บทนำ

The เซลล์ U2OS สายเซลล์ — ซึ่งยังเป็นที่รู้จักในชื่อ U-2 OS, U-2OS, U-2-OS, U2-OS, U20-S, U20S และ 2T — เป็นหนึ่งในสายเซลล์มะเร็งของมนุษย์ที่ก่อตั้งขึ้นตั้งแต่แรกเริ่มและยังคงถูกใช้งานอย่างแพร่หลายจนถึงปัจจุบัน สายเซลล์นี้ถูกสร้างขึ้นในช่วงกลางทศวรรษ 1960 จากมะเร็งกระดูกชนิดออสทีโอซาร์โคมาที่แยกตัวในระดับปานกลางของกระดูกหน้าแข้ง และได้รับการอธิบายครั้งแรกโดย Pontén และ Saksela ในปี 1967 [1]. การก่อตั้งเซลล์ไลน์นี้ได้มอบแบบจำลองที่มีลักษณะเป็นเซลล์เยื่อบุผิว (epithelial morphology) ซึ่งสามารถควบคุมได้ง่ายและยึดติดกับพื้นผิวได้ ให้แก่นักวิจัย เพื่อศึกษาเนื้องอกกระดูก ชีววิทยาของเนื้องอก และชีววิทยาเซลล์ขั้นพื้นฐาน ในช่วงหลายทศวรรษต่อมา U2OS ได้กลายเป็นรากฐานสำคัญของการวิจัยการซ่อมแซม DNA การค้นหายาสำหรับมะเร็งกระดูก (osteosarcoma) การวิเคราะห์วงจรเซลล์ และการวิเคราะห์โปรไฟล์จีโนม สายเซลล์นี้ยังคงรักษาฟังก์ชัน TP53 แบบไวลด์ไทป์ — ซึ่งเป็นสิ่งที่พบได้ค่อนข้างน้อยในสายเซลล์มะเร็งกระดูก — ทำให้มันมีคุณค่าเป็นพิเศษสำหรับการศึกษาเส้นทางที่ขึ้นอยู่กับ p53 การตอบสนองต่อความเสียหายของ DNA และการควบคุมจังหวะชีวภาพ ด้วยชุดข้อมูลโอมิกส์ที่กว้างขวางและงานวิจัยที่เผยแพร่แล้วนับร้อยชิ้น U2OS ยังคงเป็นหนึ่งในแบบจำลองมะเร็งในมนุษย์ที่ได้รับการอ้างอิงและศึกษาลักษณะมากที่สุด ซึ่งนักวิทยาศาสตร์ด้านชีวการแพทย์สามารถใช้ประโยชน์ได้

จุดสำคัญที่ควรจดจำ

• U2OS (หมายเลข CVCL_0042 ใน Cellosaurus) เป็นสายเซลล์มะเร็งกระดูกชนิดออสทีโอซาร์โคมาของมนุษย์ ที่ถูกสร้างขึ้นในช่วงกลางทศวรรษ 1960 จากเนื้อเยื่อกระดูกหน้าแข้ง และได้รับการอธิบายครั้งแรกในปี 1967.
• สายเซลล์นี้มีความเป็น TP53 แบบไวลด์ไทป์ ทำให้มันเป็นแบบจำลองที่ได้รับความนิยมมากที่สุดสำหรับการศึกษาวงจรเซลล์ที่ขึ้นอยู่กับ p53 และความเสียหายของ DNA
• เซลล์ U2OS เติบโตเป็นชั้นเดียวที่ติดกับพื้นผิวและมีรูปร่างคล้ายเซลล์เยื่อบุผิว โดยมีเวลาเพิ่มจำนวนเป็นสองเท่าที่รายงานไว้ประมาณ 25–30 ชั่วโมง (DSMZ ACC-785) ถึง 36 ชั่วโมง (Mohseny et al.)
• สายเซลล์นี้ได้รับการวิเคราะห์อย่างละเอียดในชุดข้อมูลด้านจีโนมิกส์ ทรานสคริปโตมิกส์ โปรตีโอมิกส์ และการคัดกรองยา รวมถึงใน Cancer Cell Line Encyclopedia
• U2OS ได้ทำหน้าที่เป็นแพลตฟอร์มสำหรับสายเซลล์ที่ได้รับการดัดแปลงทางวิศวกรรมหลายร้อยสาย ซึ่งถูกนำมาใช้ในการทดสอบ GPCR การศึกษาตัวรายงานแสงฟลูออเรสเซนต์ และการคัดกรองฟังก์ชันโดยใช้เทคโนโลยี CRISPR
• การวิจัยในปัจจุบันครอบคลุมการค้นพบยาสำหรับโรคมะเร็งกระดูก (osteosarcoma) กลไกการซ่อมแซม DNA ชีววิทยาของวงจรวัน-คืน (circadian biology) กระบวนการเอนโดไซโทซิส (endocytosis) และการปรับเปลี่ยนกระบวนการเมแทบอลิซึม (metabolic reprogramming)

U2OS คืออะไร?

U2OS ได้มาจากกระดูกหน้าแข้งของผู้ป่วยหญิงอายุ 15 ปี ที่เป็นโรคมะเร็งกระดูกชนิดออสทีโอซาร์โคมา สายพันธุ์นี้ถูกสร้างขึ้นในช่วงกลางทศวรรษ 1960 และได้รับการรายงานครั้งแรกโดย Pontén และ Saksela ในปี 1967 [1], และต่อมาได้ถูกจัดเข้าในรายชื่อสายเซลล์มะเร็งของมนุษย์เพื่อใช้ในการวิจัยโรคมะเร็ง [2]. การวิเคราะห์ลักษณะทางภูมิคุ้มกันในขั้นต้นได้ยืนยันว่าไม่มีการปนเปื้อนของเซลล์ HeLa [3] และกำหนดโปรไฟล์แอนติเจน HLA ของสายเซลล์ [4] [5]. สายพันธุ์นี้เจริญเติบโตเป็นชั้นโมโนเลเยอร์ที่ติดแน่นกับพื้นผิว โดยมีลักษณะทางสัณฐานวิทยาแบบเซลล์เยื่อบุ เวลาการเพิ่มจำนวนที่รายงานมีความแตกต่างกันตามแหล่งข้อมูล: ประมาณ 25–30 ชั่วโมง ตามข้อมูลในแคตตาล็อกของ DSMZ (ACC-785) และประมาณ 36 ชั่วโมง ตามผลการวิเคราะห์คุณสมบัติเชิงหน้าที่ของ Mohseny และคณะ [13] [61]. สายเซลล์นี้ถูกจัดประเภทเป็นสายเซลล์ออสทีโอซาร์โคมาที่มีการแยกตัวในระดับปานกลาง ซึ่งยังคงมี TP53 แบบไวลด์ไทป์ ซึ่งทำให้มันแตกต่างจากสายเซลล์ออสทีโอซาร์โคมาอื่น ๆ เช่น Saos-2 ที่ไม่มีการแสดงออกของ p53 เลย การวิเคราะห์เปรียบเทียบแสดงให้เห็นว่าเซลล์ U2OS ให้ผลลบต่อตัวบ่งชี้เซลล์สร้างกระดูกแบบคลาสสิกส่วนใหญ่ ซึ่งสะท้อนถึงสภาพที่ยังไม่แยกตัวเต็มที่เมื่อเทียบกับสายเซลล์ออสทีโอซาร์โคมาที่พัฒนาแล้ว [6]. สายพันธุ์นี้มีความเสถียรของไมโครแซทเทลไลต์ (MSS) และมีตัวแปรตัดสั้นแบบเฮเทอโรไซกัสของยีน PPM1D (p.Arg458Ter, c.1372C>T) ซึ่งถูกบันทึกไว้สำหรับเซลล์ U2OS ใน Cellosaurus และ DepMap (ACH-000364) [61]. ผลทางหน้าที่ของกลุ่มอัลลีล PPM1D ที่ถูกตัดส่วนปลาย C และมีความสามารถเพิ่มขึ้นนี้ — ซึ่งก่อให้เกิดความผิดปกติในจุดตรวจสอบ G1 ที่ขึ้นอยู่กับ p53 — ได้ถูกอธิบายโดย Kleiblova และคณะ [7].

การวิเคราะห์โครโมโซมโดยวิธีการไฮบริดิเซชันจีโนมเปรียบเทียบ (CGH) ได้เปิดเผยถึงความผิดปกติของจีโนมที่ซับซ้อนในสายเซลล์มะเร็งกระดูกหลายสาย รวมถึงสาย U2OS โดยมีค่าเฉลี่ย 20.8 ความผิดปกติต่อสายเซลล์ (ช่วง 10–31) [8]. การวิเคราะห์ CGH แบบอาร์เรย์ความละเอียดสูงได้ระบุความผิดปกติระดับไมโครที่ซ่อนเร้นเพิ่มเติม และ U-2 OS มีจำนวนเหตุการณ์ดังกล่าวน้อยที่สุดในบรรดาสายพันธุ์ออสทีโอซาร์โคมาทั้งสี่สายพันธุ์ที่ได้รับการตรวจสอบ — 6 กรณี ซึ่งเป็นอัตราการเกิดต่ำที่สุดในชุดตัวอย่าง — ซึ่งสอดคล้องกับพื้นหลัง TP53 แบบไวลด์ไทป์ของมัน ในขณะที่ SAOS-2 ที่มี TP53 กลายพันธุ์มี 17 กรณี [9]. การวิเคราะห์ลักษณะทางโมเลกุลที่ดำเนินการภายในกลุ่ม EuroBoNeT ได้ยืนยันว่า U2OS มีสถานะ TP53 แบบไวลด์ไทป์ และระบุว่าการขาดหายไปของยีน CDKN2A แบบโฮโมไซกัสเป็นเหตุการณ์ที่พบบ่อยที่สุดเพียงอย่างเดียวในกลุ่มตัวอย่างเนื้องอกกระดูกทั้งหมด (15 จาก 36 สายพันธุ์) ซึ่งเกี่ยวข้องโดยตรงกับการขาดโปรตีน p16; ไม่มีการบันทึกการขาดหายของ CDKN2A สำหรับ U2OS เองใน Cellosaurus [10] [61]. การจัดเรียงใหม่ของยีน p53 ได้ถูกบันทึกไว้ในมะเร็งเนื้อกระดูกชนิดปฐมภูมิและสายเซลล์ที่เกี่ยวข้อง [11], และมีการแสดงให้เห็นว่า การแสดงออกมากเกินไปของ p53 แบบไวลด์ไทป์ สามารถยับยั้งการเจริญเติบโตของเซลล์ในเซลล์มะเร็งกระดูกได้ [12], ซึ่งเน้นย้ำถึงคุณค่าของแบบจำลอง U2OS สำหรับการวิจัยเกี่ยวกับเส้นทาง p53 การศึกษาด้านหน้าที่ได้ยืนยันว่าเซลล์ U2OS สามารถก่อตัวเป็นก้อนมะเร็งในร่างกายจริง (in vivo) หลังจากฉีดใต้ผิวหนัง ซึ่งยืนยันถึงประโยชน์ของเซลล์เหล่านี้ในฐานะแบบจำลองมะเร็งกระดูกที่เป็นตัวแทน [13].

