Pāriet uz saturu
Colo-320DM šūnas
Audums
Divpadsmitpirkstu zarna, Dukes C tips
Slimība
Kolorektālā adenokarcinoma
Sinonīmi
COLO_320DM, COLO-320-DM, COLO #320DM, COLO320/DM, COLO320-DM, COLO320DM, Colo320DM, COLO320 DM, COLO 320 DM, COLO 320 (DM), Colorado 320 Double Minutes

Dokumenti

Colo-320DM šūnas

Cell line · Preces numurs 300153

COLO-320DM šūnu līnija ir cilvēka kolorektālās adenokarcinomas šūnu līnija, kas izveidota no 55 gadus vecas kaukāziešu izcelsmes sievietes metastāzes vietas. Šīs šūnas ...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

COLO-320DM šūnu līnija ir cilvēka kolorektālās adenokarcinomas šūnu līnija, kas iegūta no 55 gadus vecas baltādainas sievietes metastāzes. Šai šūnu līnijai piemīt unikālas īpašības, kas ir nozīmīgas kolorektālā vēža metastāžu un ķīmijterapeitisko līdzekļu iedarbības izpētei. Tā ir ievērojama ar augstu karcīnoembrionālā antigēna (CEA), kas ir vērtīgs biomarķieris, ko izmanto kolorektālā vēža uzraudzībā un diagnostikā, ekspresiju.

COLO-320DM šūnas ir adhēzijas ar epitēlijam līdzīgu morfoloģiju. Tās bieži izmanto pētījumos, kas vērsti uz kolorektālā vēža progresēšanas un metastāžu veidošanās pamatā esošo šūnu un molekulāro mehānismu izpēti. Turklāt, ņemot vērā to pastāvīgos augšanas modeļus un ģenētisko stabilitāti, tās kalpo kā uzticams modelis in vitro eksperimentiem, kuros pēta vēža šūnu bioloģiju, reakciju uz zālēm un gēnu ekspresiju, kas saistīta ar kolorektālo vēzi.

Šīs šūnas ir arī īpaši interesantas ģenētiskiem pētījumiem, jo īpaši tiem, kas saistīti ar metastāzēm un atbildes reakciju uz ķīmijterapiju saistītiem ceļiem. Pētnieki izmanto COLO-320DM, lai pētītu signālu ceļus, šūnu reakciju uz hipoksiju un mijiedarbību starp vēža šūnām un audzēja mikrovidi. Šī šūnu līnija ir bijusi noderīga, izstrādājot terapeitiskās stratēģijas, kas vērstas uz kolorektālajam karcinomam raksturīgiem metastāzes mehānismiem.

Audums
Divpadsmitpirkstu zarna, Dukes C tips
Slimība
Kolorektālā adenokarcinoma
Sinonīmi
  • COLO_320DM
  • COLO-320-DM
  • COLO #320DM
  • COLO320/DM
  • COLO320-DM
  • COLO320DM
  • Colo320DM
  • COLO320 DM
  • COLO 320 DM
  • COLO 320 (DM)
  • Colorado 320 Double Minutes

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Noapaļots un lauzts
Tumorogēns
Jā, kailām pelēm

04Identifikatori

Atsauce
COLO-320DM (Cytion kataloga numurs 300153)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_0219

05Pazīmes un uzņēmība

Izoenzīmi
PGM1,1, PGM3, 2, G6PD, B, PEP-D, 1, 6PGD, A, ES-D, 1
Produkti
Serotonīns, norepinefrīns, epinefrīns, adrenokortikotropais hormons (AKTH), parathormons

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
Hama F12, w: 1,0 mM stabils glutamīns, w: 1,0 mM nātrija piruvāts, w: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820600a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sēšanas blīvums
1 x 104 šūnas/cm2
Šķidruma atjaunošana
Ik pēc 3 līdz 5 dienām
Atgūšanās pēc atkusņa
Pēc atkausēšanas izkliedējiet šūnas uz šķīvja ar blīvumu 5 x 104 šūnas/cm2 un ļaujiet šūnām atgūties no sasaldēšanas procesa un pielipt vismaz 24 stundas.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
55 gadi
Etniskā piederība
Kaukāzietis