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K7M2 wt
Tecido
Ascite
Doença
Osteossarcoma de ratinho
Local da metástase
Pulmão
Sinónimos
K7M2-WT, K7M2

Documentos

K7M2 wt

Cell line · Número do produto 305188

A linha celular K7M2 wt deriva de um osteossarcoma murino e é frequentemente utilizada na investigação sobre o cancro, nomeadamente em estudos que investigam a via...

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01Informações gerais

Descrição

A linha celular K7M2 wt é derivada de um osteossarcoma murino e é frequentemente utilizada na investigação do cancro, particularmente para estudos que investigam a patogénese e a resposta terapêutica do osteossarcoma. Esta linha celular caracteriza-se pelo seu elevado potencial metastático, o que a torna um modelo inestimável para estudar os mecanismos subjacentes à metástase do cancro e para testar agentes anti-metastáticos. As células K7M2 wt apresentam uma morfologia epitelial típica e um crescimento robusto in vitro, o que facilita várias aplicações experimentais, incluindo estudos de expressão genética, rastreio de medicamentos e manipulação genética.

Os investigadores utilizam a linha celular K7M2 wt para explorar os processos moleculares e celulares envolvidos na progressão do osteossarcoma. Os estudos centram-se frequentemente nas vias de sinalização, como as vias Wnt/β-catenina e PI3K/AKT, que são cruciais para o crescimento e a metástase do tumor. O perfil genético das células K7M2 wt inclui alterações comuns no osteossarcoma, fornecendo informações sobre os factores genéticos desta malignidade. Além disso, esta linha celular é fundamental para o teste pré-clínico de novas abordagens terapêuticas, incluindo terapias direcionadas e imunoterapias, oferecendo uma plataforma para traduzir os resultados da investigação em potenciais aplicações clínicas.

Tecido
Ascite
Doença
Osteossarcoma de ratinho
Local da metástase
Pulmão
Aplicações
Investigação sobre o osteossarcoma; modelo tumoral singénico BALB/c; modelação da metástase; estudos das vias Wnt/β-catenina e PI3K/AKT; avaliação de fármacos antitumorais; testes de imunoterapia; biologia do complemento e dos recetores Fc
Sinónimos
  • K7M2-WT
  • K7M2

02Classificação

Organismo
Rato
Sexo
Feminino
Propriedades de crescimento
Aderente
Estatuto em matéria de OGM
Sem OGM
Detalhes sobre o estatuto dos OGM
No genetic modification; wildtype murine osteosarcoma cell line derived from BALB/c mice
Nível de biossegurança
1

03Características

Tipo de célula
Osteoblastos
Tumorigénico
Sim

04Identificadores

Referência
K7M2 wt (número de catálogo Cytion 305188)
Número de identificação fiscal do NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_V455

05Expressão e suscetibilidade

Receptores expressos
Complemento (C3), expresso, recetor Fc, IgG, alta afinidade I (Fcgr1), expresso

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
DMEM, com: 4,5 g/L de glucose, com: 4 mM de L-Glutamina, com: 3,7 g/L de NaHCO3, com: 1,0 mM de piruvato de sódio (número de artigo Cytion 820300a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Raça / subespécie
BALB/c
Idade do dador
895 dias