ข้อมูลเกี่ยวกับการเพาะเลี้ยงเซลล์

ข้อดีของเซลล์ U2OS

หนึ่งในข้อได้เปรียบที่สำคัญที่สุดของ U2OS คือการรักษา TP53 แบบไวลด์ไทป์ไว้ คุณสมบัตินี้ทำให้สายเซลล์นี้เหมาะอย่างยิ่งสำหรับการศึกษากระบวนการที่ขึ้นอยู่กับ p53 รวมถึงจุดตรวจสอบความเสียหายของ DNA การหยุดวงจรเซลล์ การตายของเซลล์แบบอะพอพโทซิส และการตอบสนองทางการถอดรหัสต่อความเครียดจากสารก่อกลายพันธุ์ เนื่องจากเซลล์ไลน์ของมะเร็งกระดูกและมะเร็งหลายชนิดมีการกลายพันธุ์ของ p53 U2OS จึงมีบทบาทสำคัญในฐานะแบบจำลองของเนื้องอกกระดูก ซึ่งสามารถประเมินเภสัชวิทยาของเส้นทาง p53 ได้โดยไม่ได้รับผลกระทบจากกลายพันธุ์ที่ทำให้สูญเสียหน้าที่ MDM2 antagonists แสดงให้เห็นว่าความแตกต่างนี้มีความสำคัญอย่างไร ในกลุ่มเซลล์ไลน์ซาร์โคมาต่าง ๆ สารต้าน MDM2 อย่าง Nutlin-3A ได้ทำให้ p53 เสถียร และกระตุ้นการถอดรหัสและการตายของเซลล์แบบอะพอพโทซิสที่ขึ้นอยู่กับ p53 อย่างมีประสิทธิภาพในเซลล์ไลน์ที่มีการเพิ่มจำนวนของ MDM2; ในสายเซลล์ที่มี TP53 แบบไวลด์ไทป์ แต่ไม่มีการเพิ่มจำนวนของ MDM2 — ซึ่งเป็นลักษณะที่พบใน U2OS — มีการสังเกตเห็นการตอบสนองบางส่วนต่อ Nutlin แต่ไม่มีการกระตุ้นให้เกิดการตายของเซลล์ [14]. ดังนั้น แบบจำลองมะเร็งกระดูกที่รักษาการทำงานของ p53 ได้ จึงช่วยให้สามารถวิเคราะห์ผลกระทบของสถานะ p53 และระดับ MDM2 ได้อย่างแยกกัน โดยไม่เกิดการสับสนกัน

เซลล์ U2OS เหมาะอย่างยิ่งสำหรับการสังเกตด้วยกล้องจุลทรรศน์เซลล์มีชีวิตและการทดสอบด้วยตัวบ่งชี้เรืองแสง เนื่องจากมีรูปร่างเซลล์แบบเยื่อบุผิวที่แบนและยึดติดกับพื้นผิว รวมถึงขนาดนิวเคลียสที่ค่อนข้างใหญ่ คุณสมบัติเหล่านี้ได้นำไปสู่การพัฒนาสายพันธุ์เซลล์ที่ถูกดัดแปลงทางพันธุกรรมหลายร้อยสายพันธุ์ — รวมถึง เซลล์ U2OS-CRISPR-NUP96-SNAP และตัวแปรของ PathHunter และ LanthaScreen จำนวนมาก ซึ่งทั้งหมดถูกจัดเข้าในแคตตาล็อกเป็นรายการลูกของ CVCL_0042 [61] — ที่ใช้ประโยชน์จากความสามารถในการถ่ายโอนยีนและความใสทางแสงของสายพันธุ์ต้นกำเนิด สายเซลล์นี้ยังเป็นส่วนหนึ่งของโครงการวิเคราะห์จีโนมและโปรตีโอมิกส์หลักหลายโครงการ รวมถึงโครงการ Cancer Dependency Map (DepMap ACH-000364 ซึ่งรวม Cancer Cell Line Encyclopedia) และแผงแผนที่เซลล์ Human Protein Atlas ซึ่งให้นักวิจัยมีชุดข้อมูลพื้นหลังที่สมบูรณ์เพื่อใช้เป็นเกณฑ์เปรียบเทียบผลการทดลอง [15] [16] [61].

สายเซลล์นี้ได้พิสูจน์แล้วว่ามีความเหมาะสมอย่างยิ่งสำหรับการปรับเปลี่ยนทางพันธุกรรม โดยสนับสนุนการถ่ายโอนยีนแบบคงที่และชั่วคราว การแก้ไขยีนด้วย CRISPR-Cas9 การลดการแสดงออกของยีนด้วย RNAi และการถ่ายโอนยีนด้วยไวรัส ความสามารถในการบูรณาการโครงสร้างจากภายนอกได้อย่างมีประสิทธิภาพ ร่วมกับอัตราการเจริญเติบโตที่มั่นคง ทำให้สายเซลล์นี้กลายเป็นเครื่องมือหลักที่ใช้งานได้จริงสำหรับแพลตฟอร์มการคัดกรองแบบปริมาณสูง ข้อมูล Cell Painting ของยา 5,259 ชนิดใน U2OS ถือเป็นหนึ่งในชุดข้อมูลอ้างอิงทางสัณฐานวิทยาที่ใหญ่ที่สุดในสาขาชีวเคมี และได้ถูกรวมกับข้อมูลโปรตีโอมิกส์แบบความร้อนเพื่อวิเคราะห์กลไกการทำงานของสารประกอบในระดับใหญ่ [17]. ความกว้างขวางในการประยุกต์ใช้ — ที่ครอบคลุมทั้งชีววิทยาของมะเร็งกระดูก ชีววิทยาเซลล์พื้นฐาน และการค้นพบยา — เป็นปัจจัยหลักที่ทำให้ U2OS ยังคงได้รับความนิยมมาจนถึงทุกวันนี้

ข้อจำกัดของเซลล์ U2OS

แม้ U2OS จะมีจุดแข็งหลายประการ แต่ก็มีโครงสร้างโครโมโซมที่ซับซ้อน ซึ่งอาจทำให้การตีความผลลัพธ์เป็นไปได้ยาก การวิเคราะห์การไฮบริดิเซชันจีโนมเปรียบเทียบในสายเซลล์ออสทีโอซาร์โคมา 8 สาย พบว่ามีการผิดปกติของโครโมโซมเฉลี่ย 20.8 ครั้งต่อสายเซลล์ โดย U2OS แสดงการเพิ่มและลดจำนวนโครโมโซมในหลายบริเวณ [8]. การกลายพันธุ์แบบเฮเทอโรไซกัสที่ทำให้เกิดการเพิ่มหน้าที่ของ PPM1D แบบตัดสั้น (p.Arg458Ter) ส่งผลให้จุดตรวจสอบ G1 ที่ขึ้นอยู่กับ p53 ทำงานผิดปกติ ซึ่งหมายความว่า แม้ p53 จะยังคงมีอยู่และเป็นแบบไวลด์ไทป์ในระดับลำดับกรดอะมิโน แต่กระบวนการส่งสัญญาณในขั้นตอนถัดไปของมันถูกลดทอนลงบางส่วน [7] [61]. นักวิจัยที่ศึกษาด้านเภสัชวิทยาของเส้นทาง p53 อย่างละเอียดควรพิจารณาตัวปรับนี้เมื่อตีความผลการวิจัย

ในฐานะสายเซลล์ออสทีโอซาร์โคมาที่มีการแยกตัวในระดับปานกลาง U2OS ไม่สามารถจำลองลักษณะทางฟีโนไทป์ของเซลล์สร้างกระดูกที่เจริญเต็มที่ได้อย่างถูกต้อง การวิเคราะห์ด้วยวิธีอิมมูโนไซโตเคมีแสดงให้เห็นว่าสายเซลล์นี้ให้ผลลบต่อตัวบ่งชี้เซลล์สร้างกระดูกส่วนใหญ่ ซึ่งแตกต่างจากเซลล์ที่เจริญเต็มที่กว่า เซลล์ SaOS-2 บรรทัด [6]. ดังนั้น การศึกษาที่ต้องการตัวบ่งชี้การแยกตัวเป็นเซลล์สร้างกระดูกที่เชื่อถือได้หรือการตอบสนองต่อการสร้างแร่ธาตุ อาจพบว่า U2OS ไม่เป็นตัวแทนที่สะท้อนชีววิทยาของเซลล์สร้างกระดูกในระยะปลายได้อย่างถูกต้อง นอกจากนี้ เช่นเดียวกับสายเซลล์ที่ได้รับการพัฒนาแล้วทั้งหมด U2OS ได้สะสมการปรับตัวจากกระบวนการนอกร่างกาย (ex vivo) ซึ่งอาจไม่สะท้อนชีววิทยาของเนื้องอกต้นแบบได้อย่างถูกต้อง โดยเฉพาะอย่างยิ่งในด้านการปฏิสัมพันธ์กับสโตรมาและโครงสร้างสามมิติ [13].

