,1, PGM3, 2, G6PD, B, PEP-D, 1, 6PGD, A, ES-D, 1
Produkte
Serotonin, Noradrenalin, Epinephrin, adrenocorticotropes Hormon (ACTH), Nebenschilddrüsenhormon

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
Ham's F12, w: 1,0 mM stabiles Glutamin, w: 1,0 mM Natriumpyruvat, w: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820600a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Aussaatdichte
1 x 104 Zellen/cm²
Flüssigkeitswechsel
Alle 3 bis 5 Tage
Erholung nach dem Auftauen
Nach dem Auftauen die Zellen mit einer Dichte von 5 x 104 Zellen/cm² ausplattieren und die Zellen mindestens 24 Stunden lang vom Gefrierprozess erholen und adhärieren lassen.
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Alter des Spenders
55 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Kaukasisch