การเพาะเลี้ยงเซลล์ U2OS ในระยะยาว เช่นเดียวกับสายเซลล์อื่น ๆ มีความเสี่ยงต่อการเปลี่ยนแปลงทางพันธุกรรมและความแปรปรวนทางฟีโนไทป์ระหว่างซับโคลน จึงแนะนำอย่างยิ่งให้ทำการตรวจสอบความถูกต้องโดยใช้การวิเคราะห์โปรไฟล์ของลำดับซ้ำสั้นแบบแทนเดม (STR) เพื่อรับประกันความสามารถในการทำซ้ำผลการทดลองระหว่างห้องปฏิบัติการต่าง ๆ [18]. นักวิจัยควรทราบด้วยว่า U2OS แสดงออกเพียงส่วนหนึ่งของโปรตีนในแมทริกซ์นอกเซลล์ของเซลล์สร้างกระดูกแบบคลาสสิก ซึ่งทำให้การใช้งานเซลล์นี้เป็นตัวแทนในการศึกษาสภาพแวดล้อมจุลภาคของกระดูกที่พึ่งพาคอลลาเจน I หรือผลิตภัณฑ์อื่น ๆ ของเซลล์สร้างกระดูกที่เจริญเต็มที่ ถูกจำกัด

ดูข้อมูลจำเพาะทั้งหมดและสั่งซื้อ

การใช้งาน

การค้นพบยาและการคัดกรองการรักษาสำหรับมะเร็งกระดูกชนิดออสทีโอซาร์โคมา

U2OS เป็นเซลล์แบบหลักที่ใช้ในการประเมินสารประกอบใหม่และสารที่ปรับเปลี่ยนวัตถุประสงค์เพื่อต่อสู้กับมะเร็งกระดูก งานวิจัยต่าง ๆ ได้ศึกษาฤทธิ์ต้านมะเร็งของสารธรรมชาติและสารสังเคราะห์หลากหลายชนิดในเซลล์สายพันธุ์นี้ Curcin C, โปรตีนประเภท I ที่ทำให้ไรโบโซมไม่ทำงาน ซึ่งได้จากเมล็ด Jatropha curcas ที่ผ่านกระบวนการงอกแล้ว ได้แสดงให้เห็นว่าสามารถยับยั้งการเพิ่มจำนวนของเซลล์ U2OS ผ่านกระบวนการอะพอพโทซิสที่สื่อโดย ROS, ออโตฟาจี และการหยุดการแบ่งเซลล์ในทั้งเฟส S และ G2/M โดยผลดังกล่าวเกิดจากการกระตุ้นสัญญาณ JNK พร้อมกับการยับยั้งทางสัญญาณ ERK; สารจับ ROS อย่าง NAC และสารยับยั้ง JNK อย่าง SP600125 ต่างก็ลดทอนการตอบสนองนี้ลง ซึ่งสนับสนุนกลไกที่เสนอไว้ [53]. การศึกษาต่อแสดงให้เห็นว่า ความมีประสิทธิภาพที่สูงขึ้นของ Curcin C เมื่อเทียบกับ Curcin ในเซลล์ U2OS สามารถอธิบายได้ส่วนใหญ่จากกระบวนการเอนโดไซโทซิสที่ขึ้นอยู่กับคลัทรีนและถูกควบคุมโดย LRP1 ซึ่ง Curcin C สามารถเข้าถึงได้ แต่ Curcin ไม่สามารถเข้าถึงได้

Aloperine ซึ่งเป็นสารอัลคาลอยด์จากธรรมชาติ ได้ยับยั้งการเพิ่มจำนวนและการสร้างคลอนของเซลล์มะเร็งกระดูก MG-63 และ U2OS ทั้งสองชนิด กระตุ้นการตายแบบอะพอพโทซิส ซึ่งได้รับการยืนยันโดยวิธีโฟลว์ไซโตเมทรี และยับยั้งการรุกรานในแบบทดสอบ scratch และ transwell พร้อมกับการลดการแสดงออกของ MMP-2, MMP-9, PI3K และ p-AKT1 [54] การศึกษานี้ได้เน้นย้ำถึงหลายเส้นทางที่บรรจบกัน ซึ่งสารอัลคาลอยด์ธรรมชาติสามารถขัดขวางการเจริญเติบโตและศักยภาพการแพร่กระจายได้พร้อมกัน นอกจากนี้ สเตวิโอล (steviol) ซึ่งเป็นเมแทโบไลต์ของสารให้ความหวานธรรมชาติ ยังแสดงให้เห็นว่าสามารถยับยั้งการเพิ่มจำนวนของเซลล์ U2OS ได้ในลักษณะที่ขึ้นอยู่กับปริมาณและเวลา โดยการศึกษากลไกแสดงให้เห็นถึงการหยุดวงจรเซลล์ในระยะ G1 และเส้นทางการตายของเซลล์แบบอะพอพโทซิสในไมโทคอนเดรีย ซึ่งบ่งชี้ได้จากอัตราส่วน Bax/Bcl-2 ที่เพิ่มขึ้น [55] — ผลการศึกษาเหล่านี้ทำให้เมตาโบไลต์ธรรมชาติกลายเป็นตัวเลือกที่มีศักยภาพสำหรับการวิจัยด้านการป้องกันมะเร็งกระดูกด้วยเคมีบำบัด

กรดแทนนิกช่วยเพิ่มผลพิษต่อเซลล์ของซิสพลาตินในเซลล์ U2OS แต่การปฏิสัมพันธ์นี้ขึ้นอยู่กับสัดส่วนอย่างชัดเจน: พบการเสริมฤทธิ์ที่อัตราส่วนกรดแทนนิกต่อซิสพลาติน 90:10 และ 85:15 ในขณะที่อัตราส่วน 75:25 และ 50:50 มีฤทธิ์ต้านกัน และกรดแทนนิกเพียงอย่างเดียวไม่ยับยั้งเซลล์ออสทีโอบลาสต์ปกติ hFOB 1.19 ได้อย่างมีนัยสำคัญ [56]. ดังนั้น กลยุทธ์การเพิ่มความไวต่อยาที่ใช้โพลีฟีนอลเป็นพื้นฐาน จึงต้องขึ้นอยู่กับการปรับอัตราส่วนปริมาณอย่างระมัดระวัง แทนที่จะเป็นการให้ยาพร้อมกันแบบง่ายๆ กรดกัลลิก (Gallic acid) ก็ช่วยเพิ่มประสิทธิภาพการตายของเซลล์ที่เกิดจาก olaparib และลดความต้านทานต่อ olaparib ที่เกิดขึ้นในเซลล์ U2OS และสายพันธุ์ที่ต้านทาน olaparib (U2OS-PIR) โดยยับยั้งการสร้างหลอดเลือดและปรับการทำงานของ cPARP, Bcl-2 และ Bax [57] ซึ่งช่วยขยายขอบเขตของการผสมผสานสารธรรมชาติที่สามารถนำไปใช้ในการวิจัยการรักษาโรคออสทีโอซาร์โคมาได้ Lenvatinib, ยับยั้งเอนไซม์หลายชนิดที่ได้รับการอนุมัติแล้ว, ได้แสดงให้เห็นว่าสามารถก่อให้เกิดการเปลี่ยนแปลงที่เกี่ยวข้องกับ ferroptosis ในเซลล์ U2OS และ 143B ผ่านแกน p-STAT3/p53/xCT ซึ่งเปิดเผยกลไกใหม่ที่สารนี้อาจยับยั้งการลุกลามของมะเร็งกระดูกได้เกินกว่าบทบาทการยับยั้งการสร้างหลอดเลือดตามแบบแผน [19]. การรักษาด้วยภูมิคุ้มกันที่ใช้เซลล์นักฆ่าธรรมชาติ (Natural killer cell) ได้รับการประเมินต่อกลุ่มเซลล์มะเร็งกระดูกหลายสายพันธุ์ รวมถึง U2OS โดยที่การแสดงออกของลิแกนด์ NKG2D มีความสัมพันธ์กับประสิทธิภาพการฆ่าเซลล์โดยเซลล์นักฆ่าธรรมชาติ (NK) และอินเตอร์ลิวคิน-2 ในรูปแบบละอองลอยช่วยปรับปรุงกิจกรรมของเซลล์นักฆ่าธรรมชาติที่เฉพาะเจาะจงต่ออวัยวะในร่างกาย [20].

การคัดกรองยาสำหรับซาร์โคมาในวงกว้าง ซึ่งครอบคลุมสายเซลล์มนุษย์ 63 สาย และสารประกอบทางมะเร็งกว่า 400 ชนิด ได้บันทึกโปรไฟล์ความไวต่อยาของ U2OS พร้อมข้อมูลการแสดงออกของยีนและไมโครอาร์เอ็นเอ ซึ่งให้ข้อมูลอ้างอิงทางฟาร์มาโคจีโนมิกส์ที่สมบูรณ์สำหรับสาขานี้ [21]. โครงการ Cancer Cell Line Encyclopedia ซึ่งเป็นโครงการสำคัญ ได้รวมข้อมูลการแสดงออกของยีน จำนวนสำเนา และข้อมูลการหาลำดับจากเซลล์สายพันธุ์เกือบ 950 สายพันธุ์ รวมถึง U2OS และเชื่อมโยงข้อมูลเหล่านี้กับโปรไฟล์ความไวต่อยา เพื่อระบุตัวบ่งชี้ชีวภาพที่สามารถทำนายการตอบสนองได้ [15]. การศึกษาภาพรวมทางฟาร์มาโคจีโนมิกส์ที่ตามมาได้แผนที่ความสัมพันธ์ระหว่างความไวต่อยาและการเปลี่ยนแปลงที่เกิดจากมะเร็งในสายเซลล์มากกว่า 1,000 สายที่มีข้อมูลอธิบายไว้ ซึ่งช่วยวางบริบทการตอบสนองของ U2OS ในบริบทกว้างของสาขาเนื้องอกวิทยา [22].

แกน miR-16-1-3p/MDM2/p53 ได้ปรากฏตัวขึ้นเป็นผู้ควบคุมสำคัญของผลลัพธ์การส่งสัญญาณ TGF-β1 ในมะเร็งกระดูก Xue et al. ได้แสดงให้เห็นว่า การแสดงออกเกินของ miR-16-1-3p ลดศักยภาพการเพิ่มจำนวนและการสร้างคลอนของเซลล์ U2OS อย่างมีนัยสำคัญ ในขณะที่การรวมกับการรักษาด้วย TGF-β ช่วยเพิ่มการหยุดในระยะ G1 อย่างมีนัยสำคัญ และเกือบจะกำจัดความสามารถในการเติบโตของก้อนมะเร็ง [23]. การศึกษาเดียวกันนี้ยังแสดงให้เห็นว่า miR-16-1-3p ยับยั้งการปรับโครงสร้างแอคตินที่ถูกกระตุ้นโดย TGF-β และการเปลี่ยนแปลงที่เกี่ยวข้องกับการเปลี่ยนผ่านจากเซลล์เยื่อบุสู่เซลล์เนื้อเยื่อเกี่ยวพัน (epithelial-mesenchymal transition), และการให้ร่วมกันยังเพิ่มความไวต่อซิสพลาตินในเซลล์ U2OS แบบไวลด์ไทป์ และลดปริมาตรก้อนเนื้องอกและการแพร่กระจายในแบบจำลองเยื่อโคริโออัลลันโทอิกของลูกไก่ ซึ่งให้ข้อมูลเชิงกลไกเกี่ยวกับวิธีที่ไมโครอาร์เอ็นเอชนิดนี้ยับยั้งแขนการส่งสัญญาณ TGF-β ที่ส่งเสริมการแพร่กระจาย ได้แสดงให้เห็นว่า vesicle นอกเซลล์ที่มาจากเซลล์สร้างกระดูก (OB-EVs) สามารถเปลี่ยนแปลงพฤติกรรมของเซลล์มะเร็งกระดูกแบบขึ้นอยู่กับสายพันธุ์เซลล์: ในเซลล์ U2OS พวกมันลดกิจกรรมเมแทบอลิก (1.30 เท่า) และการเพิ่มจำนวนเซลล์ (1.70 เท่า) พร้อมทั้งเพิ่มการตายแบบอะพอพโทซิส (1.15 เท่า) ในขณะที่การเพิ่มจำนวนเซลล์ MG-63 เพิ่มขึ้น 4.9 เท่า การวิเคราะห์โปรไฟล์ทรานสคริปโตมิกส์ที่ดำเนินการพร้อมกันในเซลล์ MNNG/HOS พบว่า มียีน 296 ตัวที่มีการแสดงออกแตกต่างกัน และผู้เขียนเสนอว่าการเคลื่อนย้าย miRNA เป็นกลไกที่อาจมีส่วนเกี่ยวข้อง ซึ่งยังจำเป็นต้องมีการตรวจสอบเชิงหน้าที่ [24] การปรับโปรแกรมการเผาผลาญในมะเร็งกระดูกได้ถูกศึกษาผ่านเทคนิคทรานสคริปโตมิกส์ระดับเซลล์เดี่ยว ซึ่งระบุ Stanniocalcin-2 (STC2) เป็นตัวควบคุมหลักของกระบวนการไกลโคไลซิส และได้รับการยืนยันทางหน้าที่ในเซลล์ MG-63 และ U2OS โดยใช้การวิเคราะห์ฟลักซ์นอกเซลล์ Seahorse [25].

การซ่อมแซม DNA การควบคุมวงจรเซลล์ และการตอบสนองต่อความเสียหายของ DNA

U2OS เป็นหนึ่งในแบบจำลองที่ใช้กันอย่างแพร่หลายที่สุดในการวิจัยการซ่อมแซม DNA ส่วนใหญ่เนื่องจากพื้นหลัง p53 แบบไวลด์ไทป์ของมัน ทำให้สามารถศึกษาการตอบสนองต่อความเสียหายที่ขึ้นอยู่กับ p53 ได้อย่างครบถ้วน การศึกษาในระดับจีโนมได้ทำแผนที่ทรานสคริปโตมของ U2OS ที่ถูกควบคุมโดยวงจรเซลล์ โดยระบุทรานสคริปต์ 2,140 ตัวที่แสดงออกเป็นช่วงๆ ซึ่งสอดคล้องกับยีนที่ไม่ซ้ำกัน 1,871 ยีน ในวงจรเซลล์ที่ซิงโครไนซ์หลายรอบ [52]. โดยการรวมข้อมูล ChIP-seq ของปัจจัยการถอดรหัส FOXM1 ในระยะ G2/M กับข้อมูล ChIP-seq ที่ได้เผยแพร่แล้วของ E2F1, E2F4, E2F6, GABPA และคอมเพล็กซ์ DREAM ผู้เขียนได้แสดงให้เห็นว่า FOXM1 กระตุ้นโปรโมเตอร์ของยีนในระยะ G2/M อย่างมีนัยสำคัญ แต่กระตุ้นโปรโมเตอร์ของยีนที่ถูกเหนี่ยวนำในระยะ S ได้เพียงเล็กน้อย และว่าชุดยีนหลักของวงจรเซลล์ที่ U2OS และ HeLa มีร่วมกันนั้นถูกจับยึดโดยปัจจัยการถอดรหัสหลายชนิดที่เกี่ยวข้องกับวงจรเซลล์ ชุดข้อมูลนี้ได้กำหนดให้ U2OS เป็นแบบจำลองมนุษย์ตัวที่สองที่ได้รับการกำหนดลักษณะอย่างอิสระสำหรับการทำแผนที่ทรานสคริปโตมของวัฏจักรเซลล์ และยังคงเป็นข้อมูลอ้างอิงที่นิยมใช้อย่างแพร่หลายสำหรับการศึกษาการควบคุมยีนในวัฏจักรการแบ่งตัวของเซลล์มนุษย์

การกลายพันธุ์ที่ทำให้เกิดการเพิ่มหน้าที่ (gain-of-function mutations) ใน PPM1D/Wip1 — ฟอสฟาเทสที่ทำให้ p53 ไม่ทำงาน — ก่อให้เกิด Wip1 ที่ถูกตัดส่วนปลาย C-terminal และมีกิจกรรมสูงเกินไป และทำให้จุดตรวจสอบ G1 ที่ขึ้นอยู่กับ p53 ทำงานผิดปกติหลังเกิดความเสียหายของ DNA; U2OS เป็นพาหะของอัลลีลที่ตัดสั้นดังกล่าว (p.Arg458Ter) ในรูปแบบเฮเทอโรไซกัส [7] [61] ซึ่งทำให้ U2OS เป็นแบบจำลองที่มีประโยชน์ในการศึกษาว่า การตัดสั้นของ Wip1 ให้ความได้เปรียบในการเจริญเติบโตแบบเลือกสรรได้อย่างไร โดยการลดทอนการตอบสนองต่อความเสียหายของ DNA ความแปรปรวนของเซลล์แต่ละเซลล์ในการตอบสนองต่อความเสียหายของ DNA ได้รับการวัดปริมาณในเซลล์ U2OS ที่ได้รับรังสีโฟตอน 2 Gy; โดยการเปรียบเทียบจุดรวมตัวของ 53BP1 และ γH2AX ในนิวเคลียสพี่น้องของเซลล์ที่มีนิวเคลียสสองตัว, Płódowska และคณะ ได้แสดงให้เห็นถึงสัญญาณรบกวนแบบสุ่มระหว่างเซลล์ในการก่อตัวของจุดซ่อมแซม ซึ่งทับซ้อนกับความเสียหายของ DNA ที่กระจายตัวแบบสุ่ม โดยสัญญาณรบกวนนี้มีส่วนทำให้เกิดความแปรปรวนรวม 28% สำหรับจุด 53BP1 และ 50% สำหรับจุด γH2AX [26]. การวิเคราะห์การแลกเปลี่ยนโครมาไทด์พี่น้องในสายเซลล์ซาร์โคมาเนื้ออ่อน รวมถึงเซลล์เปรียบเทียบ U2OS ยืนยันว่าการก่อตัวของ γH2AX ภายในเซลล์มีความสัมพันธ์กับความไม่เสถียรของจีโนม และอาจใช้ทำนายการตอบสนองต่อการรักษาที่ก่อให้เกิดความเสียหายต่อ DNA [27].

เซลล์ U2OS ถูกนำมาใช้เพื่อศึกษาการขยายตัวของลำดับซ้ำ CAG แบบโซมาติกในโรคฮันติงตัน การขัดขวางทางพันธุกรรมของช่องจับ MSH3 Y245/K246 IDL-binding pocket ได้ลดการปฏิสัมพันธ์ของ DNA ลงอย่างมีนัยสำคัญ และยับยั้งการขยายตัวของลำดับซ้ำในสายพันธุ์ U2OS ที่แสดงออก HTT exon 1 แบบกลายพันธุ์ นอกจากนี้ การปิดกั้นทางเภสัชวิทยาของตำแหน่งเดียวกันยังลดการขยายตัวของลำดับซ้ำใน U2OS และที่สำคัญ ยังชะลอการขยายตัวในเซลล์ประสาทมีหนามขนาดกลางที่สกัดจาก iPSCs ของผู้ป่วยโรคฮันติงตัน [28]. สายพันธุ์อนุพันธ์ U2OS DR-GFP ได้ถูกใช้อย่างแพร่หลายในการทดสอบการซ่อมแซมด้วยการรวมตัวแบบโฮโมโลกัส และสายพันธุ์อนุพันธ์แบบน็อกเอาต์หลายชนิด — รวมถึงสายพันธุ์น็อกเอาต์ RAD52, TBK1 และ OPTN — ได้ถูกสร้างขึ้นเพื่อวิเคราะห์องค์ประกอบเฉพาะของเส้นทางการซ่อมแซม ซึ่งทั้งหมดถูกจัดหมวดหมู่เป็นรายการย่อยของ CVCL_0042 [61]。ยีนกดการเกิดมะเร็ง TSC2 ได้รับการระบุว่าเป็นยีนที่กดการเกิดก้อนความเครียด; ในบทความพรีพรินต์ที่รายงานงานนี้ การลดระดับ TSC2 แบบบางส่วนด้วย siRNA ในเซลล์ U2OS ไม่ก่อให้เกิดสเตรสแกรนูลแบบสปอนเทเนียส ซึ่งแตกต่างจากการสูญเสียอย่างสมบูรณ์ที่สังเกตได้ในไฟโบรบลาสต์ตัวอ่อนของหนู ซึ่งยืนยันว่า TSC2 เป็นตัวควบคุมการประกอบสเตรสแกรนูลที่ขึ้นอยู่กับระดับเกณฑ์ [29]. การคัดกรองทั่วทั้งจีโนมเพื่อค้นหาการลบยีนแบบโฮโมไซกัสและการรบกวนยีนในคอมเพล็กซ์โพลาリティในชุดเซลล์มะเร็งยังได้รวมข้อมูลจาก U2OS เข้าไปด้วย ซึ่งช่วยในการระบุยีนมะเร็งแบบรีเซสซีฟและลักษณะเฉพาะของจุดเปราะบาง [30] [31].

ชีววิทยาของวงจรวันและคืนและการควบคุมยีน

U2OS ได้กลายเป็นแบบจำลองหลักสำหรับการวิจัยนาฬิกาชีวภาพของสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม เซลล์เหล่านี้แสดงจังหวะชีวภาพที่มั่นคงและสามารถรักษาตัวเองได้ และถูกใช้เป็นประจำร่วมกับตัวรายงานลูซิเฟอเรสของยีนนาฬิกาชีวภาพสำหรับการวัดแสงแบบเรียลไทม์ Burke และคณะ ได้ใช้เซลล์ U2OS ที่แสดงตัวรายงานลูซิเฟอเรสของยีนนาฬิกาชีวภาพ เพื่อแสดงให้เห็นว่าคาเฟอีนทำให้ช่วงเวลาของนาฬิกาชีวภาพยาวขึ้นในลักษณะที่ขึ้นอยู่กับปริมาณ และได้พิสูจน์ผ่านการวิเคราะห์ทางเภสัชวิทยาและการยับยั้งด้วย siRNA ว่าการส่งสัญญาณของตัวรับอะดีโนซีน — ไม่ใช่กิจกรรมของตัวรับไรยาโนดีนหรือฟอสโฟไดเอสเทอเรส — เป็นปัจจัยที่ก่อให้เกิดผลดังกล่าว [59]. ระบบเดียวกันนี้ยังสนับสนุนการคัดกรองสารเคมีในขนาดใหญ่: การคัดกรองแบบ high-throughput ของยาที่มีอยู่ภายในเซลล์ U2OS พบว่าประมาณ 5% ทำให้ระยะเวลาวงจรชีวภาพเปลี่ยนแปลง โดยระบุเดไฮโดรเอพิแอนโดรสเทอโรน (dehydroepiandrosterone) เป็นสารที่ลดระยะเวลาวงจรชีวภาพ และชี้ให้เห็นว่า ABL1, ABL2 และ BCR kinase มีบทบาทในการควบคุมระยะเวลาวงจรชีวภาพ [60]. คุณสมบัติเหล่านี้ได้ถูกนำมาใช้อย่างกว้างขวางเพื่อกำหนดลักษณะกลไกโมเลกุลที่ควบคุมวงจรป้อนกลับการถอดรหัส-การแปลรหัสหลักของ BMAL1/CLOCK และการมีปฏิสัมพันธ์ของมันกับเส้นทางก่อมะเร็ง

งานวิจัยแบบพรีพรินต์ล่าสุดได้ศึกษาธรรมชาติของจังหวะชีวภาพภายในของ c-MYC ในเซลล์ U2OS โดยการสร้างรีพอร์ตเตอร์ c-MYC และเปรียบเทียบเฟสการสั่นของรีพอร์ตเตอร์นี้กับรีพอร์ตเตอร์ BMAL1 และ PER2 Kalyanaraman และคณะ รายงานว่า โปรโมเตอร์ c-MYC สั่นอย่างมีจังหวะในเซลล์ U2OS — ซึ่งเป็นสายพันธุ์ที่มีระดับ MYC ต่ำโดยธรรมชาติ — และสั่นไม่ตรงเฟสกับองค์ประกอบหลักของนาฬิกาชีวภาพ [32]. แบบจำลองเชิงคำนวณที่สร้างขึ้นจากผลการวิจัยเหล่านี้ชี้ให้เห็นว่า MYC ทำหน้าที่เป็นตัวรบกวนนาฬิกาชีวภาพ โดยช่วงเวลาที่มันทำงานจะช่วยลดผลกระทบเชิงลบต่อระบบการควบคุมเวลาชีวภาพ — ผลการวิจัยนี้มีความสำคัญต่อการเข้าใจว่า การแสดงออกเกินของ MYC ที่ก่อมะเร็งรบกวนสรีรวิทยาของนาฬิกาชีวภาพอย่างไร ในฐานะงานวิจัยแบบพรีพรินต์ งานวิจัยนี้ยังไม่ได้ผ่านกระบวนการทบทวนโดยผู้เชี่ยวชาญ อย่างไรก็ตาม มันเป็นตัวอย่างที่แสดงให้เห็นถึงความเหมาะสมของ U2OS ในการศึกษาทั้งหน้าที่ของยีนก่อมะเร็งและการควบคุมวงจรชีวภาพในเวลาเดียวกัน

U2OS เป็นเซลล์ที่ไม่มีเทโลเมอเรส และรักษาความยาวของเทโลเมอร์ผ่านกลไกการยืดเทโลเมอร์แบบทางเลือก (ALT) ซึ่งเป็นกลไกที่อาศัยการรวมตัวใหม่ของดีเอ็นเอ ที่ถูกบันทึกไว้เป็นครั้งแรกในเนื้องอกบางชนิดและสายเซลล์ที่มาจากเนื้องอก โดย Bryan et al. [58] สิ่งนี้ทำให้ U2OS เป็นแบบจำลองมาตรฐานสำหรับการวิจัย ALT ซึ่งเป็นกลไกที่ทำงานในมะเร็งบางชนิด รวมถึงมะเร็งกระดูก (osteosarcomas) นอกจากนี้ สายเซลล์นี้ยังถูกใช้บ่อยครั้งในการศึกษาพลวัตของการดัดแปลงฮิสโตน โครงสร้างนิวเคลียส และการจัดระเบียบโครมาติน โดยอาศัยนิวเคลียสขนาดใหญ่และความสะดวกในการศึกษาด้วยแสง ฮิสโตนที่ติดป้ายเรืองแสงและอนุพันธ์ของรูพรุนนิวเคลียร์ — รวมถึง U2OS EGFP-H2B และสายพันธุ์ NUP96 หลายสายพันธุ์ที่ติดป้าย CRISPR ซึ่งสืบทอดมาจาก U2OS — ได้ช่วยให้สามารถถ่ายภาพเชิงปริมาณของโครมาตินและกระบวนการขนส่งภายในนิวเคลียสด้วยความละเอียดเชิงพื้นที่สูง [61].

การเอนโดไซโทซิสและการขนส่งภายในเซลล์

U2OS ได้กลายเป็นแบบจำลองมาตรฐานสำหรับการศึกษาการเอนโดไซโทซิสที่คลัทรินเป็นตัวกลาง (CME) และกิจกรรมของไดนาไมน์ GTPase เนื่องจากมีกิจกรรมการนำตัวรับเข้าสู่เซลล์ที่แข็งแกร่ง และเหมาะสำหรับการทดสอบ CME แบบเชิงปริมาณที่ใช้แสงฟลูออเรสเซนต์ในการวัดการดูดซึมของทรานสเฟอร์ริน-Alexa594 สารประกอบ sulfonadyn ชุดหนึ่ง — ซึ่งเป็น aryl sulfonamides ที่สกัดจากอนุพันธ์ของ dansylcadaverine — ได้รับการระบุว่าเป็นสารยับยั้ง dynamin I และ dynamin II ที่แข่งขันกับ GTP โดยใช้เซลล์ U2OS เป็นแพลตฟอร์มหลักในการทดสอบ CME [33] การวิเคราะห์จลนศาสตร์แบบ Michaelis-Menten ในระบบนี้ยืนยันกลไกการยับยั้ง และอนุพันธ์ที่มีประสิทธิภาพสูงสุดยังแสดงฤทธิ์ต้านโรคลมชักในแบบจำลองสัตว์ ทำให้การทดสอบ CME บนเซลล์ U2OS กลายเป็นเครื่องมือเชิงแปลสำหรับการค้นคว้ายาทางระบบประสาท

นอกจากนี้ โบลินาควิโนน (bolinaquinone) ซึ่งเป็นเซสควิเทอร์พีนไฮดรอกซีควิโนนที่สกัดจากทะเล และอนุพันธ์นาฟโทควิโนนที่เกี่ยวข้อง ได้รับการประเมินกิจกรรมยับยั้ง CME ในเซลล์ U2OS โดยการปรับโครงสร้างตามทฤษฎีฟังก์ชันความหนาแน่น (DFT) ได้สร้างอนุพันธ์ที่มีประสิทธิภาพเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญต่อทั้งไดนาไมน์ GTPase และ CME [34]. การศึกษาเหล่านี้แสดงให้เห็นว่า การทดสอบ CME บนเซลล์ U2OS ทำหน้าที่เป็นแพลตฟอร์มที่ไวและสามารถทำซ้ำได้ สำหรับการศึกษาความสัมพันธ์ระหว่างโครงสร้างและกิจกรรมของสารยับยั้งการเอนโดไซโทซิส การแสดงออกของตัวรับที่สม่ำเสมอและพลวัตการนำเข้าสู่เซลล์ที่คาดการณ์ได้ของสายเซลล์นี้ ทำให้มันเป็นระบบเซลล์ที่ได้รับความนิยมสำหรับการวิจัยประเภทนี้

ชะตากรรมของโอลิโกนิวคลีโอไทด์แอนติเซนส์ (ASOs) หลังจากถูกเซลล์ดูดซับได้ถูกติดตามในเซลล์ U2OS โดยใช้กล้องจุลทรรศน์เซลล์สด การวัดค่า pH แบบอัตราส่วน และกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนแบบสแกนด้วยลำแสงไอออนที่โฟกัสสามมิติ ในบทความพรีพรินต์ที่รายงานงานนี้, Sitarska และคณะ ได้แสดงให้เห็นว่า แม้ในสภาพที่ลดปริมาณ RNA เป้าหมายลงมากกว่า 90% ASO ที่ถูกนำเข้าสู่เซลล์มีเพียงน้อยกว่า 4% ที่ถึงนิวเคลียส และ ASO สะสมอยู่ในเอนโดโซมระยะปลาย เอนโดไลโซโซม และไลโซโซม ซึ่งที่นั่นมันก่อให้เกิดการทำให้เป็นกลางในช่องภายในโดยไม่มีการดึงดูด galectin-3 หรือการแตกของเยื่อหุ้มจำกัด [35]. ผู้เขียนเสนอว่า การหลบหนีอย่างมีประสิทธิภาพกลับเกิดขึ้นในช่วงต้นของกระบวนการเอนโดไซโทซิส ซึ่งน่าจะเป็นในเอนโดโซมระยะต้นหรือเอนโดโซมรีไซเคิล เซลล์ U2OS ยังถูกใช้ในการทดสอบการกระตุ้น GLP-1R — สายเซลล์ U2OS ที่แสดงออกไบโอเซนเซอร์ Nomad ที่ไวต่อ cAMP — เพื่อประเมินผลทางเมแทบอลิซึมของสารสกัดเบอร์กามอตที่เตรียมในรูปแบบฟอสโฟลิพิด ซึ่งแสดงให้เห็นถึงประโยชน์ของสายเซลล์นี้ในฐานะแพลตฟอร์มการแสดงออกของตัวรับที่ถูกออกแบบมาเพื่อศึกษาเภสัชวิทยาของสารธรรมชาติ [36]. เทคโนโลยีไซบริดสำหรับการศึกษาการกลายพันธุ์ของดีเอ็นเอไมโทคอนเดรียได้รับการพัฒนาโดยการตรวจสอบความถูกต้องของสายพันธุ์ HCT116, HT1080 และ U2OS ที่พัฒนาขึ้นใหม่ซึ่งปราศจาก mtDNA (ρ0) ในฐานะสายพันธุ์เซลล์ผู้รับสำหรับการสร้างไซบริดข้ามไมโทคอนเดรีย [37].

โปรตีโอมิกส์, จีโนมิกส์ และแพลตฟอร์มมัลติ-โอมิกส์

U2OS เป็นสายเซลล์อ้างอิงหลักในโครงการโปรตีโอมิกส์ขนาดใหญ่ โปรไฟล์โปรตีโอมิกส์เฉพาะตัวแรกของ U2OS ถูกสร้างขึ้นโดย Niforou et al. โดยใช้การอิเล็กโทรโฟรีซิสเจลสองมิติ (2-DE) ที่เชื่อมต่อกับสเปกโตรเมตรีมวล MALDI: จุดประมาณ 3,000 จุดถูกตัดออกจากเจล 2-DE สองแผ่นและวิเคราะห์ ซึ่งนำไปสู่การระบุผลิตภัณฑ์ยีนที่แตกต่างกัน 237 ชนิด โดยในจำนวนนั้นมีโปรโตออนโคจีน 11 ตัวที่เกี่ยวข้องกับสภาพมะเร็งของสายเซลล์นี้ [16]. งานวิจัยต่อมาที่ใช้เทคนิคสเปกโตรเมตรีมวลได้วัดปริมาณโปรตีโอมสัมบูรณ์ของสายเซลล์นี้ในระยะอินเตอร์เฟสและไมโทซิส — ซึ่งในบทความวิจัยได้อธิบายว่าเป็นสายเซลล์มนุษย์ที่ใช้กันอย่างแพร่หลาย และถูกจัดให้อยู่ในชื่อ U2OS ใน Cellosaurus — โดยแสดงให้เห็นถึงการแสดงออกของโปรตีนอย่างน้อยประมาณ 10,000 ชนิด ที่มีระดับความอุดมสมบูรณ์ในเซลล์แตกต่างกันถึงเจ็ดลำดับขนาด, สูงถึง 20 ล้านสำเนาต่อเซลล์ [38] [61] การวิเคราะห์โปรตีโอมิกส์เปรียบเทียบในสายเซลล์ทั่วไป 11 สาย แสดงให้เห็นว่า U2OS มีโปรตีนหลักที่แสดงออกอย่างแพร่หลาย ในขณะที่แสดงถึงความแปรผันเฉพาะตามชนิดเซลล์ในกลุ่มย่อยที่มีหน้าที่เฉพาะ [39]

โปรตีโอมิกส์บนพื้นผิวเซลล์ในวงกว้างโดยใช้เทคโนโลยี Cell Surface Capture ได้จัดทำแคตตาล็อกของ surfaceome ของ U2OS ร่วมกับเซลล์มนุษย์อีก 40 ชนิด (รวมทั้งหมด 41 ชนิดเซลล์มนุษย์และ 31 ชนิดเซลล์หนู) ซึ่งให้ทรัพยากรสำหรับการระบุเป้าหมายบนพื้นผิวที่สามารถเข้าถึงได้ทางเภสัชวิทยา [40]. การศึกษาการกำหนดแบบ HLA และการคาดการณ์เนโอ-เอพิโทปได้นำ U2OS มาใช้เพื่อสนับสนุนการพัฒนาเป้าหมายสำหรับการรักษาด้วยภูมิคุ้มกันต่อโรคมะเร็ง [41] [42]. การวิเคราะห์โปรตีนอาร์เรย์แบบเฟสกลับ (reverse-phase protein array) ของเซลล์มะเร็งมากกว่า 650 สายพันธุ์ ซึ่งรวมถึง U2OS ได้แสดงให้เห็นว่าข้อมูลฟอสโฟโพรตีโอมิกส์ (phosphoproteomic) มีศักยภาพในการทำนายความไวต่อยาที่เหนือกว่าข้อมูลที่ได้จากการวัด mRNA เพียงอย่างเดียว [43]. แผนที่โปรตีโอมิกส์แบบครอบคลุมทุกชนิดมะเร็ง (pan-cancer proteomic map) ที่ครอบคลุมเซลล์ไลน์ 949 สาย ได้บูรณาการข้อมูลโปรตีโอมิกส์ของ U2OS เข้ากับการคัดกรองความจำเป็นของ CRISPR และข้อมูลการตอบสนองต่อยา ซึ่งเปิดเผยตัวบ่งชี้ทางชีวภาพของโปรตีนหลายพันชนิดที่บ่งชี้ความเปราะบางต่อมะเร็ง [44].

การวิเคราะห์ระดับทรานสคริปโตมของเซลล์มะเร็ง 675 สายพันธุ์โดยใช้การหาลำดับ RNA ได้บันทึกการรวมตัวของยีน ลายเซ็นการกลายพันธุ์ และการแสดงออกของลำดับที่ไม่ใช่มนุษย์ใน U2OS [45]. การวิเคราะห์ CCLE รุ่นใหม่ได้ขยายขอบเขตการวิเคราะห์ให้รวมถึงข้อมูลการเมทิลเลชันของ DNA การดัดแปลงฮิสโตน การแสดงออกของ microRNA และข้อมูลการสปลีซ RNA ในเซลล์ไลน์ 1,072 สาย โดย U2OS มีส่วนร่วมในการวิเคราะห์แบบบูรณาการของคุณลักษณะโมเลกุลที่เป็นพื้นฐานของการตอบสนองต่อยา [46]. โปรตีโอมิกส์เชิงปริมาณของชุดข้อมูล CCLE ได้ระบุความผิดปกติของเส้นทางชีวภาพในระดับโปรตีน ซึ่งไม่สามารถสังเกตได้จากข้อมูลจีโนมหรือทรานสคริปโตมิกส์เพียงอย่างเดียว [47]. การใช้เทคนิค Cell Painting ร่วมกับ Thermal Proteome Profiling ในเซลล์ U2OS ได้แสดงให้เห็นถึงกลยุทธ์ที่มีประสิทธิภาพสูงในการอนุมานกลไกการทำงานของยา โดยการบูรณาการการวิเคราะห์ลักษณะทางสัณฐานวิทยาเข้ากับการตรวจหาเป้าหมายโปรตีนอย่างไม่ลำเอียง [17]. ชุดข้อมูลโปรตีโอมิกส์ของ U2OS ยังได้รับการควบคุมคุณภาพระดับไวโรม: กระบวนการทำงานแบบ xeno-proteomics สำหรับการตรวจหาโปรตีนไวรัสแบบไม่กำหนดเป้าหมายในข้อมูลโปรตีโอมิกส์ได้ถูกพัฒนาขึ้นเป็นขั้นตอนการคัดกรองทั่วไป โดยผู้เขียนแนะนำให้ตรวจสอบชุดข้อมูลโปรตีโอมิกส์ของเซลล์ทุกชุดเพื่อหาโปรตีนที่ไม่ใช่ของมนุษย์ก่อนการเผยแพร่ [48]. การวิเคราะห์เอพิเจโนมิกแบบบูรณาการของมะเร็งกระดูก (osteosarcoma) ที่รวมข้อมูล U2OS ได้ระบุยีน 350 ตัวที่มีความผิดปกติทางพันธุกรรมและเอพิเจโนมิกที่สอดคล้องกัน ซึ่งช่วยเพิ่มความเข้าใจเกี่ยวกับภูมิทัศน์การควบคุมที่กำกับความก้าวหน้าของมะเร็งกระดูก [49]. การแสดงออกของโปรตีนในไมโครอาร์เรย์เซลล์ยังได้รับการประเมินโดยใช้เซลล์ U2OS ที่ฝังอยู่ในแมทริกซ์อะกาโรส ซึ่งช่วยให้สามารถสร้างโปรไฟล์ของสายเซลล์หลายสายพร้อมกันในรูปแบบไมโครอาร์เรย์เนื้อเยื่อ [50] การตอบสนองของตัวบ่งชี้ระยะเริ่มต้นของเซลล์ U2OS ต่อสารสกัดจากกระดูกปลูกถ่ายข้ามสายพันธุ์ที่เคลือบด้วยกรดไฮยาลูโรนิกได้รับการวิเคราะห์ด้วย qRT-PCR: RUNX2 เพิ่มขึ้น 2.61 เท่า (p = 0.01) ในขณะที่ COL1A1 ไม่พบผลที่มีนัยสำคัญ และความแตกต่างที่สังเกตได้ในกิจกรรมเมแทบอลิซึมไม่คงความมีนัยสำคัญหลังการปรับค่า FDR [51]. ผู้เขียนอธิบายการศึกษานี้ว่าเป็นแบบสำรวจเบื้องต้น และเรียกร้องให้มีการตรวจสอบความถูกต้องในเซลล์ต้นแบบและแบบจำลองใน vivo

สรุป

U2OS (CVCL_0042) เป็นสายเซลล์มะเร็งกระดูกชนิดออสทีโอซาร์โคมาของมนุษย์ที่มีความหลากหลายอย่างน่าทึ่ง ซึ่งได้มีส่วนช่วยในการพัฒนาพื้นฐานในด้านการวิจัยเนื้องอกกระดูก ชีววิทยาการซ่อมแซม DNA วิทยาศาสตร์จังหวะชีวภาพ การเภสัชวิทยาการเอนโดไซโทซิส และการวิเคราะห์โอมิกส์ในวงกว้าง พื้นหลัง TP53 แบบไวลด์ไทป์ (wild-type) ของมัน รูปร่างเซลล์เยื่อบุผิวที่ติดกับพื้นผิว เวลาเพิ่มจำนวนเซลล์ที่รวดเร็ว และการวิเคราะห์เชิงลึกแบบมัลติ-โอมิกส์ ทำให้มันเป็นแบบจำลองการทดลองที่ได้รับการสนับสนุนอย่างยอดเยี่ยม ตั้งแต่การศึกษาการจำแนก HLA ในระยะแรก ไปจนถึงการคัดกรองหน้าที่โดยใช้ CRISPR และวิเคราะห์โปรไฟล์ยาด้วย Cell Painting ในปัจจุบัน U2OS ได้ปรับตัวอย่างต่อเนื่องเพื่อตอบสนองความต้องการของชุมชนวิจัยชีวการแพทย์ นักวิจัยที่กำลังมองหาแบบจำลองที่เชื่อถือได้และมีเอกสารบันทึกอย่างละเอียดสำหรับชีววิทยาของมะเร็งกระดูก (osteosarcoma), การควบคุมวงจรเซลล์, การตอบสนองต่อความเสียหายของ DNA หรือการคัดกรองสารประกอบแบบ high-throughput จะพบว่า U2OS เป็นเครื่องมือที่ขาดไม่ได้ สำรวจข้อมูลจำเพาะทั้งหมดหรือสั่งซื้อเซลล์ U2OS ได้โดยตรงที่ cytion.com

บทความสำคัญ

1. Pontén J, Saksela E (1967) Two established in vitro cell lines from human mesenchymal tumours. International journal of cancer. PMID: 6081590
2. Fogh J (1986) สายเซลล์มะเร็งของมนุษย์สำหรับการวิจัยมะเร็ง. Cancer investigation. PMID: 3518877
3. Fogh J, Wright WC, Loveless JD (1977) การไม่พบการปนเปื้อนของเซลล์ HeLa ในสายเซลล์ 169 สายที่สกัดจากเนื้องอกของมนุษย์. Journal of the National Cancer Institute. PMID: 833871
4. Espmark JA, Ahlqvist-Roth L, Särne L (1978) การกำหนดประเภทเนื้อเยื่อของเซลล์ในวัฒนธรรม III. แอนติเจน HLA ของสายเซลล์มนุษย์ที่ได้รับการยืนยันแล้ว. Tissue Antigens. PMID: 77569
5. Pollack MS, Heagney SD, Livingston PO (1981) การแสดงออกของแอนติเจนอัลโล HLA-A, B, C และ DR บนสายเซลล์เนื้องอกมนุษย์ที่เพาะเลี้ยงจำนวนสี่สิบหกสาย. วารสารสถาบันมะเร็งแห่งชาติ. PMID: 7017212
6. Pautke C, Schieker M, Tischer T (2004) การวิเคราะห์ลักษณะของสายเซลล์มะเร็งกระดูก MG-63, Saos-2 และ U-2 OS เมื่อเปรียบเทียบกับเซลล์สร้างกระดูกของมนุษย์. Anticancer research. PMID: 15736406
7. Kleiblova P, Shaltiel IA, Benada J (2013) การกลายพันธุ์ที่ทำให้ฟังก์ชันเพิ่มขึ้นของ PPM1D/Wip1 ส่งผลให้จุดตรวจสอบ G1 ที่ขึ้นอยู่กับ p53 ถูกขัดขวาง. The Journal of cell biology. PMID: 23649806
8. Ozaki T, Neumann T, Wai D (2003) ความเปลี่ยนแปลงของโครโมโซมในสายเซลล์มะเร็งกระดูกที่ถูกเปิดเผยโดยการไฮบริดิเซชันจีโนมเปรียบเทียบและการวิเคราะห์โครโมโซมหลายสี. Cancer genetics and cytogenetics. PMID: 12645653
9. Selvarajah S, Yoshimoto M, Maire G (2007) การระบุความผิดปกติระดับไมโครที่ซ่อนเร้นในมะเร็งกระดูกชนิดออสทีโอซาร์โคมา โดยใช้เทคนิคไฮบริดิเซชันจีโนมเปรียบเทียบแบบอาร์เรย์โอลิโกนิวคลีโอไทด์ความละเอียดสูง. Cancer genetics and cytogenetics. PMID: 17981215
10. Ottaviano L, Schaefer KL, Gajewski M (2010) การวิเคราะห์ลักษณะทางโมเลกุลของสายเซลล์ที่ใช้ทั่วไปในการวิจัยมะเร็งกระดูก: โครงการ EuroBoNet ข้ามยุโรป Genes, chromosomes & cancer. PMID: 19787792
11. Masuda H, Miller C, Koeffler HP (1987) การจัดเรียงใหม่ของยีน p53 ในมะเร็งกระดูกชนิดออสทีโอซาร์โคมาของมนุษย์. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. PMID: 2823272
12. Diller L, Kassel J, Nelson CE (1990) p53 ทำหน้าที่เป็นโปรตีนควบคุมวงจรเซลล์ในมะเร็งกระดูกชนิดออสทีโอซาร์โคมา. Molecular and cellular biology. PMID: 2233717
13. Mohseny AB, Machado I, Cai Y (2011) การวิเคราะห์ลักษณะการทำงานของสายเซลล์มะเร็งกระดูกให้แบบจำลองที่เป็นตัวแทนสำหรับการศึกษาโรคในมนุษย์. การวิจัยในห้องปฏิบัติการ; วารสารเกี่ยวกับวิธีการทางเทคนิคและพยาธิวิทยา. PMID: 21519327
14. Müller CR, Paulsen EB, Noordhuis P (2007) ศักยภาพในการรักษาลิโปซาร์โคมาด้วยสารต้าน MDM2 Nutlin-3A. วารสารมะเร็งนานาชาติ. PMID: 17354236
15. Barretina J, Caponigro G, Stransky N (2012) สารานุกรมสายเซลล์มะเร็ง (The Cancer Cell Line Encyclopedia) ช่วยให้สร้างแบบจำลองการคาดการณ์ความไวต่อยาต้านมะเร็งได้ Nature PMID: 22460905
16. Niforou KM, Anagnostopoulos AK, Vougas K (2008) โปรไฟล์โปรเทโอมของสายเซลล์มะเร็งกระดูก U2OS ในมนุษย์. Cancer genomics & proteomics. PMID: 18359981
17. Johansson C, Johansson M, Kasi PB (2026) การวาดเซลล์และการวิเคราะห์โปรเทโอมแบบความร้อนเพื่อคาดการณ์เป้าหมายของยาและกลไกการทำงาน Molecular systems biology. PMID: 42141265
18. Yu M, Selvaraj SK, Liang-Chu MM (2015) ทรัพยากรสำหรับการตรวจสอบความถูกต้อง การให้ข้อมูลประกอบ และการควบคุมคุณภาพของสายเซลล์ Nature PMID: 25877200
19. Yang C, Ma Y, Shen W (2026) Lenvatinib ก่อให้เกิดการเปลี่ยนแปลงที่เกี่ยวข้องกับ ferroptosis ในเซลล์มะเร็งกระดูก (osteosarcoma) ซึ่งเกี่ยวข้องกับแกน p-STAT3/p53/xCT. Frontiers in oncology. PMID: 42294277
20. Guma SR, Lee DA, Yu L (2014) การรักษาด้วยเซลล์นักฆ่าธรรมชาติ (Natural killer cell therapy) และอินเตอร์ลิวคิน-2 แบบแอโรซอล สำหรับการรักษาการแพร่กระจายของมะเร็งกระดูกไปยังปอด. Pediatric blood & cancer. PMID: 24136885
21. Teicher BA, Polley E, Kunkel M (2015) การคัดกรองสายพันธุ์เซลล์ซาร์โคมาด้วยยาต้านมะเร็งและสารทดลองเพื่อระบุรูปแบบที่เกี่ยวข้องกับการแสดงออกของยีนและไมโครอาร์เอ็นเอ Molecular Cancer Therapeutics. PMID: 26351324
22. Iorio F, Knijnenburg TA, Vis DJ (2016) ภาพรวมของปฏิสัมพันธ์ทางเภสัชพันธุศาสตร์ในโรคมะเร็ง. Cell. PMID: 27397505
23. Xue W, Wang Y, Smirnova AV (2026) miR-16-1-3p ยับยั้งการเพิ่มจำนวนและการรุกรานผ่านแกน MDM2-p53 ในสัญญาณ TGF-β1 ในมะเร็งกระดูกชนิดออสทีโอซาร์โคมา Molecular therapy. Oncology. PMID: 42318056
24. Giacchi L, Ucci A, Zelli V (2026) ผลของเวสิเคิลนอกเซลล์ที่มาจากเซลล์สร้างกระดูกต่อโปรไฟล์การถอดรหัสของเซลล์มะเร็งกระดูก: บทบาทของ miRNA ที่ถูกขนส่งไปมา. Biomedicines. PMID: 42193365
25. Hu X, Wang Q, Lin S (2026) การวิเคราะห์ทรานสคริปโตมิกส์ระดับเซลล์เดี่ยวเผยให้เห็นความหลากหลายของกระบวนการไกลโคไลซิส และระบุ STC2 เป็นตัวควบคุมหลักในการปรับโปรแกรมเมตาบอลิซึมใหม่ในมะเร็งกระดูกชนิดออสทีโอซาร์โคมา Molecular and cellular biochemistry. PMID: 42166004
26. Płódowska M, Drzazga D, Węgierek-Ciuk A (2026) การประเมินความแปรปรวนของการตอบสนองต่อความเสียหายของ DNA ในเซลล์มนุษย์แต่ละเซลล์ที่ถูกสัมผัสกับรังสีโฟตอน. Radiation and environmental biophysics. PMID: 42301301
27. Salawu A, Wright K, Al-Kathiri A (2018) การแลกเปลี่ยนโครมาติดพี่น้องและความไม่เสถียรทางจีโนมในซาร์โคมาเนื้ออ่อน: ผลกระทบที่อาจเกิดขึ้นต่อการตอบสนองต่อการรักษาที่ก่อให้เกิดความเสียหายต่อ DNA. Sarcoma. PMID: 29853780
28. Goold R, Donaldson J, Gidney F (2026) การขัดขวางทางพันธุกรรมหรือทางเภสัชวิทยาของช่องจับ IDL ที่ตำแหน่ง Y245/K246 ของ MSH3 ช่วยชะลอการขยายตัวของลำดับซ้ำ CAG. NAR Molecular Medicine. PMID: 42317610
29. Ma Y, Farny NG (2026) TSC2 เป็นตัวกดการทำงานของ granule ความเครียด bioRxiv. Preprint — ยังไม่ผ่านการประเมินโดยผู้เชี่ยวชาญ PMID: 42239325
30. Bignell GR, Greenman CD, Davies H (2010) ลักษณะเฉพาะของการกลายพันธุ์และการคัดเลือกในจีโนมมะเร็ง. Nature. PMID: 20164919
31. Rothenberg SM, Mohapatra G, Rivera MN (2010) การคัดกรองทั่วทั้งจีโนมเพื่อหาการขาดหายไปของยีนขนาดเล็กเผยให้เห็นการรบกวนของยีนในคอมเพล็กซ์โพลาリティในมะเร็งมนุษย์หลายชนิด. Cancer research. PMID: 20215515
32. Kalyanaraman B, Ganesh D, Kunte VA (2026) c-MYC ถูกถอดรหัสตามจังหวะชีวภาพและทำหน้าที่เป็นตัวรบกวนนาฬิกาชีวภาพ ซึ่งจังหวะเวลาของมันช่วยลดผลกระทบให้น้อยที่สุด bioRxiv. Preprint — ยังไม่ผ่านการประเมินโดยผู้เชี่ยวชาญ PMID: 42244582
33. Jones NC, Robertson MJ, Odell LR (2026) สารประกอบ Sulfonadyn: กลุ่มของ Aryl Sulfonamides ที่ยับยั้ง Dynamin GTPase และกระบวนการ Endocytosis ที่ถูกควบคุมโดย Clathrin และมีฤทธิ์ต้านโรคลมชักในแบบจำลองสัตว์ ACS chemical biology. PMID: 42313002
34. O'Brien NS, Ghods A, Xue J (2025) จาก bolinaquinone ซึ่งเป็น sesquiterpene hydroxyquinone จากทะเล ไปสู่ naphthoquinones ที่มีฤทธิ์ยับยั้ง clathrin. RSC medicinal chemistry. PMID: 41884311
35. Sitarska E, Saminathan A, Scanavachi G (2026) โอลิโกนิวคลีโอไทด์แอนติเซนส์แบบเปลือยยังคงถูกกักเก็บในเอนโดไลโซโซม แม้จะเกิดความเสียหายของเยื่อหุ้มเซลล์ที่ถูกเหนี่ยวนำ bioRxiv. Preprint — ยังไม่ผ่านการประเมินโดยผู้ทรงคุณวุฒิ PMID: 42182263
36. Khan A, Mella RM, Villacé P (2026) การประเมินในหลอดทดลองเกี่ยวกับกิจกรรมที่เกี่ยวข้องกับ GLP-1R ของสารสกัดเบอร์กามอตที่ได้รับการมาตรฐานอย่างยั่งยืนและอยู่ในรูปแบบฟอสโฟลิพิด Biomedicines. PMID: 42193436
37. Weaver L, Alexeyev MF (2026) วิธีปรับปรุงสำหรับการสร้างไซบริดข้ามไมโทคอนเดรีย Cells. PMID: 42193905
38. Beck M, Schmidt A, Malmstroem J (2011) โปรตีโอมเชิงปริมาณของสายเซลล์มนุษย์. Molecular systems biology. PMID: 22068332
39. Geiger T, Wehner A, Schaab C (2012) การวิเคราะห์โปรตีโอมิกส์เปรียบเทียบของสายเซลล์ทั่วไป 11 สาย แสดงให้เห็นถึงการแสดงออกของโปรตีนส่วนใหญ่ที่พบได้ทั่วไปแต่มีความแตกต่างกัน Molecular & cellular proteomics. PMID: 22278370
40. Bausch-Fluck D, Hofmann A, Bock T (2015) แผนที่โปรตีนบนผิวเซลล์ที่ได้จากเทคนิคสเปกโตรเมตรีมวล PloS one. PMID: 25894527
41. Boegel S, Löwer M, Bukur T (2014) แคตตาล็อกประเภท HLA การแสดงออกของ HLA และผู้สมัครเป็นนีโอ-เอพิโทปในสายเซลล์มะเร็งของมนุษย์. Oncoimmunology. PMID: 25960936
42. Scholtalbers J, Boegel S, Bukur T (2015) TCLP: แคตตาล็อกสายพันธุ์เซลล์มะเร็งออนไลน์ที่รวมข้อมูลประเภท HLA, นีโอ-เอพิโทปที่คาดการณ์, ไวรัส และการแสดงออกของยีน Genome medicine. PMID: 26589293
43. Li J, Zhao W, Akbani R (2017) การวิเคราะห์ลักษณะของสายเซลล์มะเร็งมนุษย์โดยใช้แมทริกซ์โปรตีนแบบเฟสกลับ Cancer cell. PMID: 28196595
44. Gonçalves E, Poulos RC, Cai Z (2022) แผนที่โปรตีโอมิกส์แบบครอบคลุมทุกชนิดมะเร็งของเซลล์ไลน์มนุษย์ 949 สายพันธุ์. Cancer cell. PMID: 35839778
45. Klijn C, Durinck S, Stawiski EW (2015) ภาพรวมการถอดรหัสของสายเซลล์มะเร็งมนุษย์ Nature biotechnology PMID: 25485619
46. Ghandi M, Huang FW, Jané-Valbuena J (2019) การวิเคราะห์ลักษณะของ Cancer Cell Line Encyclopedia ด้วยเทคโนโลยีรุ่นใหม่ Nature PMID: 31068700
47. Nusinow DP, Szpyt J, Ghandi M (2020) โปรตีโอมิกส์เชิงปริมาณของสารานุกรมสายพันธุ์เซลล์มะเร็ง (Cancer Cell Line Encyclopedia). Cell. PMID: 31978347
48. Chernobrovkin AL, Zubarev RA (2014) การตรวจหาโปรตีนไวรัสในสายเซลล์มนุษย์ด้วยวิธี xeno-proteomics: การขจัดข้ออ้างสุดท้ายที่ยังใช้ได้สำหรับการไม่ตรวจสอบชุดข้อมูลโปรตีโอมเซลล์ทุกชุดเพื่อหาโปรตีนไวรัส PloS one. PMID: 24618588
49. Kresse SH, Rydbeck H, Skårn M (2012) การวิเคราะห์แบบบูรณาการเผยให้เห็นความสัมพันธ์ระหว่างการเปลี่ยนแปลงทางพันธุกรรมและทางเอพิเจเนติกในมะเร็งกระดูก PloS one. PMID: 23144859
50. Andersson AC, Strömberg S, Bäckvall H (2006) การวิเคราะห์การแสดงออกของโปรตีนในไมโครอาร์เรย์เซลล์: เครื่องมือสำหรับโปรตีโอมิกส์ที่ใช้แอนติบอดี. The journal of histochemistry and cytochemistry. PMID: 16957166
51. Mayer Y, Abu Sada H, Zigdon Giladi H (2026) การตอบสนองของมาร์กเกอร์สร้างกระดูกและมาร์กเกอร์สโตรมาในระยะเริ่มต้นของสายเซลล์คล้ายออสทีโอบลาสต์และสายเซลล์สโตรมาในไขกระดูก ต่อการปลูกถ่ายกระดูกจากสัตว์ต่างชนิดที่เคลือบด้วยกรดไฮยาลูโรนิก: การวิเคราะห์เชิงสำรวจในหลอดทดลอง. วารสารทันตกรรม. PMID: 42187668
52. Grant GD, Brooks L 3rd, Zhang X (2013) การระบุยีนที่ควบคุมโดยวงจรเซลล์ซึ่งแสดงออกเป็นช่วงในเซลล์ U2OS และการควบคุมของยีนเหล่านั้นโดยปัจจัยการถอดรหัส FOXM1 และ E2F. Molecular biology of the cell. PMID: 24109597
53. Wang F, Wu P, Qin S (2021) Curcin C ยับยั้งการเพิ่มจำนวนของเซลล์มะเร็งกระดูก U2OS โดยกระตุ้นการตายของเซลล์ (apoptosis) การย่อยสลายตัวเอง (autophagy) และการหยุดวงจรเซลล์ ผ่าน ROS โดยการกระตุ้นทางสัญญาณ JNK. International journal of biological macromolecules. PMID: 34896468
54. Chen S, Jin Z, Dai L (2017) อโลเพอริน (Aloperine) กระตุ้นการตายแบบอะพอพโทซิสและยับยั้งการรุกรานในเซลล์มะเร็งกระดูกชนิดออสทีโอซาร์โคมาของมนุษย์สายพันธุ์ MG-63 และ U2OS. Biomedicine & pharmacotherapy. PMID: 29080457
55. Chen JM, Zhang J, Xia YM (2018) สเตวิโอล (steviol) ซึ่งเป็นสารเมตาโบไลต์ของสารให้ความหวานธรรมชาติ ยับยั้งการเพิ่มจำนวนของเซลล์มะเร็งกระดูกชนิดออสทีโอซาร์โคมา U2OS ของมนุษย์. Oncology letters. PMID: 29552164
56. Kasiram MZ, Hapidin H, Abdullah H (2022) กรดแทนนิกเพิ่มประสิทธิภาพของซิสพลาตินต่อการเพิ่มจำนวนเซลล์และการตายแบบอะพอพโทซิสของเซลล์มะเร็งกระดูกชนิดออสทีโอซาร์โคมาของมนุษย์ (U2OS). Pharmacological reports. PMID: 34652600
57. Erdogan MK, Usca AB (2025) กรดกัลลิกช่วยเพิ่มการตายของเซลล์ที่เกิดจาก Olaparib และลดความต้านทานต่อ Olaparib ในสายเซลล์มะเร็งกระดูกชนิดออสทีโอซาร์โคมาของมนุษย์ U2OS. Current issues in molecular biology. PMID: 39996825
58. Bryan TM, Englezou A, Dalla-Pozza L (1997) หลักฐานเกี่ยวกับกลไกทางเลือกในการรักษาความยาวของเทโลเมียร์ในเนื้องอกของมนุษย์และสายเซลล์ที่มาจากเนื้องอก Nature medicine. PMID: 9359704
59. Burke TM, Markwald RR, McHill AW (2015) ผลของคาเฟอีนต่อนาฬิกาชีวภาพของมนุษย์ทั้งในร่างกายและในห้องปฏิบัติการ. Science translational medicine. PMID: 26378246
60. Tamai TK, Nakane Y, Ota W (2018) การระบุตัวปรับนาฬิกาชีวภาพจากยาที่มีอยู่. EMBO molecular medicine. PMID: 29666146
61. Cellosaurus. U2OS (CVCL_0042). SIB Swiss Institute of Bioinformatics. สามารถเข้าถึงได้ที่: https://www.cellosaurus.org/CVCL_0042 (เข้าถึงเมื่อวันที่ 11 สิงหาคม 2026)